人脑胶质瘤中肿瘤干细胞的体外培养及生物学特性

背景：有研究者提出，脑内存在少量正常的神经干细胞能够向肿瘤组织迁移。这需要对从胶质瘤体外培养得到的肿瘤干细胞与正常的神经干细胞进行鉴别。 目的：从人脑胶质瘤组织中分离脑胶质瘤干细胞进行体外培养，并对其干细胞特性加以鉴定，观察脑肿瘤干细胞的生长特性。 设计、时间及地点：细胞学观察实验，于2007-02/12在解放军第四军医大学细胞工程研究中心完成。 材料：7份肿瘤标本来源于胶质瘤患者，间变性星形细胞瘤标本3份，多形性胶质母细胞瘤标本4份。 方法：将获取的胶质瘤细胞置于含2%B27、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、左旋谷胺酰氨、胰岛素、青霉素和链霉素生长因子的无血清DMEM/F12培养基中，重新悬浮为单细胞悬液，以1×108 L-1接种于含有B27、表皮细胞生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12培养基中培养分离培养肿瘤干细胞球。取第5代的肿瘤干细胞球，离心后除去原培养基，用含有体积分数为0.10胎牛血清的DMEM/F12培养基接种于放置有多聚赖氨酸包被盖玻片的小平皿中，观察肿瘤干细胞分化情况。 主要观察指标：利用细胞免疫荧光及组织免疫组织化学法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养或组织切片中CD133及巢蛋白表达。 结果：在胶质瘤中存在一定量的细胞能在无血清培养基中存活并悬浮生长，并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球，细胞核较大，核质比例高，具有肿瘤细胞的特性，与原肿瘤组织标本的苏木精-伊红染色比较，肿瘤干细胞分化后的子代细胞中大部分与胶质瘤细胞相似。原代及传代脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白和CD133。 结论：人脑胶质瘤中存在一定量的肿瘤干细胞，并能在体外将其分离培养，能够自我更新增殖、诱导分化，表达神经干细胞标志物CD133。     

什么是爱

我看到一束校园花絮：一天,端坐在教室里的学生问老师：“老师,什么是爱？”老师觉得这孩子提出的问题十分有意思,就利用课间休息的时候,给每位同学布置一项有趣的活动,到校园里寻找一样自己喜爱的东西。孩子们都迅速地跑到室外。当他们回到教室后,     

注射用左亚叶酸钙联合治疗晚期胃癌和结直肠癌的Ⅱ期临床研究

目的：以注射用亚叶酸钙为对照,评价注射用左亚叶酸钙联合治疗晚期胃癌和结直肠癌的安全性和有效性。方法：采用多中心、随机、平行对照试验设计。入组患者按胃癌与结直肠癌分别随机分为试验组和对照组,左亚叶酸钙（Ｌ-ＬＶ）联合氟尿嘧啶（５-ＦＵ）、奥沙利铂（Ｌ-ＯＨＰ）或顺铂（ＤＤＰ）以及亚叶酸钙（ＬＶ）联合５-ＦＵ、Ｌ-ＯＨＰ（ＤＤＰ）治疗晚期胃、结直肠癌,比较其临床有效性和毒性。结果：胃癌试验组和对照组有效率分别为２５.００％和２３.０８％,临床获益率分别为６５.６３％、６６.１５％;结直肠癌试验组和对照组有效率分别为２１.９５％和１９.５１％,临床获益率分别为７８.０５％和70.７3％。两组之间疗效比较差异皆无统计学意义（Ｐ＞０.０５）。结论：注射用左亚叶酸钙联合５-ＦＵ治疗晚期胃癌和结直肠癌,其使用剂量为注射用亚叶酸钙一半时达到的疗效与注射用亚叶酸钙联合化疗方案相当,发生的毒副反应多与联合化疗药物有关,其发生率与注射用亚叶酸钙联合化疗方案相似。     

薏苡仁治疗类风湿关节炎

薏苡仁味甘、淡，性微寒，入脾、胃、肺经，有利水渗湿、健脾、除痹、清热排脓功效。笔者在临床实践中，常常重用生薏苡仁配伍其他药物治疗类风湿关节炎，疗效满意，举例如下。     

蝗虫致过敏性休克1例

患者，男，25岁，因进食一只蝗虫皮肤潮红，瘙痒速来就诊。查体：体温36．5℃，脉搏820：／分，呼吸18次／分，血压110／70mmHg。神志清楚，面部及周身皮肤潮红，瘙痒，心肺腹（-）。无药物、食物过敏史。给予苯海拉明20mg肌注并留观。约15分钟后患者意识朦胧，心悸出汗，肢冷，脉速而弱，心肺（-），测不到血压，诊断为过敏性休克，急给予吸氧，0．1％肾上腺素1mg肌注，0．9％生理盐水100ml，多巴胺20mg静脉滴注，氟美松20mg入壶。     

肿瘤患者心理因素与其免疫系统双向调节的机制探讨

随着医学模式由"生物-医学模式(bio-medical model)"向"生物-社会-心理(bio-psycho-sodal medical model)"模式转变,心理因素在疾病发生发展中的作用越来越受到重视.近年来,社会环境、生活事件、生活方式、个性特征、社会支持和应对方式等对肿瘤患者多方面的影响备受关注.研究发现,社会心理因素和心理干预对肿瘤患者的影响主要是通过神经一内分泌系统与免疫系统的双向作用来实现的[1-2].长期慢性负性心理刺激可以降低机体的免疫功能,特别是细胞免疫功能,从而使肿瘤发生率增加;免疫系统的改变又可以反过来作用于神经内分泌系统,形成恶性循环,本文就这种双向作用作一综述.     

