药物遗传学：药效学方面

个体间差异在药代动力学方面的认识已逾百年，但在药效学方面相应的认识却比较短暂。药物遗传学在药效学方面表现出两种不同的基本机制，一个是作为疾病异质性反应的Ⅰ型药物遗传学，另一个是作为疾病－病因学非相关的个体间差异反应的Ⅱ型药物遗传学，药物遗传学的药效学方面，对于认识临床药物反应，指导药物研发及临床实践将会发挥越来越重要的作用。     

过氧化物酶体增殖物激活型受体α不同激活物对HepG2细胞1型纤溶酶原激活物抑制剂表达的影响

目的:观察不同的过氧化物酶体增殖物激活型受体α对人肝瘤细胞1型纤溶酶原激活物抑制剂mRNA表达及其活性的影响,探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体α在1型纤溶酶原激活物抑制剂基因调控中的作用。方法:实验于2004-04/2005-04在军事医学科学院放射医学研究所药理毒理实验室完成。分别以终浓度为50和100μmol/L的过氧化物酶体增殖物激活型受体α不同特异性激活物非诺贝特和亚油酸作用于人肝瘤细胞,设未加入非诺贝特和亚油酸作用于人肝瘤细胞为空白对照组。采用半定量反转录-聚合酶链式反应法检测人肝瘤细胞1型纤溶酶原激活物抑制剂及过氧化物酶体增殖物激活型受体α的mRNA水平,发色底物法检测1型纤溶酶原激活物抑制剂的活性变化。结果:①与空白对照组相比,非诺贝特组在50和100μmol/L浓度诱导下1型纤溶酶原激活物抑制剂mRNA表达分别减少31.97%,45.49%(P<0.05,0.01);亚油酸组在50和100μmol/L浓度诱导下1型纤溶酶原激活物抑制剂mRNA表达分别增加43.0%,129.0%(P<0.05,0.01)。②与空白对照组相比,非诺贝特组在50和100μmol/L浓度诱导下1型纤溶酶原激活物抑制剂蛋白活性分别降低39.3%,49.6%(P<0.01);亚油酸组在50和100μmol/L浓度诱导下1型纤溶酶原激活物抑制剂蛋白活性分别升高37.5%,112.6%(P<0.01)。与空白对照组相比,人肝瘤细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体αmRNA表达量在非诺贝特组100μmol/L浓度诱导下明显增高79.79%(P<0.05),在亚油酸组50和100μmol/L浓度诱导下则分别显著增高46.73%(P<0.05),79.45%(P<0.01),非诺贝特组50μmol/L浓度诱导下使人肝瘤细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体αmRNA表达量有升高趋势,但差异不明显。结论:过氧化物酶体增殖物激活型受体α激活物可以影响人肝瘤细胞1型纤溶酶原激活物抑制剂的基因转录及过氧化物酶体增殖物激活型受体αmRNA的表达,且均呈一定剂量依赖性,但非诺贝特和亚油酸对1型纤溶酶原激活物抑制剂的作用迥然不同。     

腺嘌呤诱发的大鼠肾性贫血及其与血液系统的关系

为了诱发大鼠慢性肾衰贫血模型并探讨它与血液系统的关系,以含0.4％腺嘌呤的饲料长期饲喂大鼠,并动态检测大鼠外周血象,定期进行肾脏、骨髓检查。成年大鼠普通饮食时血红蛋白(Hb)和红细胞压积(Hct)分别为140.3±10.2g/L和0.42±0.05(n=60),饲喂食0.4％腺嘌呤的饲料约80天,Hb和Hct分别降为104.3±10.2g/L和0.31±0.03,表现为轻、中度贫血,饲喂上述饲料120天则出现重度贫血,Hb和Hct分别为88.1±16.5g/L和0.28±0.06,而外周血白细胞仅有一过性升高,血小板则无明显变化;骨髓形态学及CFU-E培养显示骨髓未受抑制,其间肾脏呈现慢性炎症性病变,肾功能明显降低,血清红细胞生成素(Epo)含量严重不足。结果提示,长期饲喂低含量腺嘌呤饲料,可诱发大鼠慢性肾衰贫血,而该模型与造血系统无直接关系,是研究Epo低下性贫血的理想模型。     

