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目的构建肿瘤坏死因子α诱导蛋白3相互作用蛋白1(TNIP1)真核表达载体(p EGFP-N3-TNIP1),观察了解外源TNIP1蛋白的细胞内定位及其在He La细胞中的表达.方法应用RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增TNIP1基因的开放阅读框(ORF),将目的片段亚克隆入p EGFP-N3中,筛选阳性克隆,提取质粒测序进行鉴定.将表达质粒转染He La细胞,荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的表达与定位,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和蛋白质免疫印迹分别从m RNA水平和蛋白水平来检测TNIP1在He La细胞中的表达情况.MTT实验检测细胞增殖情况、流式细胞仪检测细胞周期.结果重组质粒双酶切鉴定,在1.9 kb左右有明显的条带,DNA测序结果证实重组质粒p EGFP-N3-TNIP1中含有的目的基因片段与Gen Bank上登录号为BC014008.1的TNIP1基因序列完全一致;荧光倒置显微镜观察重组质粒转染He La细胞后有绿色荧光蛋白的表达,转染48 h后通过q RT-PCR和Western blot分别检测到TNIP1m RNA和蛋白质的表达,均较对照明显升高,外源性的TNIP1蛋白主要定位于细胞质中.结论成功构建了p EGFP-N3-TNIP1真核表达载体,外源表达的TNIP1蛋白主要分布于He La细胞的细胞质部分,过表达TNIP1蛋白不影响He La细胞的细胞周期及细胞生长存活. 相似文献
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1 临床资料患儿男,6岁.发现左上臂外侧类圆形淡红色囊性肿物8个月余.患儿于8个月余前,无明显诱因,于左上臂外侧皮肤出现一淡青色结节,约黄豆大小,无自觉症状,未予重视.后肿物逐渐增大,伴轻微痒疼感,于当地医院就诊,行B超检查(未见报告),建议行手术切除,家长拒绝,后自行外包草药2个月余,具体药名不详,无效.2个月余前... 相似文献
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自从1967年Kelman首次将超声乳化应用于白内障手术以来,超声乳化白内障吸除术手术在眼科临床得到广泛开展.目前临床广泛使用巩膜隧道小切口及透明角膜小切口两种方法.我院开展的经角巩膜隧道切口行超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术,获得满意疗效.现将结果报告如下:…… 相似文献
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牙龈卟啉单胞菌( Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)是牙周感染最重要的致病菌,与慢性牙周炎的发生发展密切相关。其致病性归因于一系列毒力因子如菌毛、荚膜、脂多糖、牙龈蛋白酶等。相关毒力因子的致病机制引起了国内外学者的广泛关注和重视。本文就牙龈卟啉单胞菌表面结构菌毛、荚膜及菌体分泌脂多糖、牙龈蛋白酶等重要致病因子的致病机制研究进展做一综述,以期为牙周炎的防治提供新的靶点和思路。 相似文献
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喻丽 《中华现代眼科学杂志》2006,3(2):163-164
随着广谱抗生素、皮质类固醇的大量应用,导致正常菌群失调、生理性防御能力下降等现象,却有利于真菌的生长繁殖,使真菌性角膜溃疡的发病呈逐年上升趋势。我国患者中以青壮年男性农民居多,发病诱因以外伤,尤其是植物性外伤为多。由于目前尚无特效的抗真菌药物,加之视觉器官的细致和娇嫩,对视功能有相当严重的危害。笔者近年来用中西医结合治疗本病。获得满意效果,现总结报告如下。 相似文献