HLA—Cw的免疫调节作用对肾移植受者长期存活的影响

排斥反应一直被视为肾移植后面临的主要难题，其发生是影响移植肾长期存活的重要因素。多项研究已证实HLA配型与移植后排斥反应的发生存在相关性。HLA-Cw作为经典的HLA—Ⅰ类分子以及杀伤细胞免疫球蛋白样受体的重要配体，其在移植免疫中的作用受到越来越多的关注。本文就HLA-Cw的免疫调节功能及其在肾移植免疫中的作用作一综述。     

低强度脉冲超声对兔膝骨性关节炎软骨细胞整合素-局部粘着斑激酶-促分裂原活化蛋白激酶力化学转导通路相关蛋白表达的影响

目的观察低强度脉冲超声（LIPUS）对兔膝骨性关节炎（OA）软骨细胞中整合素-局部粘着斑激酶（FAK）-促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）力化学信号转导通路相关蛋白表达的影响。 方法共选取18只新西兰大白兔,其中12只进行膝OA造模,其余6只作为正常对照。于制模后第4周处死实验兔,提取软骨细胞进行体外培养并鉴定。将所培养细胞分为正常对照组、OA模型组及OA超声组。待细胞传至第2代时,正常对照组及OA模型组细胞不给予任何处理,OA超声组细胞则给予LIPUS辐射。于LIPUS持续作用1周后收集各组细胞,应用Western blot技术检测各组细胞中Ⅱ型胶原、蛋白多糖、基质金属蛋白酶(MMPs)-13、整合素β1、FAK、MAPK（如p38、ERK1/2、JNK）蛋白表达以及磷酸化蛋白表达情况。 结果①OA模型组及OA超声组Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量均较正常对照组明显降低（P<0.05）,并以OA模型组下降幅度较显著,与OA超声组间差异具有统计学意义（P<0.05）。②OA模型组及OA超声组MMP-13含量均较正常对照组明显增高（P<0.05）,并以OA模型组增高幅度较显著,与OA超声组间差异具有统计学意义（P<0.05）。③OA模型组及OA超声组整合素β1、磷酸化FAK含量均较正常对照组明显增高,且以OA超声组增高幅度较显著,与OA模型组间差异具有统计学意义（P<0.05）。④OA模型组磷酸化p38、ERK1/2及JNK含量均较正常对照组明显增加（P<0.05）,OA超声组上述指标则较OA模型组显著降低（P<0.05）。 结论LIPUS体外辐射可抑制OA软骨细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖降解及MMP-13表达,同时还能促进整合素β1表达以及FAK磷酸化,抑制p38、ERK1/2、JNK磷酸化,提示LIPUS辐射可能通过启动整合素-FAK-MAPK力学信号转导通路诱导软骨细胞外基质发生改变。     

免疫抑制剂FK506所致血糖升高副作用的机制研究

 目的：探讨FK506对血糖调节的副作用,并研究其机制。方法：健康SD大鼠12只,随机分为2组：对照组（生理盐水,1 mL·kg-1·d-1）、给药组（FK506,1 mg·kg-1·d-1）。每天监测体重,每2 d测空腹血糖。在第15天取脂肪组织,实时荧光定量PCR检测脂联素（adiponectin）、瘦素（leptin）、内酯素（visfatin）、抵抗素（resistin）、视黄醇结合蛋白4（RBP4）及氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）mRNA的表达;Western blotting检测PPAR-γ及脂联素蛋白的表达。结果：第10天开始,给药组大鼠空腹血糖逐渐升高,显著高于对照组（P＜005）;第14天,给药组空腹血糖由（510±062）mmol/L升到（773±073） mmol/L,对照组空腹血糖无明显变化;与对照组相比,给药组大鼠脂肪组织adiponectin和leptin mRNA的表达量显著降低（P＜001）,而visfatin、resistin和RBP4 mRNA表达明显升高（P＜0.05）;与对照组相比,给药组脂肪组织PPAR-γ mRNA表达量降低（P＜001）;与对照组相比,给药组脂肪组织PPAR-γ及脂联素蛋白表达量明显降低（P＜0.01）。结论：FK506可能通过抑制PPAR-γ的表达,影响脂肪因子的表达,影响血糖。     

HLAMatchmaker软件在HLA配型中的应用原理及前景

随着分子生物学技术的发展,HLA基因序列、氨基酸序列及蛋白质晶体空间结构逐步明确,使得可以运用计算机生物信息方法在移植术前HLA配型中发挥更为有效的作用。HLAMatchmaker软件是基于Excel软件开发,通过对供、受者HLA抗原氨基酸序列上的eplets进行比较,寻找合适的供者,提高移植术后受者生存率。运用此软件分析可避开基因错配位点,让群体反应性抗体高敏感性受者亦能接受移植。本文就HLAMatchmaker软件在HLA配型中的应用原理及前景展开综述。     

投掷性股骨干骨折1例

患者男,18岁,在投弹中,突然感到右大腿部疼痛,不能站立,于1992年1月18日入院.平时有大腿无疼痛病史.入院后查体:一般情况好,右大腿中下段肿胀、畸形、压痛、局部有异常活动及骨擦音,拍片示:右股骨中下段螺旋、粉碎性骨折.入院后经胫骨结节牵引一周,在腰麻下行右股骨切开复位钢板螺钉内固术,术后一年骨折愈合好,拆除内固定,右下肢功能正常.     