化疗联合腹腔循环热灌注治疗恶性腹水疗效和安全性的Meta分析

目的 系统评价化疗联合腹腔循环热灌注治疗恶性腹水的疗效及安全性。方法 计算机检索Cochrane Library、MEDLINE、PubMed、Embase、中国生物医学期刊文献数据库(CBM)、维普期刊全文数据库、知网医学期刊数据库、万方数据库,同时辅以其他检索。按照纳入标准选择文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后,采用RevMan 5.0.2软件进行Meta分析。结果 共纳入14个RCT,867例患者。Meta分析结果显示:化疗联合腹腔循环热灌注组(HIPEC)与化疗联合传统腹水治疗(CT)组相比,其完全缓解率、部分缓解率、总有效率(CR+PR)的差异均有统计学意义(完全缓解率:OR=3.18,95%CI:2.18~4.64,P＜0.00001;部分缓解率:OR=2.05,95%CI:1.51~2.77,P＜0.00001;总有效率:OR=4.88,95%CI:3.59~6.46,P＜0.00001);而HIPEC较CT组不良反应发生率的差异均无统计学意义。结论 化疗联合腹腔循环热灌注治疗能明显提高恶性腹水患者近期疗效,改善生活质量,毒副作用小,受限于纳入研究数量和质量,上述结论有待更多高质量大样本长期随访的研究予以验证。     

神经外科重症监护患者多重耐药菌感染分析

目的：探讨神经外科科重症监护患者多重耐药菌感染病原菌的分布,指导临床合理使用抗菌药物。方法回顾性分析2012年1月—2013年12月817例神经内科重症监护患者进行病原菌分离培养,并对分离出病原菌按K-B琼脂法进行药敏试验,结果按照美国临床实验室标准化委员会2005版判定。结果神经内科重症监护患者分离出病原菌615株,其中多重耐药菌株359株,占58.3%;主要以ESBLs革兰氏阴性杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、铜绿假单胞菌为主,分别为35.9%、28.7%、18.1%;感染部位主要以呼吸道（37.6）、泌尿道（21.2%）导管（15.3%）为主。结论临床应提高微生物标本送检率,根据本院病原菌流行趋势和耐药特性,科学合理使用抗菌药物。     

阿霉素诱导HK-2细胞损伤机制的研究

目的探讨阿霉素诱导人肾近端小管上皮细胞(HK-2 cells)损伤作用机制。方法用刃天青试验法检测阿霉素0~100μmol/L暴露HK-2细胞24 h对细胞存活率的影响,并计算半数致死浓度(LC50);检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量以及细胞内Caspase-3/7蛋白活性的变化;用荧光显微镜观察细胞内磷脂质蓄积情况。结果阿霉素暴露HK-2细胞24 h,可明显抑制HK-2细胞存活,且具有浓度依赖性(LC50=2.01±0.16μmol/L);阿霉素可以引起HK-2细胞培养上清中LDH含量显著升高(P0.01),细胞内Caspase-3/7蛋白活性显著升高(P0.01),且细胞存活率与胞外LDH含量及胞内Caspase-3/7蛋白活性均呈现明显的负相关性(r2=0.986和r2=0.991),LDH含量与Caspase-3/7蛋白活性呈现明显正相关性(r2=0.999);荧光标记染色法观察到明显的细胞内磷脂质蓄积。结论阿霉素可诱导磷脂质在HK-2细胞内大量蓄积,导致细胞膜受损和细胞功能障碍,以及引发细胞凋亡,产生细胞毒性。     

液相色谱二步法纯化人中性粒细胞防御素

目的：建立人中性粒细胞（ＰＭＮ）防御素（ＨＮＰ）的制备级纯化方法，以便更深入研究防御素的生物学活性。方法：采用Ｓｕｐｅｒｄｅｘ３０凝胶色谱法对ＰＭＮ提取物进行分离，再用Ｃ１８反相液相色谱法进一步纯化，得到ＨＮＰ纯品并对其进行鉴定。结果：纯化的ＨＮＰ Ｍｒ为３４００，纯度为９１．６％，具有抗微生物活性。结论：应用两步色谱法纯化ＨＮＰ，是从人的ＰＭＮ中纯化ＨＮＰ的较为理想的方法。