人结肠癌LS174T/5-Fu多药耐药细胞系的建立

目的 建立人结肠癌多药耐药细胞系,并研究其生物学特性.方法 以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为诱导药物,LS174T细胞株为研究对象,利用浓度递增诱导法,建立LS174T/5-Fu多药耐药细胞系.MTT法测定药物敏感性,光镜、细胞计数法、流式细胞仪及RT-PCR等方法观察其生物学特征及多药耐药相关基因(MRP)mRNA表达.结果 历时6个月成功建立人结肠癌多药耐药细胞系LS174T/5-Fu,对5-Fu耐药指数为40.24,且与羟基喜树碱、顺铂、依托泊苷和脱氧氟尿苷等多种化疗药物有不同程度的交叉耐药性;细胞形态发生改变;倍增时间较亲代细胞延长;细胞周期发现其G1和S期细胞增加,G2期细胞减少;MRP mRNA表达增高.结论 LS174T/5-Fu细胞是一种可靠的人结肠癌多药耐药细胞系,该细胞系的建立为深入研究5-Fu诱导人结肠癌多药耐药的发生机制奠定了基础.     

长链非编码RNA ATB靶向miR-144对人黑色素瘤细胞A375增殖与侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA ATB对人黑色素瘤细胞A375增殖与侵袭的影响及可能机制。方法将A375细胞分为untreated组(对照组)、si-NC组(阴性对照组)与si-ATB组(实验组),转染小干扰RNA沉默A375细胞中lncRNA ATB的表达,实时定量PCR方法检测lncRNA ATB与miR-144的表达,双荧光素酶分析验证二者的靶向关系;MTT方法检测A375细胞增殖能力的变化,Tanswell实验检测A375细胞侵袭能力的变化。结果转染小干扰RNA能够显著降低A375细胞中lncRNAATB的表达水平,上调miR-144的表达水平(P0.01),荧光素实验表明lncRNA ATB直接靶向miR-144。沉默lncRNAATB后,A375细胞的增殖与侵袭能力显著降低(P0.01)。结论 lncRNA ATB通过靶向调控miR-144的表达促进人黑色素瘤细胞A375增殖与侵袭。     

显微分光光度计测定法对大鼠诱发性乳腺癌及其癌前病变的细胞发生研究

本实验用显微分光光度计测定DMBA诱发大鼠乳腺癌过程中的正常、增生终末蕾腺上皮和肌上皮细胞,以及癌细胞核面积与相对DNA方量。正常腺上皮细胞多为2cDNA含量,增生腺上皮和癌细胞核面积和相对DNA含量增加,与正常腺上皮之间均有极显著差异(P<0.01),直含图为分散的非整倍体模式。正常与增生肌上皮细胞的胞核面积与DNA方量无显著性差别(P>0.05),直方图为2c分布。上述实验结果提示:终末蕾细胞增生具有发展成乳腺癌的趋势,很可能为大鼠乳腺癌前病变,肌上皮细胞不参与孔腺癌的形成。     

氧化苦参碱抑制肝癌细胞诱导血管内皮细胞增殖作用的研究

目的：探讨氧化苦参碱(OM)对肝癌细胞诱导血管内皮细胞(VEC)增殖的抑制作用。方法：用MTT法检测不同浓度OM对VEC、人肝癌SMMC-7721细胞增殖及SMMC-7721细胞诱导VEC增殖的影响。结果：OM浓度为2．5～10mg／mL时，对VEC增殖的抑制率为4．6％～36．4％；OM浓度为0．313～10mg／mL时，对肝癌细胞增殖的抑制率为2．53％～88．61％；经浓度为1．25～10mg／mL OM作用后的肝癌细胞培养液对VEC增殖的抑制率为7．69％～38．46％；OM浓度为0．625～10mg／mL时，对肝癌细胞培养液诱导的VEC增殖的抑制率为3．57％～57．54％。结论：OM对肝癌细胞诱导的VEC增殖具有抑制作用．     

干扰素抗体产生规律性及对疗效影响初探

干扰素治疗期间,部分患者可产生干扰素抗体,其产生率和临床意义各家报告不一。国内尚未见这方面系统研究报道,因此我们以多中心合作研究,用ＥＩＡ法和ＡＮＢ法,对国产重组干扰素α2ｂ(ｒＩＦＮα2ｂ)治疗慢性乙型肝炎期间,干扰素抗体产生的规律性及患者转归进行了系统观察。1　研究对象和方法11　研究对象选择111　试验对象的来源　选择1995年3月至1999年3月安医大附院、安徽省立医院和皖南医学院附属弋矶山医院等传染科住院的慢性乙型肝炎患者。112　试验对象的入选标准:(1)慢性乙型肝炎诊断按1995年全国传染病与寄生虫病会议修订的诊断分…     

心源性晕厥的临床特点及研究

目的探讨心源性疾病与晕厥的相关性.方法回顾分析26例心源性晕厥的临床资料.结果本组引起心源性晕厥的基本病因可分为以下几种类型:①快速性心律失常7例(26.9%);②缓慢性心律失常12例(46.2%);③急性心肌梗塞2例(7.7%);④QT延长综合症1例(3.8%);⑤心肌病1例(3.8%);⑥左房粘液瘤1例(3.8%);⑦风湿性心脏病(二尖瓣狭窄)2例(7.7%).结论心源性晕厥是由不同病因,不同心电学特征共同致一过性脑供血不足的综合症,它被认为心源性死亡的先兆,故临床应特别关注和警觉.     

