CD14抑制肽的体外生物活性

目的研究CD14抑制肽(CD14inhibitory peptide,CD14-IP)与CD14的结合活性及对内毒素(LPS)和脂多糖结合蛋白(LBP)诱导的人单核巨噬细胞株U937表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法进行CD14-IP与CD14的结合实验。U937细胞用佛波脂(PMA)诱导成熟后分为五组:正常对照组、LPS组(100ng/mLLPS 100ng/mLrhLBP)、高剂量多肽组、中剂量多肽组及低剂量多肽组,后三组分别给予10μg/mL、1.0μg/mL和0.1μg/mL的CD14-IP。用ELISA测定培养细胞上清TNF-α的含量,用RT-PCR测定U937细胞TNF-αmRNA的表达水平。结果CD14-IP有较强的与CD14结合的能力;CD14-IP组TNF-α和TNF-αmRNA水平均较LPS组低,较正常组高。结论CD14-IP能与CD14结合,并能降低培养细胞TNF-α和TNF-αmRNA的表达,具有抑制CD14生物活性的作用。     

Rab1对海水干预肺微血管内皮细胞β肾上腺素受体表达的调节作用

目的研究Rab1对大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)β肾上腺素受体(β-ARs)表达的调节作用。方法取原代培养的RPMVECs作为研究对象,设计3个实验:(1)检测海水干预对β-ARs表达的影响,设对照组和海水处理(SW)组。(2)构建大鼠野生型Rab1慢病毒表达载体(Rab1WT)和Rab1阴性突变体慢病毒表达载体(Rab1N124I),检测两种质粒转染对β-ARs及其亚型(β1-AR、β2-AR)表达的影响,设对照组、转染Rab1WT组(WT组)和转染Rab1N124I组(N124I组)。(3)检测Rab1WT转染对海水处理β-ARs表达的影响,设对照组、SW组和转染Rab1WT后海水处理组(WT/SW组)。上述3个实验中,对照组RPMVECs常规培养至实验结束;SW组细胞常规培养后用海水处理2h;WT组和N124I组细胞分别转染Rab1WT和Rab1N124I(滴度109TU/ml);WT/SW组细胞转染Rab1WT后培养48h,用海水处理2h。β-ARs及其亚型的表达均采用配体饱和测定法进行检测。结果 (1)对照组和SW组RPMVECs表面β-ARs的表达量分别为2107.00±202.36和1324.00±130.01cpm/105细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)对照组、WT组和N124I组β-ARs的表达量分别为2048.00±207.64、2833.00±203.07和1040.00±91.59cpm/105细胞(P<0.05),β1-AR分别为517.78±29.65、591.22±18.29、364.11±20.68cpm/105细胞(P<0.05),β2-AR分别为1627.90±112.27、2262.10±169.33和694.33±29.79cpm/105细胞(P<0.05)。与对照组比较,WT组β1-AR的表达增加了14.2%(P<0.05),β2-AR增加了49.0%(P<0.01)。(3)SW组β-ARs的表达量为1276.00±121.42cpm/105细胞,与对照组(2059.00±174.62cpm/105细胞)比较下降了38.0%(P<0.01),WT/SW组β-ARs的表达量为2017.20±101.14cpm/105细胞,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),与SW组比较增加了58%(P<0.01)。结论海水干预可降低β-ARs在RPMVECs细胞膜上的表达,Rab1可对抗该作用,使β-ARs的表达上调。     

小细胞肺癌多药耐药细胞差异表达片段I-2^PP2A在多种肿瘤细胞中表达的研究

目的:检测小细胞肺癌多药耐药细胞H446/CDDP差异表达片段I-2PP2A在多种肿瘤细胞中的表达情况,以了解I-2PP2A基因的表达分布特点及功能特征,为进一步相关研究奠定基础.方法:利用Northern杂交与半定量RT-PCR相结合的方法检测I-2PP2A在H446、H446/CDDP、A549、A549/CDDP、SK-HEP-1、Namalwa、SGC7901等7种肿瘤细胞中的表达.结果:I-2PP2A在H446细胞、H446/CDDP细胞及Namalwa细胞中均有表达,经进一步图像分析及统计学处理表明I-2PP2A在H446/CDDP细胞中的表达量明显高于在H446细胞中的表达量(P<0.01),在H446/CDDP与Namalwa间的表达量无明显差异(P>0.05).结论:相对于H446细胞来说,I-2PP2A在其耐药细胞株H446/CDDP中有差异高表达.I-2PP2A可能参与了H446/CDDP多药耐药性的形成,其参与途径可能与细胞凋亡有关.     