应用非线性动力学指标分析大鼠癫痫模型脑电信息变化

背景脑电活动的动力学特征,是在癫痫发作前数分钟至数十分钟脑电活动的昆沌分维数、相关维数、Lyapunov指数、混沌复杂度和自由度等指标显著减少,脑电趋于同步和周期化,预示癫痫发作.研究表明非线性动力学指标寻找表征脑电混沌状态的特征参数具有可行性.目的探索应用非线性动力学指标近似熵和相关维,分析大鼠癫痫发作过程的整个脑电信号特征.设计以动物为研究对象,观察、验证性研究.单位解放军第二炮兵总医院医学工程科和消化内科及解放军第四军医大学生物医学工程系物理教研室.材料实验于2001-09/2002-01在解放军第四军医大学生物医学工程系复杂性实验室完成.选择雄性SD大鼠6只,体质量150～200 g.干预雄性SD大鼠,腹腔注射水合氯醛0.5 mL,处于深度麻醉状态,脑电平稳后,将贝美格注射液稀释一倍,腹腔注射0.5 mL.一段时间后大鼠开始身体抽搐,并伴有低沉叫声的癫痫发作,连续记录整个过程.根据实验记录大鼠脑电波形与试验过程中的发作症状,分别抽取未发作、发作前、发作中和发作后四个阶段大鼠脑电波进行非线性分析.计算近似熵与相关维的变化.主要观察指标未发作、发作前、发作中和发作后四个阶段近似熵与相关维的变化.结果6只大鼠进入实验分析.癫痫发作中时,脑电信号的近似熵和相关维(0.447±0.126,2.166±0.377)明显低于发作前(0.807±0.182,4.773 ±0.319)和发作后(1.241±0.125,6.042±0.373)(t=-3.984～17.902,P＜0.01).其中发作前,发作中与未发作时脑电信号近似熵和相关维(1.313±0.090,6.405±0.694)的差异比较,t=-5.228～12.740,P＜0.01.结论非线性动力学方法近似熵和相关维数据变化,揭示了大鼠癫痫发作期和发作前后脑电信息活动特征性及其差异,表明了癫痫发作过程脑电信号复杂度的变化规律.     

七氟醚预处理中谷氨酸转运体的激活触发对脑缺血的保护作用

目的:观察谷氨酸转运体是否参与七氟醚预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用。方法:实验于2006-01/06在徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室电生理研究室进行。清洁级SD幼年大鼠若干只,低温分离海马,沿矢状面切成300～400μm厚脑片。脑片分为8组,即缺氧无糖组、苏-羟天冬氨酸250,500,1000μmol/L苏-羟天冬氨酸组、40mL/L七氟醚预处理组、苏-羟天冬氨酸250,500,1000μmol/L分别 40mL/L七氟醚预处理组,每组8张脑片。将海马脑片放于34℃的正常的人工脑脊液中孵2h之后,平衡灌注,双脉冲方波刺激电极置于海马CA3区的Schaffer侧支,记录电极置于海马CA1区锥体细胞层。各组药物预处理30min,进行冲洗15min后,观察缺氧无糖14min、复氧供糖1h各组海马脑片顺向群峰电位的变化。实验结束后各组取海马脑片四五片用TTC染色,酶标仪测定A490值,分析脑片活性。结果:①40mL/L七氟醚预处理组较缺氧无糖组缺氧所致的诱发顺向群峰电位的消失时间明显延迟,顺向群峰电位恢复程度和顺向群峰电位恢复率显著改善,差异有统计学意义[(5.4±0.7),(2.5±0.6)min;65.6±18.4,8.4±18.2;0,75%;P<0.01]。苏-羟天冬氨酸250,500,1000μmol/L组顺向群峰电位消失时间和恢复率与缺氧无糖组差异无显著性意义(P>0.05)。②250μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组缺氧所致的诱发顺向群峰电位的消失时间明显延迟,顺向群峰电位恢复程度显著改善(P<0.01),恢复率与40mL/L七氟醚预处理组差异无显著性意义。而500μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组,1000μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组七氟醚预处理顺向群峰电位的消失时间明显加速,顺向群峰电位的恢复程度减弱(P<0.05,0.01),恢复率差异有显著性意义(P<0.05,0.01)。③海马脑片A490正常值是1.04±0.04。复氧供糖1h,缺氧无糖损伤会明显降低海马脑片TTC染色A490值(0.36±0.07),组织损伤率严重。40mL/L七氟醚预处理组、250μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组细胞损伤率低于缺氧无糖组(P<0.01,0.05);500μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组,1000μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组组织损伤百分率较40mL/L七氟醚预处理组严重(P<0.05,0.01)。结论:七氟醚预处理对海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用有可能谷氨酸转运体参与,并与抑制剂成剂量依赖性。     