OH、HLDFP方案治疗晚期结直肠癌近期疗效比较

经病理证实为晚期结直肠癌患者74例,38例采用OH方案化疗86个周期(OH组),36例采用HLD-FP方案化疗73个周期(HLDFP组).结果OH、HLDFP组总体有效率(CR PR)分别为36.8%(14/38)、38.9%(14/36),骨髓抑制发生率分别为68.6%、78.1%,腹泻发生率分别为55.8%0、50.7%,恶心呕吐发生率分别为61.6%、75.3%,两组相比P均>0.05.神经毒性发生率分别为35.6%、0,P<0.05.OH、HLDFP组患者平均住院时间分别为9.8、10.7 d,平均住院费用分别为8673.7、6574.9元,两组相比,P均<0.05.认为两种方案治疗晚期结直肠癌的近期疗效无明显差别,骨髓抑制及胃肠道不良反应发生率相近.OH方案可明显改善患者的生存状况,患者住院时间少,但易发生神经毒性并增加住院费用;HLDFP方案未发现神经毒性,患者住院费用较低,适用于经济状况欠佳、年龄偏大、并发其他疾病的患者.     

多胺浓度对pGEM体外转录影响的研究

目的：研究3种多胺在体外转录中对RNA合成的调节，对3种多胺影响转录的能力进行比较。方法：用Run-off体外转录法，以EcoRI酶切pGEM质粒线性DNA为模板，由T7 RNA聚合酶催化反应。结果：3种多胺对转录的影响，在低浓度时随着多胺浓度的升高促进作用增强。在高浓度时随着3种多胺浓度增加，促进作用逐渐减弱。结论：多胺影响体外转录中RNA的合成，存在促进其合成的最适浓度。3种多胺对转录的促进作用各不相同，其促进转录的能力大小依次为精胺，精脒，腐胺。     

DOI诱导的头部抽动模型大鼠脑内多巴胺受体基因表达

目的 用DOI诱导大鼠头部抽动建立Tourette综合征动物模型,观察该模型大鼠脑内前额叶和纹状体多巴胺D1、D2受体基因表达.方法 将20只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠腹腔注射DOI,对照组注射相同体积的生理盐水,连续给药21 d.RT-PCR法检测大鼠纹状体、前额叶皮层的多巴胺D1、D2受体基因表达.结果 实验组前额叶D1受体mRNA表达的相对灰度值(0.897±0.378)与对照组(0.417±0.299)相比增高,有显著统计学差异(P＜0.05),纹状体D1受体mRNA表达无明显变化[(1.162±0.159)vs(0.996±0.479)],实验组前额叶和纹状体D2受体mRNA表达均无明显变化.结论 DOI诱导的Tourette综合征动物模型大鼠前额叶皮层多巴胺D1受体基因表达增高.     

骨肉瘤化疗中甲氨蝶呤血药浓度测定及影响因素分析

背景与目的:大剂量甲氨蝶呤(MTX)和亚叶酸钙解救仍然是目前治疗骨肉瘤最有效和最常用的辅助及新辅助化疗方案之一,由于MTX在体内代谢的个体差异较大,因此化疗风险很大,必须通过监测MTX血药浓度,及时调整MTX使用剂量和亚叶酸钙的解救剂量。本研究探讨骨肉瘤化疗中患者个体因素及化疗副反应与MTX血药浓度之间的相关性。方法:58例骨肉瘤患者,采用大剂量MTX静脉滴注后配合亚叶酸钙解救,化疗期间给予水化、碱化及利尿等处理并配合进行MTX的血药浓度监测。采用逐步回归变量筛选、Fisher确切概率法、行平均分检验等统计学方法分析患者个体因素及化疗副反应与MTX血药浓度之间的相关性。结果:骨肉瘤患者0、24、48、72 h MTX血药浓度分别为(242.08±107.31)、(2.86±2.21)、(0.47±0.67)和(0.09±0.17)mg/L,与测量时间成反比,与用药的次数、MTX用量成正比关系,与MTX和DDP的累积用量无明显相关性,48和72h MTX血药浓度与肝功能损害间有明显相关性。结论:MTX血药浓度监测对于指导MTX个体化用药、CF的及时解救及减少毒副反应的发生具有重要意义。