SV40诱导髁突软骨细胞永生化的实验研究

目的 建立髁突软骨细胞的永生化细胞系。方法 构建含有ＳＶ４０大Ｔ抗原基因和ｎｅｏ抗性基因的逆转录病毒载体ｐＬＮ／ＳＶ４０,用常规脂质体转染的方法将目的基因导入包装细胞ＰＡ３１７,Ｇ４１８筛选出阳性克隆后,收集其病毒上清感染原代培养的新西兰白兔髁突软骨细胞（ｍａｎｄｉｂｕｌａｒ ｃｏｎｄｙｌａｒ ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅ,ＭＣＣ）,Ｇ４１８筛选阳性克隆并挑选单克隆。设计大Ｔ抗原基因的特异性引物,用ＰＣＲ检测不同克隆株对目的基因的整合。对所挑选的阳性克隆株进行扩增培养及常规的冻存复苏,比较其与ＭＣＣ在形态增殖等方面的特征。结果 １０个阳性克隆株成功扩增出了１１９６ｂｐ的基因片断,有５株细胞传代超过３０次,其中克隆株Ａ２１已在体外１．５年稳定传代１００次以上,命名为永生化髁突软骨细胞（ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｍａｎｄ     

8—MOP,ATRA以及二者联合应用对Mc3细胞超微结构的影响

目的：研究8－MOP与ATRA单独及联合应用对Mc3细胞超微结构的影响。方法：扫描及透射电镜观察细胞形态结构的变化。结果：Mc3细胞经8-MOP与ATRA单独及联合作用5d以后,表面微绒毛减少,细胞表面由折皱状改变为平铺状,细胞伸展面积明显变大,胞核形态规则,核仁数目减少,ATRA组细胞外有网格状小体形成,二者联合应用组细胞有染色质凝聚及边集现象。结论：8－MOP与ATRA单独及联合应用可改变Mc3细胞的超微结构,使其趋向于正常细胞。     

17-β雌二醇对人粘液表皮样癌Mc3细胞增殖的影响

目的 :研究 17-β雌二醇 (E2 )对体外培养的人粘液表皮样癌Mc3细胞增殖的调节作用。方法 :不同浓度、时间的E2 处理Mc3细胞 ,采用细胞计数、克隆形成测定、流式细胞术、免疫组织化学染色等方法 ,检测E2 对人粘液表皮样癌Mc3细胞系细胞群体倍增时间、克隆形成率、细胞周期分布以及对PCNA、Bcl -2阳性表达的影响。结果 :对照组E2 浓度为 10 -9、10 -8、10 -7mol/L时 ,其细胞群体倍增时间分别为 :3 6.0h、2 7.9h、2 8.8h、2 5 .7h ;细胞克隆形成率分别为 :13 .7%、18.1%、17.6%、2 0 .8% ;PCNA的阳性表达率分别为 :62 %、78%、74%、98% ;Bcl-2的阳性表达率分别为 :48%、82 %、77%、93 %。流式细胞术检查结果显示 10 -7mol/L的E2 处理 12、18、2 4h后 ,细胞周期中S期细胞所占比例分别为 :11.3 %、7.0 %、46.7%。结论 :一定浓度的雌激素具有促进细胞G1/S期转换 ,增加S期细胞数量 ,加速DNA合成 ,从而促进细胞增殖。     

西吡氯铵含漱液对牙龈炎菌斑形成的预防作用

目的 :目的 :观察 0 .1%西吡氯铵含漱液对单纯性牙龈炎患者牙菌斑形成的抑制作用。方法 :单纯性牙龈炎 48例 ,随机分为 2组 ,应用双盲法分别给予 0 .1%西吡氯铵含漱液 (实验组 )或爱诺天健含漱液 (对照组 )。(主要成分亦为 0 .1%西吡萌铵 )。每天 5次 ,晨起、睡前、饭后各一次 ,每次含 15ml,持续漱口 60s ,漱口后 1h内禁饮食 ,7d为一疗程。就诊当天 ( 1d)、4d、8d按照Quigley -Hein指数 (Turesky改良 )测定菌斑指数。第 1天行左侧半口上下颌牙齿洁治 ,第 8天行右侧半口上下颌牙齿洁治。结果 :实验组和对照组 ,每组各 2 4例 ,年龄、性别、吸烟史分布无组间差异 (P >0 .0 5 ) ,基线检查菌斑指数无组间差异 (P >0 .0 5 ) ;中期检查实验组和对照组菌斑指数显著低于基线值 (P <0 .0 5 ) ,菌斑指数差值组间比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;终点检查实验组和对照组菌斑指数显著低于中期检查值 (P <0 .0 5 ) ,菌斑指数差值组间比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。中期和终点检查左半口菌斑指数测量值与右半口测量值比较均显著减少 (P <0 .0 5 )。结论 :0 .1%西吡氯铵含漱液可预防单纯性牙龈炎患者牙菌斑的形成。