TDI诱发变应性鼻炎豚鼠模型的建立

目的建立甲苯-2,4-二异氰酸酯（TDI）诱发的变应性鼻炎（AR）豚鼠模型。方法模型组和布地奈德治疗组动物,利用10%的TDI经鼻通过反复致敏和激发两个步骤诱发AR模型。致敏和激发均采用TDI双侧鼻孔滴鼻（每侧鼻孔以12.5μl/kg计算）,其中,致敏过程共7 d,每天1次;激发过程共14 d,隔天1次。自致敏开始,记录动物临床评分和喷嚏数。待实验结束后,分离鼻黏膜并制备血清,观察鼻黏膜组织病理学变化,检测鼻黏膜组胺含量及血清中IgE含量。布地奈德治疗组动物,自致敏结束次日开始通过双侧鼻孔滴鼻给药（每侧鼻孔给药为10μl/kg）,每天1次,连续14 d;模型组按相同方式给予等体积生理盐水。正常对照组动物,以橄榄油替代10%TDI,其余处理同模型组。结果与正常对照组比较,模型组豚鼠的临床评分、鼻黏膜组织组胺含量及血清IgE含量均明显升高（P〈0.05）,鼻黏膜组织出现嗜酸性粒细胞浸润、小血管扩张、组织水肿及上皮脱落等典型的炎性病理变化;布地奈德给药则可显著改善以上病变。结论 TDI在豚鼠体内能够诱发典型的变应性鼻炎模型,具有方法简便可靠、成功率高的优点。     

吡格列酮对关节炎大鼠滑膜表达细胞因子的影响

目的 研究过氧化物酶体增殖物活化型受体γ(PPARγ)激动剂吡格列酮对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠滑膜表达细胞因子的影响,并探讨其作用机制.方法 以RT-PCR法检测两组剂量为4、20 mg/(kg*d)的吡格列酮对大鼠出现CIA后14 d滑膜表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)及IL-4的影响.结果 与对照组比较吡格列酮用药组滑膜表达TNF-α和IFNγ明显降低,IL-4表达明显增高,IFN-γ/IL-4比值显著降低,IL-1β无明显差别.结论 吡格列酮对CIA的抗炎作用与抑制TNF-α和IFN-γ,促使Th1/Th2平衡向Th2的优势转化有关.     

中药消白汤与消白酊治疗白癜风临床观察

白癜风是以表皮内黑素细胞损伤和消失为特点的色素减退性皮肤病,患病率约1%.我们自1994年初用中药消白汤内服、消白酊外涂,配合自体表皮移植治疗白癜风,获得较好效果,报道如下.     

卵白蛋白诱发变应性鼻炎豚鼠模型的特点及鉴定

目的： 建立卵白蛋白 (ovalbumin,OVA)诱发的变应性鼻炎 (allergic rhinitis,AR)豚鼠模型,观察其临床症状、病理学和免疫炎症反应有关指标的变化特点。方法：实验豚鼠分为正常组和模型组。模型组动物经腹腔注射0.8 ml的 OVA混悬液进行全身致敏,并经双侧鼻腔按每侧20 μl的OVA生理盐水溶液 (60 mg/ml)滴鼻进行局部致敏,致敏期限为21 d;间隔1周后,以OVA生理盐水溶液 (60 mg/ml)滴鼻激发,每天1次,连续7 d,而后改为两天1次,连续14 d,剂量均为50 μl/kg。正常组动物以生理盐水代替OVA悬液或OVA生理盐水溶液,用法用量与模型组相同。激发阶段,动态观察各组豚鼠喷嚏、抓鼻、眼泪、鼻涕及呼吸困难症状变化;激发期结束,动物取血制备血清用于IgE含量检测,剥取鼻黏膜用于组织病理学观察及组胺含量测定。结果：与正常组比较,模型组豚鼠出现典型的变应性鼻炎症状,喷嚏数增加并伴有严重抓鼻现象,血清IgE及鼻黏膜组胺含量均明显升高 (P＜0.01);鼻黏膜组织出现嗜酸粒细胞浸润、血管扩张及上皮脱落等典型的炎性病理变化。结论：OVA诱发的变应性鼻炎豚鼠模型,可较好模拟人类变应性鼻炎的临床特征,该模型是研究变应性鼻炎机制及治疗药物的良好模型。     

