IRES序列连接的D-氨基酸氧化酶与绿色荧光蛋白基因导入K562e细胞的表达

内部核糖体进入位点 (IRES)序列来源于脑心肌炎病毒 ,它可翻译一条mRNA上的两个开放读框 ,由其连接的两个基因的表达率相同。本实验应用以IRES序列连接D 氨基酸氧化酶 (DAAO)和绿色荧光 (GFP)基因构建的逆转录病毒载体 ,转染K5 6 2e细胞获得稳定表达GFP的单克隆细胞KDfGC和KDfGd,测定转基因细胞的荧光阳性率以及荧光强度 ,用D 丙氨酸 (D Ala)作用DAAO+细胞 ,并用酚红氧化法测定培养上清H2 O2 。结果表明 ,KDfGC和KDfGd细胞的荧光阳性率分别为 94 .6 4 % ,96 .31% ;2× 10 4细胞的荧光强度分别为 2 0 2U和 174U。GFP荧光强度与H2 O2 的产量间呈指数相关。结论 :IRES序列调控的双基因可同时表达 ,GFP的荧光强度可以间接地反映DAAO基因的表达水平 ,为了解目的基因表达水平高低提供了新的方法。     

DNA芯片在血液系统疾病中的应用研究

DNA芯片是近年发展起来的一项前沿生物技术，根据DNA芯片表达结果，不仅可精确作出肿瘤的分子分型，还可以识别出以前未知的新的肿瘤亚型，已应用于血液系统最常见的恶性肿瘤白血病、淋巴瘤的分子病理分型、诊断的研究。利用DNA芯片还可以检测白血病、淋巴瘤的功能相关基因，并探寻恶性血液病新的治疗靶基因。应用寡核苷酸芯片测序和测变异技术，可以大规模地检测遗传性疾病的突变基因，可用于遗传性血液病的诊断。     

裸鼠高致瘤性K562-n细胞系基因表达谱的变化

目的　探索K5 62和K5 62 n细胞在裸鼠体内致瘤性不同的分子生物学机制。方法　应用基因芯片技术 ,检测K5 62细胞和K5 62 n细胞的差异表达基因。结果　在被检测的 12 80 0个基因中 ,一些与细胞增殖、分化及凋亡等相关基因的表达在高致瘤性K5 62 n与K5 62细胞中有显著的变化。表达上调的基因包括MAD 3基因、转录因子ⅡA(TFⅡA)λ亚基基因等 ,表达下调的基因包括人Fas相关因子基因、含转录子E2F2、ID3 (DNA结合蛋白 3 )基因的染色体 1p3 6.13～ 3 6.2 2、精氨琥珀酸裂解酶基因等。结论　K5 62 n细胞的裸鼠高致瘤特性 ,和与细胞凋亡过程直接或间接相关的基因表达变化导致的细胞凋亡受阻有关     

异基因造血干细胞移植后IL-2与急性移植物抗宿主病关系的研究

目的：研究异基因造血干细胞移植（allo-HSCT)后细胞因子IL－2的变化与急性移植物抗宿主病（aGVHD)的关系，探讨IL－2在临床aGVHD发病中的作用。方法：30例恶性血液病患者行allo-HSCT，采用双夹心ELISA法检测aGVHD发生时15例患者外周血单个核细胞分泌的IL－2浓度，采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法检测IL－2的基因表达，并与未发生aGVHD患者进行比较。结果：所有患者均获得造血重建，15例发生aGVHD（10例Ⅰ度aGVHD，5例Ⅲ-Ⅳ度aGVHD），发生aGVHD患者的IL－2浓度以及基因表达阳性率均显著高于未发生aGVHD者，并且IL－2浓度随着aGVHD严重程度的增高而增高。结论：IL－2在临床aGVHD发生中起重要的正向调节作用。     

