白藜芦醇及其衍生物抗乙型肝炎病毒体外实验研究

 目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,反式3,4′,5-三羟基-二苯乙烯)及其衍生物体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用,及相关 的量效关系与构效关系。方法 将白藜芦醇及其衍生物作用于HepG2.2.15细胞系,MTT法检测样品对HepG2.2.15细胞的毒 性,ELISA法检测细胞上清中HBsAg,HBeAg的变化,实时荧光定量PCR法检测细胞与其上清中总HBV DNA含量,流式细胞仪 检测白藜芦醇时HepG2.2.15的凋亡作用,进行综合评价。结果 白藜芦醇对抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg,HBeAg治疗指 数(TI)分别为(3.26±0.39),(2.91±0.12);在低毒或无毒浓度(0.11 mol·L^-1)下降低DNA拷贝数;呈浓度依赖性诱导 HepG2.2.15细胞凋亡。结论 白藜芦醇及其衍生物在体外有一定的抗乙型肝炎病毒作用,可能是通过抑制HBV DNA复制, 诱导感染HBV的HepG2.2.15细胞凋亡而发挥抗病毒活性。综合评价白藜芦醇及其衍生物的活性,即白藜芦醇苷(Rn1)、甲氧 基取代羟基的苷[4′-甲氧基-3,3′,5-二苯乙烯-3-葡萄糖苷(Rn3)]效果较好。     

大鼠肌内注射重组人碱性成纤维细胞生长因子的毒性研究

目的：观察大鼠重组人碱性成纤维细胞生长因子（rhbFGF)的毒性反应,提供毒性反应的靶器官及其损伤的可逆性,确定无毒反应剂量,为临床安全用药提供参考。方法：实验分4组,即溶剂对照组及8,32和128μg/L给药组,各组试验动物分别在15,30d和停药后30d活杀,中和抗体检测在20和25d各活杀6只动物。分别观察外周血各项指标,血清系列化10项指标及血清中大鼠抗入rhbFGF滴度等。结果：128μg/(kg.d)肌内注射30d,其主要毒性表现为外周血红细胞数和血红蛋白含量降低。病理检查显示,肾小球内细胞核大的足细胞数目增多,胞体增大,胞浆内出现大小不等的空泡,胸骨皮质及小梁较对照组略有增粗等。结论：128μg/(kg.d)是rhbFGF的明显中毒剂量,主要毒性靶器官是肾脏。32μg/(kg.d)剂量可产生轻度的毒性反应,而μg/(kg.d)剂量无明显毒性作用,为受试药安全剂量。     

阿立哌唑用于酒精依赖的治疗

由于在许多社会事件中都广泛涉及到酒精中毒 ,因此在酒精依赖的药物疗法这一领域中 ,药物发展的主要目标包括发现能有效地对酒精依赖行为进行干涉而且没有限制性副作用的新药。动物或人体的资料表明 ,作为多巴胺 / 5 HT系统的稳定剂 ,阿立哌唑具有几种重要的以多巴胺和 5 HT受体为靶点的作用机制 ,并且副作用更易于接受。文献报道显示 ,多巴胺参与了酒精依赖的形成和强化的过程。多巴胺在成瘾性形成中的重要性说明 ,尽管各种多巴胺拮抗剂有副作用 ,但不妨碍其成为将来研究的重要领域。另外 ,多巴胺部分激动剂对多巴胺受体有高结合力但有…     

蛇毒神经生长因子在大鼠体内的药物代谢动力学与周围神经分布

用［¹²⁵I］标记结合高效液相色谱法和酸沉法研究大鼠体内蛇毒神经生长因子(vNGF)药物代谢动力学. ［¹²⁵I］vNGF体外有刺激神经突起生长活性. 药后血清存在游离和结合［¹²⁵I］vNGF及［¹²⁵I］降解物. 12 mg·kg^-1 iv后t_1/2α为0.13 h，t_1/2β为3.8 h；12和48 mg·kg^-1 im 后t_1/2β为7.1和4.1 h，AUC与剂量呈正比，CL_S相近， 生物利用度为0.62. 体外［¹²⁵I］vNGF与血清最大结合率24.6%±0.4%，平衡解离常数3.2±0.3 nmol·L^-1. im后颈上神经节，注药侧和对侧坐骨神经放射性明显高于血清，注药侧最高，不被100倍非标vNGF抑制. 主要经尿排泄，2 d排出约86%.     