吡格列酮抑制胶原诱导的关节炎大鼠滑膜S100A8/A9mRNA的表达

目的研究过氧化物酶体增殖物活化型受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)激动剂吡格列酮对大鼠胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)滑膜表达S100A8 mRNA和S100A9 mRNA的影响,探讨其作用及可能机制。方法 Wistar雄性大鼠随机选择3只作为正常对照组;以Ⅱ型胶原免疫诱导大鼠,按发生关节炎时间先后顺序再随机入组,分为模型对照组、吡格列酮用药大剂量组[20mg/(kg.d)]和吡格列酮用药小剂量组[4 mg/(kg.d)],每组3只。以逆转录-聚合酶链反应法检测吡格列酮两种剂量对大鼠出现CIA 14 d后滑膜表达S100A8 mRNA和S100A9 mRNA的影响。结果 PPARγ、S100A8、S100A9 mRNA在关节炎后14 d大鼠滑膜表达均明显增高;吡格列酮用药组滑膜表达S100A8 mRNA和S100A9 mRNA明显低于对照组,小剂量用药组S100A8 mRNA和S100A9 mRNA分别减低62.7%和34.2%,大剂量用药组S100A8 mRNA和S100A9 mRNA分别减低82.1%和71.9%。结论吡格列酮可能通过抑制CIA的S100A8 mRNA和S100A9 mRNA表达产生抗炎作用。     

靶向组蛋白去乙酰化酶新型化合物的体外抗肿瘤活性筛选

目的针对组蛋白去乙酰化酶（HDAC）,自行设计合成系列化合物,着重对其体外抗肿瘤活性进行筛选,为进一步优化设计提供借鉴。方法首先利用MTT法测定各化合物对不同肿瘤细胞株增殖能力的影响,再对重点化合物进行组蛋白去乙酰化酶抑制活性测定。结果MTT结果显示,化合物H6和H99均显示出较好的肿瘤细胞增殖抑制效应;相应的HDAC活性检测表明,二者亦具有肯定的HDAC抑制效应。结论化合物H6和H99具有明显的体外抗瘤活性,值得深入研究。     

骨骼肌源性抑瘤物的体外初步研究

目的 观察骨骼肌细胞条件培养液（MCM）体外对肿瘤细胞增殖的影响,并初步分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。方法 用噻唑蓝分析法（MTT法）分析新生大鼠MCM对不同肿瘤细胞系的体外抑瘤作用。用超滤分离、热灭活处理、胰酶消化、凋亡分析及形态学观察分析骨骼肌源性抑瘤物的理化特性及抑瘤机理。结果 MCM与哺乳动物源性肿瘤细胞（小鼠骨髓瘤SP2／0及Wistar大鼠癌内瘤Salker256)、人源性白血病细胞（人慢性粒细胞白血病K562及人急性淋巴细胞白血病HL60）、实体瘤细胞（人结肠腺癌细胞LS－174－T及人前列腺癌细胞PC3－M）,以及不同转移潜能肺癌细胞（人肺癌低转移株PLA801－C及人肺癌高转移株PLA801－D）共同培养后,肿瘤细胞的增殖显著下降（P＜0．01－0．05）,且肿瘤细胞增殖呈不同程度MCM浓度依赖性。MCM与正常细胞（兔关节骺板细胞RGP－2）共同培养后,细胞增殖无下降。同一来源肺癌细胞,在MCM稀释至原液的6．25％时,仍见高转移株增殖显著受抑（P＜0．01－0．05）,而在MCM稀释至原液的25％时,低转移株增殖即无显著受抑。MCM的抑瘤活性存在于分子量10000以下超滤组分,热灭活后活性消失,胰蛋白酶消化后活性人存在。MCM不引起K562细胞凋亡,而导致肿瘤细胞膜变粗糙,出现空泡,甚至胞膜消失。结论 新生大鼠骨骼肌细胞可产生特异性抑制人及哺乳动物肿瘤细胞增殖的抑瘤物,其分子量≤10000,对热不稳定而对胰蛋白酶稳定,其抑瘤活性系通过直接损伤瘤细胞膜而非导致瘤细胞凋亡实现的。这种骨骼肌源性抑瘤物可能是临床上骨骼肌转移瘤罕见性现象的关键因素。