AF-2结构域突变的SF1酵母表达质粒的构建及其与PNRC相互作用分析

目的 探讨激活功能-2(AF-2)结构域在孤儿核受体辅活化富含脯氨酸的受体辅调节蛋白(PNRC)相互作用的意义。方法 采用PCR和DNA重组技术构建了野生型SF1和AF-2结构域突变的SF1的酵母表达质粒pGBT9-SF1／HBDD和pGBT9-SF1／HBD／AF-2 del并采用酵母双杂合分析比较了它们与PNRC的相互作用强弱。结果 SF1／HBD能与野生型PNRC及其N-末端缺失突变体PNRC270-327，PNRC278-300产生较强的相互作用，而AF-2缺失的SF1／HBD不与这些PNRC片段发生相互作用。结论 功能性的AF-2结构域是SF1与PNRC相互作用所必须的。     

染色质中低分子量肽类与基因表达调控

遗传学和生物化学的研究已经积累了调节原核细胞中蛋白质合成的许多重要资料和一套基本原理。然而关于真核细胞中基因表达调节的分子机制,目前所知甚少。由于真核生物染色质具有复杂的物理构型和超分子机构。要选择和暴露那些应该被转录的DNA节段,无疑地需要许多调节因子的参与。对于染色质中调控因子的研究首先集中在组蛋白,然后是非组蛋白。现已公认,核内各种组蛋白能非特异地阻遏基因的读译,而非组蛋白可能参与真核细胞中基因转录的特异性     

基于PNRC的抗Ras PDT融合多肽通过影响核受体途径抑制MCF-7细胞的增殖

目的 研究设计、合成的基于富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor eoactivator protein,PNRC)的抗Ras PDT融合多肽(PDT-PARP)在MCF-7乳腺癌细胞中的定位、对核受体信号传导途径的影响及其抗肿瘤细胞增殖活性.方法 用多肽合成仪合成PNRC的抗Ras PDT融合多肽PDT-PARP、不含PDT的PARP、单独的PDT多肽以及FITC标记的PDT-PARP、PARP,HPLC分析和纯化后,荧光显微镜下观察PDT-PARP、PARP在MCF-7细胞中的分布情况,流式细胞仪做定量分析.虫荧光素酶报告基因检测PDT-PARP对野生型PNRC辅活化ER反式激活功能的影响.MTS检测PDT-PARP对MCF-7细胞的抗增殖活性.结果 PDT-PARP能进入MCF-7细胞;该多肽能抑制野生型PNRC对ER反式激活功能的辅活化作用,并对MCF-7细胞的增殖具有一定的抑制作用.结论 PNRC抗RasPDT融合多肽可通过影响核受体途径抑制乳腺癌细胞的增殖.     

毒杀芬对孤儿受体雌激素相关受体1(ERR α-1)的拮抗作用

目的 研究毒杀芬（Toxaphene)对孤儿受体雌激素相关受体1（Estrogen-related receptor,ERRα-1）活性的影响。方法 细胞瞬时和稳定转染及氯霉素酰基转移酶和芳香族化酶活性测定。结果 毒杀芬抑制了由ERRα-1所介导的氯霉素酰基转移酶的转录表达和辅活化子（Coactivator)GRIP1诱导的ERRα-1的活性。在构建的稳定高表达ERRα-1的HepG2肝癌细胞株中,ERRα-1增加了芳香族化酶的转录表达,ERRα-1高表达细胞株与10μmol/L浓度的毒杀芬温育24h后,芳香族化酶活性降低到非ERRα-1转染的HepG2细胞中芳香族化酶活性的水平。结论 毒杀芬是ERRα-1的拮抗剂,它拮抗了ERRα-1调节芳香族化酶转录的作用,从而使该酶的表达量降低。     

核受体超家族及其辅调节子的研究进展

核受体(nuc lear receptor,NR)是一类在生物体内广泛分布的,配体依赖的转录因子,其成员众多,构成了一个大家族,可分为三大类:类固醇激素受体、非类固醇激素受体和孤儿核受体。核受体与相应的配体及其辅调节因子相互作用,调控基因的协调表达,从而在机体的生长发育、新陈代谢、细胞分化及体内许多生理过程中发挥重要作用。核受体的功能障碍将导致一系列疾病如癌症、不育、肥胖、糖尿病。核受体能结合经药物设计而被修饰的小分子,从而调控相关疾病如癌、骨质疏松、糖尿病等。它们是有希望的药物设计靶标。因此,寻找孤儿受体的配体和信号通路成…     

法尼酯X受体的研究进展

法尼酯X受体(farnesoidXreceptor,FXR)是核受体超家族的成员,可被内源性配体胆汁酸激活,在胆汁酸、胆固醇及脂蛋白代谢中起着十分重要的作用。随着新配体及靶基因的发现,FXR展示了更多的生理或病理作用。本研究将对FXR研究进展作一综述。1FXR概述FXR与其他典型的核受体成员具有     

医学院校本科生生物化学教学探讨

通过总结近几年从事医学5年制及7年制本科生生物化学教学的经验,分析了当前医学院校5年制及7年制本科生生物化学教学中面临的主要困难,存在的主要问题,探讨了新形势下进一步有效提高本科生生化教学质量的可行性及方法。