乙型肝炎病毒全基因组PCR扩增产物的直接测序

目的建立乙型肝炎病毒全基因组PCR扩增产物直接测序的方法并对序列进行分析。方法PCR法扩增乙型肝炎病毒全长基因,PCR扩增产物纯化后直接进行DNA序列测定;将已测定序列的PCR扩增产物用上述方法进行再测序以评价该方法的保真性;应用进化树分析及对齐比较等方法分析HBV基因型和YMDD变异情况。结果20例标本中有18例扩增阳性并得到全长基因组序列;保真性分析表明,本法引起的人为核苷酸突变率约为1‰;序列分析表明,18例标本中有10例为基因型B、8例为基因型C;2例出现耐拉米夫定的YMDD变异,均为基因型C。结论乙型肝炎病毒全基因组PCR扩增产物直接测序,方法简便,可满足临床和科研的需要。     

警惕“沉默的杀手”丙肝

60岁的林先生每年单位体检转氨酶都“超标”,现在烟也戒了、酒也不喝了、注意休息了……做了许多常规检查都没找到原因。今年,当他发现肝已经出现纤维化,到专科医院检查才发现原来是感染了丙肝!而罪魁祸首,就是十几年前手术时输过血!     

传染性非典型性肺炎患者肝功能变化

目的 探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者病程中出现肝功能异常的情况及可能的影响因素。方法 普通型SARS组91例,重型23例,普通肺炎组61例,入院后检测肝功能情况。结果 普通型SARS组肝功能异常发生率68.1%,显著高于普通肺炎组的24.6%(x~2=27.7,P<0.01),以丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶的轻、中度升高为主。重型患者肝功能异常发生率高达95.7%,年龄明显增大。结论 SARS患者发生肝功能损害的机会较大,可能与疾病本身有关,程度较轻,重型SARS的肝功能损害则与年龄有关。     

阿德福韦酯治疗e抗原阳性慢性乙型肝炎的疗效预测因素研究

目的探讨阿德福韦酯治疗HBeAg( )慢性乙型肝炎的疗效预测指标,为个体化治疗提供依据。方法于2004年10月至2005年12月在北京大学第一医院等5所医院进行该研究,选取连续应用阿德福韦酯治疗48周的HBeAg( )慢性乙型肝炎患者共140例,采用Logistic回归分析阿德福韦酯治疗48周的疗效预测指标。结果基线血清丙氨酸转氨酶(ALT)、HBV DNA水平和24周时HBV DNA阴转为48周HBV DNA阴转的预测指标;研究中基线ALT≥134.5U/L、HBV DNA≤6.57lg拷贝/mL和24周HBV DNA阴转者治疗至48周时的HBV DNA阴转率(93.3%)、HBeAg阴转率(60%)、HBeAg血清转换率(40%)均较高。治疗24周时HBV DNA未阴转者继续治疗至48周时仍有47.8%的患者发生HBV DNA阴转、8.6%的患者发生HBeAg血清转换。结论慢性乙型肝炎患者应用阿德福韦酯治疗前HBV DNA低水平、ALT高水平且24周时HBV DNA阴转是48周疗效较好的预测指标;治疗24周时HBV DNA未阴转者不应放弃治疗。     

HIV感染者/AIDS患者与肿瘤病人T淋巴细胞亚群数量的比较

目的　探讨艾滋病病毒 (HIV)感染者和艾滋病 (AIDS)患者与肿瘤病人CD+4和CD+8T淋巴细胞 (TH 和TS 细胞 )数量的变化并进行比较。方法　用流式细胞仪检测 78例HIV感染者 /AIDS患者和 37例肿瘤病人外周血中TH 和TS 细胞的数量以及计算TH/TS 的比值 ,组间比较采用双侧t检验。结果　HIV感染者 /AIDS患者TH细胞显著减少 ,且下降的幅度大 ,TH<5 0 0 / μl的占 83 3% ,其中 <2 0 0 / μl的占 5 6 4 % ,TH/TS 平均为 0 2 9;肿瘤病人TH 细胞计数也明显降低 ,TH<5 0 0 / μl的占 70 3% ,其中 <2 0 0 / μl的占 18 9% ,TH/TS 平均为 1 2 6。同一水平CD+4T细胞计数所对应的CD+8T细胞数量 ,HIV感染者 /AIDS患者高于肿瘤病人 ;两组病人TS 数量都随TH 数量的升高而增加。HIV感染者 /AIDS患者TH 细胞计数 <肿瘤病人 ,TS 细胞计数 >肿瘤病人 ,HIV感染者 /AIDS患者TH/TS 比值倒置 ,而肿瘤病人TH/TS 比值 >1。结论　HIV感染者 /AIDS患者和肿瘤病人存在不同程度的细胞免疫功能损害 ,T淋巴细胞亚群的检测可作为两者免疫诊断和免疫功能监测的指标之一 ,对于病人的治疗和预后有一定的意义     

