旋毛虫成虫期特异性基因全长cDNA的克隆与序列分析

目的获取编码旋毛虫5日龄成虫(AD5)期特异性基因完整开放阅读框架(openreadingframe,ORF)cD-NA分子。方法利用地高辛标记的AD5期特异性cDNA片段T671作为探针对AD5cDNA文库进行核酸杂交筛选,将筛选出的阳性克隆进行测序,利用分子生物学软件进行分析。结果获得1个全长1132bp的cDNA分子,该cD-NA含有1个1032bp完整的ORF,该ORF编码1个343个氨基酸残基组成的多肽,其分子量理论推导值为35.1kDa,等电点(isoelectricpoint,IP)为4.8。InterProScan分析显示117～120氨基酸残基(SGYG)为粘多糖结合位点,27～86氨基酸残基为一线虫表皮胶原蛋白N-末端区结构域,153～328氨基酸残基为胶原蛋白螺旋三联体重复区(G-x-y)结构域。SignalPV2.0分析显示,在1～43氨基酸区域为信号肽。Blastn同源性分析表明,与其它已知生物基因序列无明显的同源性,为一新的cDNA分子。但与表皮胶原蛋白同源性较高,大于40％。结论筛选获得一个新的编码AD5期特异性基因的完整ORF的cDNA分子。     

RNA干扰技术在动物寄生线虫研究中的局限性

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是一种应用广泛的基因功能研究技术,不仅应用于模式生物秀丽隐杆线虫中,而且已成为鉴定基因功能高通量的筛选方法。但是,最近的研究发现,RNAi在动物寄生性线虫的应用上还存在一些问题,如：RNAi 在不同线虫体内效果差异较大,同一种线虫不同发育时期的效果差异也较大。产生这些问题的原因可能有：①RNAi传送途径的效率在不同的寄生性线虫中是不同的;②RNAi机制只存在于相关的线虫中,大多寄生性线虫都存在着基因功能缺陷;③RNAi可能受线虫不同生活方式的影响。本文就RNA干扰技术在动物寄生性线虫研究中的局限性作一综述。     

南昌市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染现况及基因型分析

目的分析南昌市HIV/AIDS患者人芽囊原虫的感染状况及基因型。方法 2016年5-9月采用横断面调查的方法对南昌市在册管理的HIV阳性者进行问卷调查。采集HIV/AIDS患者血样和粪样,血样用于检测CD4+T淋巴细胞水平;提取粪便人芽囊原虫DNA基因组,PCR扩增人芽囊原虫小亚基核糖体核糖核酸(SSU r DNA)基因序列片段,对疑似阳性PCR产物进行基因测序,通过基因序列比对进行确诊,并构建进化树进行基因分型。结果共调查HIV阳性者505人,采集粪样505份、血样475份。HIV/AIDS患者人芽囊原虫的感染率为4.16%(21/505),其中男性人芽囊原虫感染率为4.22%(18/427),女性为3.85%(3/78),两者感染率差异无统计学意义(P> 0.05)。来源于市辖各县区疾控中心美沙酮门诊、市传染病医院和市辖区各监狱医院的HIV/AIDS患者人芽囊原虫的感染率分别为3.74%(4/107)、 1.62%(5/308)和13.33%(12/90),监狱医院来源的HIV/AIDS患者人芽囊原虫的感染率高于其他来源医疗机构(P <0.05)。血清CD4+T淋巴细胞计数> 400个/μl和≤400个/μl的HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染率分别为3.29%(5/152)、 4.64%(15/323),差异无统计学意义(P> 0.05)。测序结果显示,南昌市HIV/AIDS患者感染的人芽囊原虫亚型为ST1、 ST3和ST7,分别占4.76%(1/21)、 90.48%(19/21)和4.76%(1/21)。结论南昌市辖区监狱医院来源的HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染率较高;ST3亚型是南昌市HIV/AIDS患者主要感染基因型。     

中国医学生对老年医学的执业意愿调查及干预研究

目的 探讨我国医学生对老年人及老年医学的态度以及老年医学教育对其影响.方法 对4所医科大学正在学习诊断学的医学生进行横断面调查,对北京协和医学院选修老年医学课程的非老年医学专业的研究生进行课前和课后调查.通过电子问卷调查,收集一般信息、与老年人接触经验、对老年人态度以及从事老年医学的意愿,并通过40学时的老年医学课程比...     

