亚砷酸钠对人淋巴细胞增殖抑制机制的实验研究

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人淋巴细胞体外增殖抑制的影响。方法用不同浓度的NaAsO2处理细胞后,通过噻唑蓝还原法,吖啶橙荧光染色法和流式细胞术观察NaAsO2对淋巴细胞增殖的影响。结果NaAsO2低、中、高剂量对淋巴细胞增殖有抑制作用,荧光染色法测得凋亡率分别为10.07%、18.79%、28.35%。结论NaAsO2抑制淋巴细胞增殖,可能与其诱导凋亡有关。     

DNA修复基因XPD多态性与地方性砷中毒关系的研究

目的研究核苷酸切除修复基因XPD单核苷酸多态性与地方性砷中毒患病风险的关系。方法采用病例对照研究，包括正常对照99人，地方性砷中毒患者92人。以聚合酶链反应一限制性长度多态性方法分析XPD基因Lys751 Gin多态性，比较不同基因型和地方性砷中毒患病风险的方法。结果病例组中野生型XPD75Gln纯合子的频率明显低于对照组，和携带XPD751Lys／Lys基因型比较，携带至少一个XPD75Gln等位基因的个体即Lys／Cln和Gin／Gin基因型。地方性砷中毒发病风险显著增加，锨值分别为1．59和8．56。结论XPD基因Lys751Gln多态性和地方性砷中毒易感性有关，XPD751Gln等位基因可能是地方性砷中毒的风险等位基因。     

氟砷联合染毒对正常人淋巴细胞染色体损伤的实验观察

目的：观察氟、砷单独及联合作用对正常人淋巴细胞染色体的损伤作用及特点。方法：采用双核淋巴细胞微核试验观察不同剂量氟、砷单独及联合作用对正常人淋巴细胞染色体的损伤情况。结杲：染毒72h后，0．1μmol／L NaAsO2、10μmol／L NaF、50μmol／L NaF和0．1μmol／L NaAsO2＋10μmol／L NaF组的微核率与阴性对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05），其它各染毒组的微核率与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05～0．01）；NaAsO2与NaF联合作用时，NaAsO2与NaF对淋巴细胞染色体畸变作用并没有交互作用，仅表现为简单的相加作用。结论：NaAsO2与NaF均可引起淋巴细胞染色体损伤；NaAsO2与NaF联合染毒时，其对淋巴细胞染色体的毒性仅表现为简单相加作用。     

地方性砷中毒生物标志物的研究概况及展望

地方性砷中毒是因自然界环境中含砷量过高所引起的生物地球化学性疾病。地方性砷中毒在世界范围内流行广泛，已成为一种世界性的严重威胁人类健康的公害病。目前世界上有许多国家的饮用水中砷浓度超过WHO指导标准0．01mg／L或超过了其国家所规定的标准，包括阿根廷、澳大利亚、孟加拉国、智利、中国、匈牙利、印度、墨西哥、秘鲁、泰国和美国等。多年来，世界各国学者对地方性砷中毒进行了广泛而深入的研究，在病因学、主要临床表现、发病机制、流行规律及防治措施等方面取得了显著进展。目前人们已对地方性砷中毒的发病机制有了初步的了解。但由于缺乏有效的手段，早期发现并确定高砷暴露对人体健康的影响以及地方性砷中毒病情、预后的预警、评价系统，制约了砷与健康关系研究的进一步深入。     

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4B肝细胞结合蛋白基因的筛选与克隆

目的筛选并克隆人肝细胞cDNA文库中与丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)相互作用蛋白的基因,明确其具体作用机制。方法应用酵母双杂交系统3,将多聚酶链反应(PCR)法扩增的HCVNS4B基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和Xα半乳糖(Xαgal)上进行双重筛选阳性菌落,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠埃希菌,接种在氨苄西林LB平板上,选择生长菌落,提取质粒酶切鉴定,测序并在GenBank中进行生物信息学分析。结果成功克隆出HCVNS4B基因并在酵母细胞中表达,与肝文库配合后选出既能在4缺(SD/TrpLeuAdeHis)培养基又能在铺有Xαgal的4缺培养基上生长,并变成蓝色的真阳性菌落5个,序列分析显示,筛选到的肝细胞蛋白编码基因参与细胞代谢、生物氧化、生长调节等多种生物学过程。结论成功克隆出HCVNS4B蛋白与肝细胞相互作用蛋白,为进一步研究NS4B蛋白的功能,阐明HCV致病的分子生物学机制提供了新线索。     