肿瘤细胞内pH调节机制的研究进展

肿瘤细胞在有氧的条件下也优先进行糖酵解以提供能量，并生成大量乳酸；恶性肿瘤细胞胞膜葡萄糖转运载体和糖酵解酶的基因表达增强，这一改变是恶性肿瘤细胞有氧醇酵解（ａｒｅｏｂｉｃｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ）的关键性代谢标志［１］。一些正常组织（如运动时的骨骼肌）也...     

人β防御素-2基因的合成及其真核表达载体的构建

目的 合成人β防御素-2(Human β-defensin-2，hBD-2)基因并构建其真核表达载体，为hBD-2基因的转染和表达奠定基础。方法 根据GenBank中的hBD-2结构基因序列，设计合成了3条长度为82bp的长寡聚核苷酸引物(H1、H2、H3)，用PCR延伸扩增的方法进行全长为211bp的基因合成；PCR产物经双酶切后，克隆人真核表达载体pLXSN并导入细菌扩增。结果 PCR产物和重组载体经凝胶电泳及测序分析，证实合成的基因与原序列一致，并成功克隆到真核表达载体pLXSN上。结论 用PCR延伸扩增法合成基因，能方便快捷地获得目的基因片段，提高了基因合成的准确性，为基因的转染和表达提供了帮助。     

模拟4000m高原下犬脂肪栓塞综合征模型制作及其急性肺损伤预警指标观察

目的 :研究高原脂肪栓塞综合征 (FES)模型制作及其急性肺损伤预警指标。方法 :1 4只犬在模拟 40 0 0m高原随机分为FES组与对照组。FES组以 1 3ml/kg同种脂肪液静脉注射。结果 :伤后犬立即呼吸窘迫 ,PaO2 下降 ,双下肺可闻及湿性罗音 ,病理检查见肺内广泛粒细胞浸润、脂肪栓塞、肺泡水种。 (PaO2 /F1 0 2 )× (吸入气体压 /平原空气压 ) <30 0。结论 :以 1 3ml/kg同种脂肪液静脉注射可建立较好的犬高原FES模型。 (PaO2 /F1 0 2 )× (吸入气体压 /平原空气压 ) <30 0 ,对高原FES诊断有一定帮助。伤后早期呼吸窘迫 ,外周血PMN和血小板计数及FN含量下降 ,PaO2 下降 ,GPT、共轭二烯、唾液酸的一过性升高 ,对高原FES的发生有一定预测意义     

肺脏在多器官功能障碍综合征中的作用研究进展

多器官功能障碍综合征 (MODS)是严重创伤、休克、感染及大手术后最严重的并发症 ,在其发生发展过程中 ,肺脏是最易受损伤的首位靶器官 ,急性肺损伤 (ALI)和急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)出现最早 ,发生率也最高[1～ 2 ] 。MODS已成为临床死亡的主要原因 ,是目前国际医学界研究热点之一。人们对MODS的研究付出了很多的努力 ,并取得了较大进展 ,对其概念及发病机制的认识在不断深化与更新。本文阐述了ARDS及MODS概念的演变、发病机制及二者的关系 ,并着重就肺脏在MODS中的地位和作用做一综述。1　MODS概念的演变及其发病机制人们对…     

氨基糖甙类抗生素的临床决策分析

本文采用决策分析的方法,以抗菌活性,不良反应和治疗代价为主要评价标准,对庆大霉素、丁胺卡那霉素、妥布霉素、西梭霉素和乙基西梭霉素等五种氨基甙类抗生素的临床实用价值进行比较。结果表明:丁胺卡那霉素以其抗菌活性强为特点可供首选。决策分析系统为临床安全、有效和经济的使用药物提供了一种综合性的定量分析方法。     

右肩背痛、活动后气促、血性胸水

病历摘要 患者男性，21岁。因“右肩背部痛6个月，右胸痛、活动后气促4个月，加重4d”于2008年11月12日入院。2008年5月，患者无明确诱因出现右肩背部疼痛，无咳嗽、咳痰、喘息、胸闷，无畏寒、发热、盗汗。疼痛呈持续性钝痛，右肩部活动时加重，不放射至其他部位。2008年7月16日患者到当地医院就诊，经摄胸片及抽胸水检验后诊断为“右侧血气胸”，因内科治疗及反复抽液后血胸不能控制，在该院行胸腔镜检查，术中未发现胸腔内明显异常及出血灶，术后予右