血清半乳甘露聚糖检测对血液病患者侵袭性曲霉菌感染早期诊断的价值

 目的　评价血清半乳甘露聚糖（GM）检测对血液病患者侵袭性曲霉菌（IA）感染早期诊断的价值。方法　前瞻性采用酶联免疫吸附试验（ELISA）每周2次测定患者的GM水平,并计算该诊断试验的各项评价指标。结果　共有来自92例患者的113例次感染进入研究,检测血清标本472份,以确诊IA感染和临床诊断IA感染为真阳性组,排除IA感染为真阴性组,0.7为阈值,连续2次GM结果阳性为真阳性,该诊断试验的敏感度为83.3 %,特异度为91.1 %,阳性预测值为78.9 %,阴性预测值为93.1 %。GM阳性结果较痰培养阳性时间提前4 d（1～7 d）,比影像学改变提早7 d（1～14 d）,较抗真菌治疗提前6 d（1～15 d）。结论　通过ELISA方法进行血清GM检测可以快速、灵敏的为早期诊断IA感染提供有力证据。     

探讨在内科学临床教学中普及双语教学

开展专业课双语教学是高等教育改革发展的必然趋势。本文就双语教学在教师、学生、教材的选用方面存在的问题和改进措施进行探讨,为进一步推动医学双语教学的完善与发展提供理论依据。     

八年制医学生内科学临床实践能力的优化

八年制医学教育是中国医学教育的最高层次,目前正处于试行阶段。八年制培养的医学生应具有较强的临床实践能力。但由于八年制学生时间短、任务重,对其临床实践能力的系统性培养有一定难度。通过对第二军医大学八年制医学生临床基础和临床科研能力的培养模式进行分析探讨,期望能对八年制医学教育学制改革提供一些有益的信息。     

以脾梗死为主要表现的急性早幼粒细胞白血病一例报告

1临床资料患者男性,20岁.因左上腹痛伴发热6 d于2004年4月6日收入我院普外科.既往无传染病史,1个月前在当地医院诊断为“白细胞减少症“,当时骨髓检查未见明显异常,2周前复查血常规正常.查体:T 38.1 C,皮肤黏膜无淤点、淤斑,浅表淋巴结无肿大,心肺(-),腹平坦,左上腹压痛明显,肝肋下未及,脾肋下约0.5 cm可触及,腹水征(-).……     

八年制医学生血液病临床多元化教学模式的探讨

八年制医学教育的目标是培养具有较强临床实践技能和初步科学研究能力的医学人才。目前,在医学教育中,八年制医学科学理论教育优势明显,但临床实践能力的培养相对滞后。临床技能的教学是培养八年制医学生的重要环节,是将基础医学和临床医学有机结合的重要过程。针对血液内科的专业特点,我们进行临床教学的改革,提出了理论-实践循环模式(TPR)、三基训练一体化模式(3B-in-One)、互动式案例教学模式(ICT),同时结合传统的以问题为基础的教学模式(PBL),走出了一条教学新路子。通过临床实践与验证,上述教学模式的改革,培养了学生临床思维方法、医患沟通能力和临床操作技能,提高了血液内科临床学习效果。     

逆转剂半量联合对多药耐药白血病细胞的逆转作用

[目的]探讨逆转剂半量联合逆转多药耐药白血病细胞的效果.[方法]用MTT法和流式细胞术研究环孢菌素A(CsA)、他莫昔芬(TAM)及α-干扰素(IFN-α)逆转小鼠白血病细胞系P388/VCR的作用.[结果]CsA、TAM、IFN-α三种药物单独和联合应用对P388/VCR细胞系的多药耐药均有逆转作用,单用逆转效果依次为CsA＞IFN-α＞TAM;三者半量联合比两两半量联合逆转效果强,接近单独应用CsA,优于单独应用TAM和IFN-α.CsA可使多药耐药细胞系P388/VCR细胞内DNR含量增加.[结论] CsA、TAM及IFN-α三种药物对P388/VCR细胞的多药耐药均有逆转作用,将CsA和TAM半量联合或CsA、TAM及IFN-α三药半量联合与化疗药物同时应用可能更有利于白血病患者MDR的逆转.