旋毛虫新生幼虫cDNA文库的免疫筛选

目的　获取具有抗原性的旋毛虫新生幼虫基因。　方法　以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序及分析。结果　从45×105旋毛虫新生幼虫cDNA文库重组子中共获得158个阳性克隆。序列分析结果表明,其中有36个新的cDNA序列,已报道的序列有5个,有12个序列无开放阅读框架(ORF),与旋毛虫线粒体基因组DNA同源。　结论　获得具有抗原性的旋毛虫抗原编码cDNA分子     

重庆市江津区社区医院住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素分析

目的　了解重庆市江津区住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法　采用横断面调查的方法对重庆市江津区某社区医院住院人群进行问卷调查，并采集粪便和血液样本，进行镜检和PCR检测。采用单因素分析和logistic回归分析对人芽囊原虫感染的影响因素进行分析。结果　共调查198名住院患者，人芽囊原虫感染率为10.61%（21/198），女性感染率（12.10%）高于男性（8.11%），但差异无统计学意义。10 ~ 20岁年龄组感染率最高，为19.23%；其次为60岁以上年龄组，为17.74%；20 ~ 40岁年龄组患者感染率最低，为2.38%；不同年龄组患者人芽囊原虫感染率差异有统计学意义（[χ2] = 9.538，P = 0.035）。家庭厕所为旱厕的患者人芽囊原虫感染率显著高于家庭厕所为水冲厕所的患者（33.30%和9.10%；[χ2] = 4.908，P = 0.027）。感染的人芽囊原虫基因型有ST1、ST3、ST6和ST7 4种基因型，以ST6和ST3型为主，分别占47.62%（10/21）和38.10%（8/21）；其中男性感染的基因型仅有ST3型和ST6型。多因素logistic回归分析结果显示，家庭中是否饲养宠物是影响人芽囊原虫感染的重要因素之一[OR = 3.798，95% CI（1.245，11.581），P < 0.05]。结论　重庆市江津区社区住院人群人芽囊原虫感染率较高，主要基因型为ST6型和ST3型，饲养宠物可能是影响人芽囊原虫感染的主要因素之一。     

重庆市江津区社区医院住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素分析

目的　了解重庆市江津区住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法　采用横断面调查的方法对重庆市江津区某社区医院住院人群进行问卷调查,并采集粪便和血液样本,进行镜检和PCR检测。采用单因素分析和logistic回归分析对人芽囊原虫感染的影响因素进行分析。结果　共调查198名住院患者,人芽囊原虫感染率为10.61%（21/198）,女性感染率（12.10%）高于男性（8.11%）,但差异无统计学意义。10 ~ 20岁年龄组感染率最高,为19.23%;其次为60岁以上年龄组,为17.74%;20 ~ 40岁年龄组患者感染率最低,为2.38%;不同年龄组患者人芽囊原虫感染率差异有统计学意义（[χ2] = 9.538,P = 0.035）。家庭厕所为旱厕的患者人芽囊原虫感染率显著高于家庭厕所为水冲厕所的患者（33.30%和9.10%;[χ2] = 4.908,P = 0.027）。感染的人芽囊原虫基因型有ST1、ST3、ST6和ST7 4种基因型,以ST6和ST3型为主,分别占47.62%（10/21）和38.10%（8/21）;其中男性感染的基因型仅有ST3型和ST6型。多因素logistic回归分析结果显示,家庭中是否饲养宠物是影响人芽囊原虫感染的重要因素之一[OR = 3.798,95% CI（1.245,11.581）,P < 0.05]。结论　重庆市江津区社区住院人群人芽囊原虫感染率较高,主要基因型为ST6型和ST3型,饲养宠物可能是影响人芽囊原虫感染的主要因素之一。     

重庆市江津区小学生芽囊原虫感染情况及其危险因素

目的　了解重庆市江津区小学生芽囊原虫感染率及其危险因素。方法　2018年4月,采用横断面调查方法对重庆市江津区某小学在校学生进行问卷调查,并采集其粪便样本进行镜检、体外培养及PCR检测,以了解当地学生芽囊原虫感染情况及基因型分布。采用单因素分析和logistic回归分析对该校学生芽囊原虫感染危险因素进行分析。结果　 共调查466名小学生,平均年龄（9.81 ± 1.66）岁,男性236例 （50.64%）、女性230例（49.36%）。小学生芽囊原虫感染率为15.24%（71/466）,其中男生感染率为16.52%（39/236）、女生为13.91%（32/230）,差异无统计学意义（[χ2] = 0.616,P = 0.433）。1～5年级小学生芽囊原虫感染率分别为6.35%（4/63）、5.17%（3/58）、21.74%（15/69）、25.30%（21/83）、10.19%（11/108）和20.00%（17/85）,不同年级小学生芽囊原虫感染率差异有统计学意义（[χ2] = 15.410,P = 0.009）。该校小学生感染的芽囊原虫基因型有4种（ST1、ST3、ST6和ST7）;其中ST6型最多,占45.07%（32/71）;其次是ST3型,占25.35%（18/71）。多因素logistic回归分析结果显示,少数民族[比值比（odds ratio,OR）= 4.259,95%可信区间（confidential interval,CI）：（1.161, 15.621）]和母亲小学及以下受教育程度 [OR = 9.038,95% CI：（1.125,72.642）]是小学生芽囊原虫感染的危险因素。结论　重庆市江津区小学生芽囊原虫感染率较高,感染的主要基因型为ST6和ST3,少数民族、母亲小学及以下受教育程度是该人群芽囊原虫感染的危险因素。