富血小板血浆正在成为临床治疗的新希望

<正>血小板的主要功能是参与生理性止血、促进凝血并维持毛细血管的完整性等。20世纪60年代以来已确证血小板有吞噬病毒、细菌和其他颗粒的功能。以往临床静脉输注血小板的主要用途是治疗血小板数量减少或和功能异常的患者;然而血小板作为1种多功能细胞,如今不仅在血栓形成和止血中发挥作用,而且在血管发生、组织修复和炎症等过程中也     

建立多元回归分析方程指导肝移植术前合理预备血

目的 通过收集肝移植患者输血前实验室检查结果、术中出血量和手术前中后各种成分的输注量等数据进行分析,经多因素回归分析,建立回归方程来指导术前备血方案的制定。方法 收集130例肝移植患者术前血常规、凝血5项及血栓弹力图(TEG)检测结果、手术出血量和术中各成分血输注量等数据,使用回归分析作出预测曲线。结果 肝移植患者围术期各血液成分输注率红细胞为21.02U(15.05%),血浆41.65U(29.83%),冷沉淀42.51U(30.45%),血小板34.42U(24.65%),围术期患者输血率分别是术前23.08%、术中100%和术后66.67%;术中4种成分血的输注量都与术中出血量及手术时间显著相关(P0.05),术中红细胞输注量与术前RBC、Hb、HCT有较好的相关性(P0.05);血浆输注量与术前PT及K值具有较好的相关性(P0.05);冷沉淀与FIB及K值具有相关性(P0.05);血小板输注量与术前Plt和MA值具有较好的相关性(P0.05);患者术前是否进行输血干预与术中用血量间差异具有统计学意义(P0.05);不同肝病诊断对术中出血量和输血量也存在较大影响,差异具有统计学意义(P0.05)。根据上述较好的相关性资料得回归方程:1)红细胞备血量(U)=8.506+0.003术中出血量+1.430×手术持续时间+0.646×术前RBC值+0.085×术前Hb值-74.124×术前HCT值;2)血浆备血量=-3 085.251+770.620×手术时间+45.706×术前PT+121.989×K值-2 254.014术前HCT;3)冷沉淀备血量(U)=62.880+2.942×手术时间+0.345×术前PT-85.533×术前HCT-7.167×术前FIB-4.216×K值;4)血小板备血量=-3.773+0.612×手术时间-0.012术前Plt+0.038×MA值。结论 本研究所得的预备血回归方程,可为临床肝移植患者的预备血方案制定提供有效参考。     

严重颅脑损伤脑组织匀浆诱导人脐血MSCs成神经分化的实验研究

目的 探讨严重颅脑损伤时的脑组织匀浆对人脐血间充质干细胞(MSCs)成神经分化的诱导能力.方法 制作小鼠严重颅脑损伤模型,取伤后24 h和正常小鼠脑组织匀浆,对体外培养的第2代MSCs进行诱导.诱导3 d后以荧光免疫细胞组化技术检测细胞内NF和NeuN的表达.结果 成功培养出人脐血MSCs,成神经诱导后,严重损伤性脑组织匀浆诱导组NF和NeuN阳性率分别为(47.31±8.14)%和(58.91±8.12)%,高于正常脑组织匀浆诱导组阳性率(P<0.05).结论 脑组织匀浆可诱导人脐血MSCs向神经元样细胞分化,表达神经细胞特异标志分子NF和NeuN,严重损伤性脑组织匀浆的诱导效果高于正常脑组织匀浆.     

人脐血间充质干细胞促进颅脑损伤大鼠修复的研究

目的 通过建立大鼠颅脑创伤模型,探讨移植人脐血间充质干细胞(MSCs)治疗颅脑损伤的可行性.方法 参考Feeney法制作大鼠颅脑损伤模型.实验分移植组、假手术组和对照组.采用盲法在移植后第1、4、12、21天分别对各组实验大鼠进行神经功能评分(NSS).荧光免疫组化观察移植MSCs 21 d后神经细胞的特异标志分子神经元核抗原(NeuN)的分布情况.结果成功培养人脐血MSCs.假手术组NSS评分在各时间点均与对照组差异有统计学意义(P<0.01),证明颅脑损伤模型建立成功.实验组大鼠NSS评分在第4、12、21天均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).荧光免疫组化结果显示,移植MSCs 21 d后,移植组的神经细胞明显多于对照组.结论 在成功建立大鼠颅脑损伤模型的基础上,显示通过移植人脐血MSCs,对大鼠的颅脑损伤有明显的修复促进作用.     

