改良缺血修饰性白蛋白测定法在诊断早期心肌梗死中的应用

目的 评价改良缺血修饰性白蛋白(IMA)测定方法对心肌梗死的早期诊断价值.方法 研究84例胸痛病人,其中确诊急性心肌梗死病人43例,胸痛对照组41例,所有病人均在发病6 h内抽血,用改良钴-白蛋白结合法测定缺血修饰性白蛋白,结果用吸光度大小表示;利用ROC曲线来评价IMA诊断AMI的阀值.结果 AMI组IMA吸光度值为(1.195±0.320),胸痛组IMA吸光度为(0.855±0.068),两组差异显著(P<0.001).ROC曲线下的面积为0.947,当阀值为0.906时,其诊断敏感度为93.0%,诊断特异度82.9%.结论 利用改良方法测定IMA对急性心肌梗死的早期诊断具有一定的应用价值.

Abstract：

Objective To assess the value of an improved ischemia modified albumin (IMA) assay in the diagnosis of early acute myocardial infarction(AMI).Methods Forty-three patients with AMI were enrolled in this study with 41 patients with chest pain serving as the control.Blood samples were obtained from all the patients within 6 h after the onset.IMA was measured by the albumin cobalt binding test and results were presented by absorbance units(ABSU).Receiver operator characteristic curve(ROC curve)was used to evaluate the optimal cut-off value of the assay.Results The mean absorbance in AMI group was obviously higher than that in the control group(1.195±0.320vs 0.855±0.068,P<0.001).The area under the receiver of ROC curve was 0.947,and at the cut-off value of 0.906 ABSU,the sensitivity and specificity of the assay were 93.O%and 82.9%.respectively.Conclusion The improved IMA assay shows good value in early diagnosis of AMI in patients with acute chest pain.     

脊柱转移癌的外科治疗

目的探讨用外科方法治疗脊柱转移癌。方法对20例脊柱转移癌进行手术治疗,术前根据病人重要脏器功能、原发肿瘤恶性程度、重要脏器转移、瘫痪程度、脊柱受累程度选择手术方式。分别采用前路病灶切除加椎体重建内固定、椎板切除神经减压加内固定、单纯脊柱撑开复位固定、经皮椎体成形(PVP)四种术式。结果术后随访2年,中位生存时间11.7月,疼痛缓解80%(16/20),神经功能改善70%(14/20)。结论只要掌握适应证、选择合适的术式,脊柱转移癌外科治疗能减轻疼痛、改善神经功能防止瘫痪、延长患者生存时间。     

基于手法筛选的小鼠骨髓树突状细胞的体外培养方法

目的：通过建立简单经济的小鼠骨髓树突状细胞的体外培养方法,比较不同成熟状态下树突状细胞生物免疫学特性的变化.方法：实验于2004-07/2005-06在南方医院检验医学中心完成.①取C57B/L小鼠骨髓细胞作为树突状细胞的前体细胞.将培养的树突状细胞分成两组,未成熟树突状细胞组（粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子＋白细胞介素4诱导）;成熟树突状细胞组（粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子＋白细胞介素4＋脂多糖）,每天光镜观察各组细胞生长情况.第6天收集细胞,其形态采用电镜观察.②两组树突状细胞表型分析采用流式细胞仪分析.③取BALB/c小鼠脾脏细胞,分离T细胞作为反应细胞.用两组树突状细胞作为刺激细胞.按刺激细胞与反应细胞1：5,1：10,1：20,1：40的比例混合培养,并用T细胞悬液作阴性对照,观察混合淋巴细胞反应情况.结果：①树突状细胞培养的光镜观察：未成熟树突状细胞多为圆形,少量菌幕样突起;脂多糖刺激后,树突状细胞呈悬浮状态,表面较多细长突起.②树突状细胞电镜观察结果：扫描电镜示未成熟树突状细胞表面皱褶和较少的毛刺;成熟树突状细胞表面大量树枝状细长突起.透射电镜示未成熟树突状细胞形态较规则,突起较少,胞浆内有许多吞饮泡及多泡体;成熟树突状细胞形态不规则,胞内囊泡结构减少,细胞器较丰富,细胞核偏向一侧,表面有细长树枝状突起.③各组树突状细胞表型分析：未成熟树突状细胞表面中度表达主要组织相容性复合体Ⅱ类分子,低水平表达CD40,CD86和CD25;成熟树突状细胞表面高度表达主要组织相容性复合体Ⅱ类分子,高水平表达共刺激分子.④混合淋巴细胞反应：未成熟树突状细胞只能轻度刺激同种T细胞增殖;成熟树突状细胞能够刺激T细胞大量增殖.结论：采用重组小鼠粒-巨集落刺激因子和白细胞介素4联合诱导骨髓前体细胞可在体外培养出大量未成熟树突状细胞,低表达共刺激分子,体外诱导同种T细胞增殖能力较弱,呈现耐受性树突状细胞特性,有望应用于移植排斥反应及或自身免疫疾病的生物治疗.     

