支架载体在BMP-9转导干细胞成骨基因治疗中特性的研究

目的:比较3种可能的支架载体在以骨形态发生蛋白9(Bone morphogenetic protein 9,BMP-9)介导细胞为基础的裸鼠成骨基因治疗模型中的不同促成骨特性.方法:4～6周龄雌性裸鼠40只,体重15～20 g,随机分为4组.3种支架载体分别为:Ⅰ型胶原纤维,羟基磷灰石-磷酸三钙,脱钙基质骨(Demineralized bone matrix,DBM).分别将表达BMP-9重组腺病毒Ad-BMP-9感染后的小鼠成肌细胞系C2C12细胞注入埋植于皮下一侧的3种载体.将表达绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)重组腺病毒Ad-GFP感染后的C2C12细胞分别注入埋置于其对侧皮下的3种载体作为对照.第4组仅在双侧皮下分别注入Ad-BMP-9或Ad-GFP感染后的C2C12细胞.4周后处死实验裸鼠,行X线检查和组织学分析.结果:X线检测显示:Ⅰ型胶原纤维组90%样本出现新骨形成,HA-TCP组、DMB组和皮下注射组的新骨形成率分别为89%、50%和44%.组织学分析显示:Ⅰ型胶原纤维组和HA-TCP组新骨质量和数量更佳;Ⅰ型胶原纤维组样本中干细胞及新骨分布较其它组更趋均匀;DBM组样本中存活干细胞数量少于其它组.结论:在以BMP-9基因转导细胞为基础的基因治疗中,使用Ⅰ型胶原纤维或HA-TCP载体较脱钙基质骨载体可更有效成骨.同时,Ⅰ型胶原纤维和HA-TCP载体可为基因治疗中使用的细胞提供更好的组织工程环境.     

糖尿病肾病患者血浆血管性血友病因子水平的变化

我们分析了70例2型糖尿病患者和35例健康对照者血浆血管性血友病因子(vWF)水平的变化及其临床意义,总结如下.     

《组织学与胚胎学》数字化网络教学平台建设及教学改革尝试

<正>教育部颁发的《教育部财政部关于实施高等学校本科教学质量与教学改革工程的意见》指出:高等教育肩负着培养高素质专门人才和拔尖创新人才的重要使命。近年来,高等教育规模的快速发展,使原有的教师是主导、学生是客体的课堂教学模式已不能完全适应现代医学教育培养高质量高素质人才的需要,这就要求     

骨形态发生蛋白9的成骨效应研究与进展

背景:组织工程人工骨是解决传统植骨骨量不足,新骨形成缓慢的有效途径,而寻找促进细胞增殖和成骨分化的因子和技术是目前研究组织工程骨的关键领域.目的:全面了解骨形态发生蛋白9 的成骨机制、作用及表达纯化的方法,为更好的实现成骨分化因子在临床促进骨形成,解决骨缺损修复奠定基础.方法:检索PubMed 数据库2000-01/2010-12 及CNKI数据库2006-01/2010-12 收录的骨形态发生蛋白9 相关综述和论文报告,并分析其成骨机制、作用及表达纯化的方法几个方面的研究进展.结果与结论:共纳入骨形态发生蛋白9 的相关文献21 篇.在骨形态发生蛋白9 诱导成骨过程中,经典Wnt 信号通路、Hey1、碱性螺旋-环-螺旋蛋白和过氧化物酶增殖体活化受体2、激活素受体样激酶1 和2、胰岛素生长因子2 及类维生素A 等机制都起着重要的作用.目前,骨形态发生蛋白9 已经在体内外被证实是成骨能力最强的转化生长因子.对骨形态发生蛋白9 的研究主要是通过重组腺病毒作为载体,但目前构建的病毒载体会有许多编码蛋白质的基因,其表达产物免疫原性很强,应用上存在安全隐患.有学者将真核质粒作为载体,转染真核细胞中,得到骨形态发生蛋白4.能否用此方法得到骨形态发生蛋白9,从而解决腺病毒应用的安全性问题,为临床治疗骨缺损等提供生物技术支持,还有待进一步的研究证实.     

健康教育在健康体检中的重要意义

近年来,随着我国健康管理事业的迅速发展,人们对健康的渴望和需求日益增大,如何提高健康体检的服务质量和效果,更好地做好健康体检工作,我们将健康教育贯穿于健康查体始终,全面引入了健康教育的理念,为体检者制定个体化的干预计划和预防措施,取得很好的效果.     

NF-κB抑制剂减低LPS致兔腰椎间盘髓核细胞锌指蛋白A20表达升高

目的观察脂多糖(LPS)刺激退变兔椎间盘髓核细胞前后,锌指蛋白A20(A20)、NF-κB及相关炎性因子的表达及其相互关系。方法获取正常和退变兔腰椎间盘髓核细胞,分为正常组、退变组、LPS刺激组和NF-κB抑制剂组,HE染色观察椎间盘髓核及纤维环的形态,免疫组化检测椎间盘A20、NF-κB p65蛋白及Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)的表达。Real-time PCR分别检测各组A20、IL-1β、TNF-α、NF-κB和COL-ⅡmRNA的表达。Western blot观察A20、p65和COL-Ⅱ的表达。ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β、TNF-α的表达。结果退变组髓核细胞数量明显减少,髓核细胞聚集成团,COL-Ⅱ表达下降,A20和p65蛋白表达升高;与正常组相比,退变组A20、TNF-α、IL-1β和p65表达在mRNA及蛋白水平均明显升高,COL-Ⅱ表达降低(P0.05);LPS刺激组中A20、TNF-α、IL-1β和p65表达较退变组更显著,COL-Ⅱ降低明显(P0.05);NF-κB抑制剂组较LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β和p65表达回降,COL-Ⅱ表达回升(P0.05)。结论髓核细胞炎性反应与兔椎间盘退变的发生和发展密切相关,其中A20可能发挥了重要作用。     