人类免疫缺陷病毒1型特异性CD8+T细胞应答中人类白细胞抗原Ⅰ的限制位点

目的 了解HIV-1特异性CD8＋T细胞应答及其相关的人类白细胞抗原Ⅰ型（HLA-Ⅰ）的限制位点。方法 以位于HIV-1 Gag、Vif、Nef区域的合成肽作为刺激表位，选择来自4例健康者的外周血单个核细胞（PBMC）建立4株EB病毒转化的B淋巴细胞样细胞系（BLCL），以此作为抗原递呈细胞（APC），对1例临床上长期不进展的HIV-1感染者CD8＋T细胞的IFN-γ分泌细胞频率进行体外酶联免疫斑点技术（ELISPOT）测定和HLA—I限制位点比对分析。结果在特异性CD8＋T细胞应答中HLA—1分子能限制性递呈HIV-1表位，且呈现出高特异性；HLA—Ⅰ位点A03、A26、C04和C08限制性递呈HIV-1Gag区域表位，A03和C08还限制性递呈Nef区域表位。结论 HIV-1Gag区域表位的HLA—Ⅰ限制位点可能包括A03、A26、C04和C08，Nef区域表位的限制位点可能包括A03和C08。     

医院工作人员SARS感染的原因及预防对策

目的 探讨医院工作人员在收治严重急性呼吸综合征(SARS)过程中受到感染的原因及预防对策，以减少医院感染的发生。方法 对我院从2003年2～4月约3个月收治SARS过程中受到感染的医院工作人员的临床特征及感染的原因及在此过程中所不断完善的预防对策做一回顾性分析。结果 我院感染SARS19名工作人员中11名护士、8名医生，通过近距离接触患者或接触患者的呼吸道分泌物等途径传播，在收治过程中，通过不断完善消毒隔离及个人防护措施、加强宣传教育，医院感染得到有效控制。结论完善医院感染管理监督机制、强调个人防护是减少SARS医院感染的关键。     

广州地区严重急性呼吸综合征170例临床特点分析

目的探讨当前流行的严重急性呼吸综合征(SARS)的流行病学临床表现、血常规及X线表现等特点.方法回顾性分析该院于2003年2～4月收治的170例SARS的临床资料.结果170例SARS患者的年龄2～89岁,平均(41.2±18.1)岁.男72例,女98例.该病的潜伏期为2～14 d,平均(7.1±3.9)d.主要临床表现有发热(100%)、咳嗽(55.3%)、乏力(21.8%)、气促(能.2%)、腹泻(7.1%)、头痛(24.7%)、肌肉酸痛(33.5%);热程多为3～23d,平均热程(9.4±3.7)d;外周血白细胞正常(71.8%),降低(22.4%),淋巴细胞计数减少者占(24.7%),嗜酸性粒细胞(EOS)降低(83.8%);全部患者均有胸片影像学改变.治疗以综合治疗为主,对症支持治疗,经验性使用抗生素、糖皮质激素对改善中毒症状、阻止病情有一定疗效.结论SARS有强传染性,发热、咳嗽、胸片示肺部炎症表现,外周血白细胞正常式降低,淋巴细胞降低,嗜酸粒细胞降低为主要表现.     

Bm-12促C6胶质瘤细胞生长及凋亡作用的研究

目的探讨Bm-12促C6胶质瘤细胞生长及凋亡的作用。方法显微镜观察不同浓度Bm-12对C6胶质瘤细胞生长的影响,用PBS溶液作为对照组。并用流式细胞仪检测不同浓度Bm-12对C6胶质瘤细胞凋亡的影响。结果不同浓度Bm-12加入C6胶质瘤细胞培养液后,C6胶质瘤细胞生长明显受抑制,细胞形态及数量明显发生变化,且凋亡率均较对照组显著增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论 Bm-12可以抑制C6胶质瘤细胞生长,并诱导其凋亡。