MR内耳水成像在儿童人工耳蜗植入术前评估中的价值

目的：探讨MR内耳水成像在儿童人工耳蜗植入术前评估中的临床应用价值。方法使用Siemens Avanto 1．5 T磁共振扫描仪对24例听觉障碍拟行人工耳蜗植入术的患儿进行扫描,采集内耳所在区域内的水信号,并送后处理工作站进行图像后处理。最后分析其影像学表现及特征。结果24例患者中内耳形态正常18例,耳蜗发育畸形伴前庭导水管扩张1例,单纯前庭导水管扩张3例,半规管异常1例,Mondini畸形1例。结论 M R内耳水成像技术能清晰显示内耳膜迷路以及内听道精细解剖结构,对于内耳病变的诊断及人工耳蜗植入术的术前评估提供重要信息。     

预输注RelB shRNA慢病毒修饰树突细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

背景：肝移植后的排斥反应是威胁患者和移植物长期存活的主要原因。诱导受者产生特异性免疫耐受是解决排斥反应的理想措施。 目的：探讨RNAi RelB树突状细胞预输注诱导大鼠肝移植特异性免疫耐受的可能性。 方法：将近交系雄性清洁级DA(RT1a)大鼠和近交系雄性SPF级Lewis(RT11)大鼠分别作为供、受体,行原位肝移植手术。术前随机配对分为4组：①对照组,受体鼠移植前不做预输注。②治疗组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠RNAi RelB树突状细胞(5×106)。③未成熟树突状细胞组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠未成熟树突状细胞(5×106)。④成熟树突状细胞组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠成熟树突状细胞(5×106)。 结果与结论：与对照组、未成熟树突状细胞组以及成熟树突状细胞组相比,治疗组移植肝的平均生存时间显著延长。移植后第7天,治疗组天冬氨酸转氨酶,总胆红素水平低于对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组(P < 0.01),移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组天冬氨酸转氨酶,总胆红素均有轻微下降,两组比较差异仍有显著性意义(P < 0.01)。移植后第7天,与治疗组比较,对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平升高(P < 0.01),而白细胞介素4、白细胞介素10下降(P < 0.01);移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平均有下降,白细胞介素4、白细胞介素10水平均有升高,两组比较差异仍有显著性意义(P < 0.01)。对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组移植后第7天排斥活动指数为8.0-9.0。未成熟树突状细胞组第14天肝细胞、内皮细胞坏死及汇管区炎性细胞浸润进一步增多。治疗组移植后第7天排斥活动指数为6.0-8.0,第14天时排斥活动指数为4.0-5.0。结果提示RNAi RelB树突状细胞预输注可以减轻移植肝排斥程度,延长移植肝生存时间,这是通过间接途径实现的,其机制可能与T细胞的调节和无能有关。     