应用非线性动力学指标分析大鼠癫痫模型脑电信息变化

背景：脑电活动的动力学特征，是在癫痫发作前数分钟至数十分钟脑电活动的混沌分维数、相关维数、Lyapunov指数、混沌复杂度和自由度等指标显著减少，脑电趋于同步和周期化，预示癫痫发作。研究表明非线性动力学指标寻找表征脑电混沌状态的特征参数具有可行性。目的：探索应用非线性动力学指标近似熵和相关维，分析大鼠癫痫发作过程的整个脑电信号特征。设计：以动物为研究对象，观察、验证性研究。单位：解放军第二炮兵总医院医学工程科和消化内科及解放军第四军医大学生物医学工程系物理教研室。材料：实验于2001-09／2002-01在解放军第四军医大学生物医学工程系复杂性实验室完成。选择雄性SD大鼠6只，体质量150～200g。干预：雄性SD大鼠，腹腔注射水合氯醛0．5mL，处于深度麻醉状态．脑电平稳后，将贝美格注射液稀释一倍，腹腔注射0．5mL。一段时间后大鼠开始身体抽搐，并伴有低沉叫声的癫痫发作，连续记录整个过程。根据实验记录大鼠脑电波形与试验过程中的发作症状，分别抽取未发作、发作前、发作中和发作后四个阶段大鼠脑电波进行非线性分析。计算近似熵与相关维的变化。主要观察指标：未发作、发作前、发作中和发作后四个阶段近似熵与相关维的变化。结果：6只大鼠进入实验分析。癫痫发作中时，脑电信号的近似熵和相关维(0．447&;#177;0．126，2．166&;#177;0．377)明显低于发作前(0．807&;#177;0．182，4．773&;#177;0．319)和发作后(1．241&;#177;0．125，6．042&;#177;0．373)(t=-3．984～17．902．P&;lt;0．01)。其中发作前，发作中与未发作时脑电信号近似熵和相关维(1．313&;#177;0．090，6．405&;#177;0．694)的差异比较，t=-5．228～12．740．P&;lt;0．01。结论：非线性动力学方法近似熵和相关维数据变化，揭示了大鼠癫痫发作期和发作前后脑电信息活动特征性及其差异，表明了癫痫发作过程脑电信号复杂度的变化规律。     

供者HLA—Cw和受者KIR基因多态性以及HLA—Cw／KIR组合型对移植肾功能的影响

目的探讨移植肾功能与供者HLA—Cw基因型、受者KIR基因型以及HLA—Cw／KIR基因组合型的关系。方法收集2010年9月至2011年4月于温州医科大学附属第一医院接受肾移植的78例受者随访资料（随访截止时间为2013年3月）。根据随访过程中对受者移植。肾功能的评估进行分组,34例受者分人移植肾功能异常组,44例受者分入移植肾功能正常组。分析两组受者临床资料,用聚合酶链反应一序列特异性引物技术检测并分析供者HLA-Cw基因和受者KIR基因多态性及HLA—Cw／KIR组合型。结果两组肾移植受者在年龄、性别、冷缺血时间、热缺血时间、HLA错配数、免疫抑制方案、发生急性排斥反应方面差异均无统计学意义（P均〉0．05）。移植肾功能异常组受者相应供者HLA—C1／C1基因组合型出现频率为70．6％,高于移植肾功能正常组（40．9％）,差异具有统计学意义（X^2=6．798,P〈0．05）;HLA—C1／C2基因组合型出现频率为23．5％,低于移植肾功能正常组（50．0％）,差异具有统计学意义（X^2=5．678,P〈0．05）。移植肾功能异常组受者KIR2DL2、KIR2DS2、KIR3DLl基因型出现频率分别为17．6％,17．6％,79．4％,均低于移植肾功能正常组（45．5％,43．2％,95．5％）,差异均具有统计学意义（X^2=6．674,5．741和4．836,P均〈0．05）;KIR2DLl、KIR2DS4基因型出现频率均为97．1％,均高于移植肾功能正常组（均为79．5％）,差异均具有统计学意义（X^2均=5．263,P均〈0．05）。HLA-C1／C2-KIR2DLl、HLA-C1／C2-KIR2DL3组合型出现频率在移植肾功能异常组中分别为17．6％,14．7％,低于移植肾功能正常组（43．2％,38．6％）,差异具有统计学意义（X^2=4．513和5．424,P均〈0．05）。结论供者HLA—Cw基因型、受者KIR基因型以及供、受者间特定的HLA-Cw／KIR组合型可能对移植肾功能产生影响。