不同处理方法对血小板表面活化标志CD62p流式检测结果的比较

目的探讨不同处理方法对血小板表面活化标志CD62p流式检测结果的影响。方法采集作者血液中心单采血小板浓缩液5 ml,用贫血小板血浆调整血小板计数为（200～250）×10^9/L（待测PRP,n=6）,分别采用不洗涤不固定不加活化抑制剂与洗涤、固定、加活化抑制剂进行标本处理,流式细胞仪检测血小板活化标志CD62p的变化。结果 CD62p的表达与标本的处理方法有关,但4组之间没有统计学差异（P〉0.05）。其中不洗涤不固定不加活化抑制剂组CD62p测定值为（40.47±2.54）%,低于其它3组检测值[（46.35±2.60）%、（47.54±3.47）%、（45.85±2.88）%]。结论流式细胞术检测血小板活化标志物CD62p中,标本处理步骤越少其活化率就越低,以不洗涤不固定不加活化抑制剂为最好。     

HIV检测长寡核苷酸芯片的研制和临床初步应用

目的 研制人类免疫缺陷病毒(HIV)快速筛查的寡核苷酸芯片并初步应用于临床。方法 以HIV2个基因型(包括9个亚型)的32株典型性代表株和HIV-2特有的vpx序列的保守序列为靶序列,设计长寡核苷酸探针,并制备成Oligo芯片。样品经随机特异性引物PCR标记后与芯片杂交,PCR产物同时进行测序分析。结果 1例HIV患者芯片杂交结果阳性,20名健康对照血清均为阴性。阳性标本的序列分析表明,芯片杂交结果符合测序的分型结果。结论 此芯片可初步用于检测血清HIV RNA,并对HIV基因(亚)型进行分析。     

三种梅毒血清学检验方法的临床应用探讨

目前用于梅毒血清学检验的方法有性病研究实验室试验(VDRL)、不加热血清反应素试验(USR)、快速血浆反应素试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒胶体金法(SYP)、荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体制动试验(TPI)等10种,但临床检验室较常用的是TRUST和TPPA。TP-ELISA多用于血站,临床检验室较少使用。由于检验方法较多,各种方法又有其特殊的临床应用价值,如何更合理地选用这些方法应用于临…     

冻干血小板保护液优化的实验研究

目的优化冻干血小板保护液,减少冻干过程对血小板的损害,有效保护其功能。方法采用3因素3水平的正交设计法,对血小板膜保护剂、血小板激活抑制剂、蛋白质类保护剂的3类成分组成的保护液进行优选。检测血小板最大聚集率、血小板活化标志PAC-1、CD62P的阳性表达率和血小板回收率,通过比较其差异,筛选出本实验的最优冻干血小板保护液。以优化保护液对血小板处理后进行冻干,并以此为实验组,与新鲜血小板和原保护液处理后冻干血小板进行比较验证,验证指标与优选指标相同,比较3者4项指标之间的差异。结果正交设计试验结果显示:血小板最大聚集率组间最高(74.33±24.01)%,血小板活化标志PAC-1和CD62P低于9组平均水平,血小板回收率高于9组平均水平。以主要体现血小板功能的血小板最大聚集率为优先指标,结合其余3项检测指标进行综合分析,在原保护液的基础上,筛选出添加了2%DMSO、第2信使调节剂、2 mmol/L维生素B6,75%的PPP保护液组为最优组合。验证实验结果显示,优化保护液组血小板最大聚集率(76.12±6.02)%,与原保护液组相比,差异有统计学意义(P0.05),与新鲜血小板组相比,差异没有统计学意义(P0.05)。最优保护液组血小板激活标志PAC-1和CD62P阳性表达率分别为(3.23±0.49)%和(36.83±8.21)%,2者与原保护液组、新鲜血小板组相比,差异无统计学意义(P0.05);最优保护液组冻干血小板复水化后血小板回收率为(85.90±2.24)%,与原保护液组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论本实验优化的血小板保护液优于原保护液,明显提高了冻干血小板复水化后最大聚集率,能更好地保护血小板的功能,但对血小板冻干过程的保存损害问题没有得到更好的改善,有待下一步深入研究。     

尿MA检测应以mg/mmol Cr比值为单位

目的 排除随意尿浓缩/稀释对尿肌酐检测的影响。方法 用贝克曼公司生产的Array360特种蛋白分析仪速率散射比浊法进行MA定量检测(以mg/L为单位),以碱性苦味酸法检测尿肌酐含量(以mmol/L为单位),用尿肌酐值校正MA结果。经尿肌酐校正的结果以mg/mmol　Cr表示。将晨尿与稀释尿两类标本检测结果进行配对t检验。结果 健康人组:以mg/L为单位时,晨尿与稀释尿 t=3.82,0.0010.10,差异无显著性。肾脏病患者组:以mg/L为单位时,晨尿与稀释尿t=2.58,0.010.10,差异无显著性。结论 在随意尿MA检测中,结果以肌酐校正后,可排除或减少尿液浓缩/稀释的影响,能满足临床要求,值得推广使用。     

术中及术后使用自体富血小板血浆治疗长骨干骨折后骨不连的应用

目的 观察长骨干骨折患者术中及术后使用 自体富血小板血浆(PRP)治疗骨不连的临床疗效.方法 选取2019年1月～2020年6月本院创伤骨科收治的长骨干骨折后骨不连患者34名,随机均分为实验组:在自体髂骨移植联合术中及术后使用自体PRP治疗[在术中将激活的自体PRP与患者自体髂骨充分融合后一道移植给患者,术后借助超声引...