砷暴露与肝损伤关系的Meta分析

目的探讨地方性砷中毒尤其是饮水型砷暴露与肝损伤是否有相关性。方法检索纳入了国内外有关地方性砷中毒中砷暴露与肝损伤的文献6篇,采用Meta分析的方法,应用固定效应模型和随机效应模型进行综合的定量分析,计算合并OR值及95%可信区间,利用漏斗图法定性评价发表偏倚。结果异质性检验x~2=8.01,P=O.16,采用固定效应模型进行Meta分析,合并OR=3.72,95%CI为3.08~4.49,表明Meta分析砷暴露组的肝损害发病可能性高于对照组。结论地方性砷中毒病区的砷暴露可能会引起暴露人群的肝脏疾病损伤高发,长期砷暴露会对当地居民的肝功能或器质性损伤存在一定程度的不良影响。     

GSTO1基因多态性与新疆饮水型地方性砷中毒的关联研究

目的探讨GSTO1基因多态性与饮水型地方性砷中毒易感性的关系。方法对新疆奎屯砷中毒病区慢性砷中毒患者96人,病区内对照组73人,以及非病区外对照组89人,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对GSTO1基因rs4925及rs11509438多态位点进行检测,用聚合酶链反应-双对引物多态性(PCR-CTPP)方法对GSTO1基因rs11509437位点进行检测,分析不同基因型与砷中毒发病风险的关系。结果 GSTO1基因rs4925、rs11509438及rs11509437位点的基因型以及等位基因频率在三组间的分布差异均无统计学意义(P0.05),GSTO1基因rs4925、rs11509438及rs11509437位点的基因多态性在不同砷暴露人群中的发病风险,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 GSTO1基因rs4925、rs11509438及rs11509437位点可能与新疆饮水型地方性砷中毒无关联。     

双环醇下调细胞周期素B2基因启动子转录活性研究

目的探讨双环醇对细胞周期素(cyclin)B2启动子转录活性的调节作用.方法根据文献报道的结果确定细胞周期素B2的启动子DNA序列区域,以聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素启动子(B2p),克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclinB2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性:并与双环醇共刺激的HepG2细胞,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果成功获得细胞周期素B2启动子的止确克隆.pCAT3-cyclinB2p和双环醇(106Mol/L)瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的2.4倍,pCAT3-cyclinB2p的0.35倍.结论细胞周期素B2启动子有顺式激活下游基因的活性,双环醇具有对细胞周期素B2基因有下调作用.     

显脉香茶菜化学成分的研究

从江西省宜丰地区产显脉香茶菜的嫩茎、叶中分得3种二萜化合物,根据光谱解析及理化鉴别,分别确定为lasiokaurin,ponicidin和冬凌草素(oridonin),系首次从该植物中分得。     

新药研究与开发中的知识产权保护

随着改革开放的不断发展和新药研究开发的逐步深入 ,我国与药品有关的法律体系日趋完善 ,已先后颁布和实施了专利法、商标法、新药审批办法、中药品种保护条例、药品行政保护条例等法律法规。这些法律法规的实施 ,激发了我国广大科技人员从事新药开发与研究的积极性 ,促进了我国新药研究从仿制为主向研制具有自主知识产权新药的战略转移 ,为我国新药研发走向国际化奠定了法律基础。1　我国对新药知识产权保护的法律体系根据我国的具体国情 ,药品研制者除和其它国家一样可以获得专利保护外 ,对于经国家药品监督管理局批准颁发新药证书后的新…