二甲双胍对糖尿病患者BG、Ins、PAI-1及血脂水平变化的影响分析

目的：研究二甲双胍对糖尿病患者血糖（BG）、胰岛素（Ins）、血清纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）及血脂水平变化的影响分析。方法选取2010年1月至2012年12月于本院就诊治疗的糖尿病患者124例,以数字法随机分为对照组（62例）和观察组（62例）。对照组患者行格列齐特缓释片治疗,观察组在对照组基础上加用二甲双胍进行治疗。观察2组患者BG、Ins、PAI-1及血脂水平变化,并对其进行对比分析。结果观察组患者治疗后BG、Ins及PAI-1值分别为（7.6±4.7）、（9.2±2.8）、（60.2±17.9）μg/L,均显著低于对照组的（10.4±3.6）、（12.5±4.7）、（69.6±22.3）μg/L,差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组患者胆固醇、三酰甘油以及低密度脂蛋白胆固醇水平分别为（2.09±0.58）、（4.48±0.51）、（2.14±0.59） mmol/L,均显著低于对照组的（2.41±0.47）、（5.17±0.63）、（3.07±0.62） mmol/L,差异亦均有统计学意义（P<0.05）。观察组患者正常R-R间期标准差（SDNN）、相邻正常的R-R间期差值均方的平方根（RMSSD）与相邻R-R间期差值大于50 ms心搏数所占百分比（PNN50）分别为（48.4±8.5） ms、（23.7±5.4） ms、12.1%±0.6%,均显著高于对照组的（35.6±7.8） ms、（16.6±5.1）ms、8.7%±0.9%,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论二甲双胍对糖尿病患者BG、Ins、PAI-1及血脂水平均能进行有效控制及改善,对患者而言十分有利,且其安全性好,值得临床推荐。     

单侧椎弓根入路减压椎间融合治疗Denis B型胸腰椎爆裂性骨折

目的探讨经单侧椎弓根入路减压、椎体间植骨融合内固定术治疗Denis B型胸腰椎爆裂性骨折的临床疗效。方法回顾性分析2008年4月~2011年1月采用经单侧椎弓根入路减压、椎体间植骨融合内固定术治疗12例Denis B型胸腰椎爆裂性骨折的患者,男8例,女4例;年龄20~55岁,平均35.5岁。通过比较术前、术后即刻及末次随访时的X线、CT片及神经学检查,观察骨折复位、植骨融合、神经功能恢复、矫正丢失、腰椎活动度及相邻节段椎间盘退变等情况来评估临床疗效。结果本组患者手术时间150~200min,平均160 min。出血量200~700 ml,平均450ml。术后随访时间12~36个月,平均21.5个月。所有患者伤椎均获得满意复位,术后随访3~6月时椎间植骨均达到骨性融合,随访中重建的椎体高度无丢失,神经功能获得1~2级恢复,平均提高1.5级。无内固定松动、断裂或者钛笼下沉等并发症,患者未出现顽固性腰痛,腰椎活动度好,邻近节段椎间盘未见明显退变征象。结论选择合适的患者,经单侧椎弓根入路减压、钛笼椎体间支撑植骨内固定术能有效的恢复脊柱生理曲度,能达到椎管充分减压和前中柱的支撑重建,同时保留伤椎相对正常的中下份椎体及下位未受损伤的椎间盘,降低融合术后相邻节段退变的风险。     

重组腺病毒介导外源性SOX9在正常关节软骨细胞中诱导软骨基质合成的体外表达

背景：关节软骨损害是临床一种常见的损伤,软骨形成转录因子SOX9是一种调控Ⅱ型胶原合成的关键因子。 目的：观察以表达外源性SOX9的腺病毒体外成功感染关节软骨细胞后对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖（Aggrecan）合成的影响,探讨软骨损伤后修复软骨缺损的基因治疗方法。 方法：体外构建腺病毒载体AdSOX9和AdGFP,成功感染培养的人关节软骨细胞,分别以逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测了病毒感染前后SOX9、II型胶原和蛋白聚糖基因mRNA的表达,同时以免疫组化技术检测了病毒感染前后关节软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达。 结果：应用AdEasy腺病毒构建专利技术体外成功构建了能高效表达外源性SOX9的腺病毒AdSOX9和只表达绿色荧光蛋白GFP的腺病毒AdGFP;以腺病毒AdSOX9和AdGFP体外成功感染人关节软骨细胞后48h,未感染对照组和AdGFP感染组,均检测到了Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达;而AdSOX9感染组的细胞中,检测到了SOX9基因mRNA的表达明显增高,与未感染对照组和AdGFP感染组相比有显著性差异（P〈0．05）,同时,Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达也较未感染对照组和AdGFP感染组明显增高,差异显著（P〈0．05）。 结论：以外源性SOX9为目的基因的腺病毒介导基因治疗方法,在促进关节软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖合成方面得出了初步满意的结果,SOX9可能是关节软骨缺损基因治疗研究领域一个新的理想靶点,值得继续深入研究。