Smad4诱导大规模染色质伸展结构域定位

目的：了解Smad4能否调节大规模染色质结构改变并对其功能区域进行定位。方法：将Smad4及其缺失突变体与pRC-lac载体上lac的阻遏物融合并在AO3-1细胞中表达。该细胞株由CHO细胞衍变而来，整合有256个拷贝串联排列的lac操纵基因。在lac操纵子基因上游含有DHFR基因，可用甲氨蝶呤(MTX)进行基因共扩增。在细胞中lac阻遏物识别和结合lac操纵子基因。用抗lac阻遏物抗体进行免疫组化试验，荧光显微镜下观察染色质结构的改变。结果：野生型Smad4(1～552aa)有一定的诱导染色质伸展能力，且不依赖于TGF-β。N端区域(1～150aa)、中间连接区域(130～325aa)没有诱导大规模染色质伸展活性。C端区域(260～552aa)有一定的诱导染色质伸展能力，而C端缺失38个氨基酸残基的区域(260～514aa)能强烈地诱导大规模染色质伸展。结论：Smad4诱导大规模染色质伸展结构域位于260～514位氨基酸之间，C端38个氨基酸对Smad4诱导大规模染色质伸展有抑制作用。对Smad4诱导大规模染色质伸展活性特性的研究为揭示Smad4在肿瘤发生发展中的作用机制提供了新的途径。     

葛根黄酮的辐射防护及其机制的研究

目的研究葛根黄酮对受照射小鼠的辐射防护作用及其作用机制。方法采用^60Coγ射线照射小鼠模型，观察8Gy照射小鼠30d存活和死亡动物存活时间。在低剂量照射模型观察用药后外周血指标和脏器系数变化，用原位末端标记法观察受照射小鼠脾细胞凋亡，流式细胞仪检测脾细胞凋亡率，同时检测血清中抗氧化酶和脂质过氧化物水平。结果照前给予葛根黄酮能明显提高受照射小鼠的存活率。葛根黄酮能明显促进受低剂量（5Gy）照射后小鼠的外周血白细胞恢复，提高受照小鼠的胸腺和脾脏指数，抑制受照射小鼠脾细胞凋亡，降低脾细胞内的caspase-3活性，降低脂质过氧化物水平。结论葛根黄酮具有明显的辐射防护作用，效果明显优于愈风宁心片。葛根黄酮抗辐射作用机制可能与抑制辐射敏感细胞的细胞凋亡和抗氧化作用有关。     

慢性肾功能衰竭对大鼠红细胞生成素受体基因表达的影响

目的研究５／６肾切除引起大鼠慢性肾功能衰竭并出现贫血时骨髓细胞红细胞生成素（ＥＰＯ）受体基因表达的变化。方法用二步法切除５／６肾组织诱发大鼠肾功能衰竭并出现贫血，另以盐酸苯肼导致的急性贫血大鼠和正常大鼠为对照。用ＲＴＰＣＲ检测３组大鼠骨髓有核细胞ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达，并经灰度扫描，与共扩增的β肌动蛋白基因相比，再用ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔｉｎｇ证实特异性。结果５／６肾切除后５周大鼠出现明显的肾功能衰竭和贫血。正常大鼠、急性贫血大鼠和肾性贫血大鼠骨髓有核细胞ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达量分别为０２６±００６、０５１±０２４、０１５±００６，急性贫血大鼠ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达量高于正常大鼠（Ｐ＜００５），而肾性贫血大鼠明显低于正常大鼠（Ｐ＜００１）。结论大鼠在出现慢性肾功能衰竭并出现贫血时，骨髓有核细胞ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达明显减少，这可能在慢性肾功能衰竭并发贫血过程中起着一定作用。     

葛根素对谷氨酸所致大鼠原代神经细胞损伤的保护作用

目的从膜脂流动性等观察葛根素对谷氨酸所致大鼠原代神经细胞损伤的保护作用。方法建立大鼠原代神经细胞谷氨酸损伤模型,以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P)值和微粘度(η),研究细胞膜脂流动性的改变;MTT(四甲基偶氮唑盐)法、培养介质乳酸脱氢酶(LDH)活力测定观察葛根素的保护作用。结果葛根素组荧光偏振度和微粘度低于谷氨酸损伤组,与尼莫地平作用相当,且呈现剂量依赖关系。葛根素组原代神经细胞LDH的释放减少,吸光度增加,但葛根素对正常细胞增殖无影响。结论葛根素对谷氨酸所致的大鼠原代神经细胞损伤具有保护作用,其保护作用可能与葛根素改善神经细胞膜脂流动性有关。     

肠内菌群对积雪草苷的代谢转化研究

目的通过离体、在体实验研究大鼠肠道内菌群对积雪草苷的代谢作用,并确定代谢产物的化学结构。方法将积雪草苷加入大鼠肠内细菌的菌酶溶液中,温孵一定时间后,以TLC和LC-M S法检测体外实验代谢产物,LC-M S法检测在体实验大鼠尿、血中的代谢产物。结果发现了3个积雪草苷的代谢产物,鉴定了代谢产物的结构。结论积雪草苷可被大鼠肠内菌群代谢,原形物和代谢产物均为吸收入血成分。     

抗乙型肝炎病毒药物的作用机制及靶点的研究进展

目前，抗乙型肝炎病毒(HBV)面临的主要的挑战是当前药物疗效不很理想和耐药HBV株突变。现在的重要任务是发展一个治疗HBV感染的新策略，如发现的新靶点和针对多个靶点的联合治疗。本文对近年来抗HBV部分药物的作用机制和目前发现的抗HBV作用靶点进行综述。