RNAiRelBDC对CD4＋CD25＋双阳性T细胞诱导效应的实验研究

目的:探讨核转录因子NF-кB/RelB基凶沉默的树突状细胞(RNAi RelB dendritic cell,RNAi helB DC)诱导异基因CD4+CD25+双阳性T细胞牛成的生物效应.方法:实验分为Control-DC组、LPS-DC组、RNAi RelB DC组和LPS-RNAiRelB DC组,各组DC均与同种异基因T淋巴细胞混合反应后,采用流式细胞术(FCM)分析各组CD4+CD25+双阳性T细胞牛成比例.结果:Control-Dc组DC较LPS-Dc组DC诱导CD4+CD25+双阳性T细胞的增高幅度更显著,两者差异具有统计学意义(P＜0.01).RNAi RelB DC组和LPS-RNAiRelB DC组DC诱导CD4+CD25+双阳性T细胞牛成比例与LPS-DC组相比均存在显著差异(P＜0.01),RNAi RelB DC组DC诱导CD4+CD25+双阳性T细胞牛成能力较Control-DC组强,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:RelB基凶被沉默后DC具有较强的诱导CD4+CD25+双阳性T细胞生成的能力,表现出未成熟DC的特点,这种RNAi RelB DC有望成为一种新型的致耐受DC用于免疫耐受的诱导研究.     

改良缺血修饰白蛋白测定方法（白蛋白-钴结合试验）的建立

目的建立改良的缺血修饰白蛋白（IMA）测定方法[白蛋白-钴结合（ACB）试验]。方法以1-亚硝基-2-萘酚（NN）代替二硫苏糖醇（DTT）作为显色剂,确定试验的基本条件（最佳波长、反应时间、试剂稳定性等）,并对该试验的精密度、敏感性、线性等进行评价。测定急性心肌梗死（AMI）和胸痛患者的IMA值并进行统计学分析。结果改良ACB试验最佳吸收波长为410 nm,反应体系0～25 min时吸光度值变化稳定,试剂在室温和4℃30 d内性能稳定,反应体系线性良好。批内变异系数（CV）为2.67%,批间CV为5.44%。应用显色剂NN对钴离子（Co2＋）的最低检出限为0.488 mg/L,应用DTT为7.812 mg/L。三酰甘油（TG）〈2.02 mmol/L、血红蛋白（Hb）〈6.9 g/L、总胆红素（TBil）〈66.0μmol/L时无干扰。AMI组为（1.195±0.320）吸光度单位（ABSU）,胸痛组为（0.855±0.068）ABSU,二者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论以NN作为显色剂测定IMA的ACB试验灵敏、方便、简单,适合批量测定。     

人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞培养及生物学特性研究

目的 探讨人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的分离及生物学特性.方法 分别取4例RA患者膝关节滑膜组织、1例软骨瘤患者膝关节滑膜组织和1名健康人膝关节滑膜组织,采用组织块培养法培养FLS,使用相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术(FCM)检测培养细胞的表面标志,酶联免疫吸附法定量检测RA第4代FLS细胞培养液上清液白细胞介素-1受体I型(IL-1RI)和白细胞介素1β(IL-1β)水平.结果 组织块培养法成功培养出FLS.RA患者FLS细胞4~7 d细胞数量明显增加,8~12 d细胞可以长满瓶底.第3代以后细胞均质性最好,3~7代细胞稳定且增殖活跃,8代以后增长缓慢并逐渐老化.软骨瘤患者和健康人滑膜组织培养7 d后才有散在单个FLS细胞爬出,大约16 d后FLS细胞可以长满瓶底.FCM分析RA第4代FLS CD90+细胞的百分率为99.04%,CD3+为2.73%,CD3-CD19+为0.29%,CD3-CD16+CD56+为2.81%,CD14+为5.89%,CD55+为54.17%.RA第4代FLS细胞培养上清液IL-1RI浓度为(158.63±20.32) pg /ml,IL-1β为(4.67±0.82) pg/ml. 结论 组织块培养法能有效分离RA患者FLS,FLS具有高水平表达CD90、IL-1RI和IL-1β的特性.