骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死:有望产生结构与功能的双重修复作用

学术背景：成年人脑海马齿状回和嗅球等部位发现神经干细胞后，彻底改变了传统发生生物学所认为的成熟神经元一旦受损就不能再生这一观念，但神经干细胞存在取材不便、受伦理学限制及免疫排斥等缺陷。通过骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死，有望从组织结构功能上对坏死神经元进行修复。 目的：归纳总结近年来骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死方面的实验研究进展。检索策略：由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1998—01／2006—12的相关文献，检索词“mesenchymal stem cells，cerebralinfarction，cerebral ischemia，transplant”，并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1998—01／2006—12的相关文献，检索词“骨髓间充质干细胞，脑梗死，脑缺血，移植”，并限定文章语言种类为中文。共检索到88篇文献，对资料进行初审，纳入标准：文章所述内容应与骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死、脑缺血的研究相关。排除标准：重复性研究。 文献评价：文献的来源主要是通过对骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死方面内容进行汇总分析。所选用的30篇文献中，1篇为综述，其余均为临床或基础实验研究。 资料综合：①骨髓间充质干细胞具有高度自我更新和多向分化潜能，在体内外可以分化为多种细胞，近年来作为组织工程的种子细胞用于脑梗死的治疗。②骨髓间充质干细胞来源方便，体外培养扩增快速，可通过静脉、动脉、立体定位注射和腹腔注射等途径移植人脑梗死模型动物体内，并且能够迁移至受损脑组织。③骨髓间充质干细胞可能通过分泌神经营养因子，减少神经细胞凋亡，替代受损神经元，促进血管、轴突、髓鞘等再生，激活内源性神经干细胞的增殖分化等机制修复受损脑组织。④骨髓间充质干细胞可作为基因载体，通过导人外源性基因，与基因治疗相结合治疗脑梗死效果更好。 结论：骨髓间充质干细胞作为种子细胞在治疗模型动物脑梗死方面已经取得一定效果，其详细机制仍有待进一步深入研究，而且在应用于临床前仍有许多理论和技术问题需要解决。     

骨髓干细胞定向分化为肝样细胞的研究进展

近年来研究表明,在适宜的微环境下,骨髓干细胞不但可以分化为骨、软骨、脂肪、肌细胞和各种血细胞,而且还可以跨越胚层向外胚层起源的神经元细胞及内胚层起源的肝细胞、胰岛细胞等分化,称为"可塑性(plasticity)"或"横向分化(transdifferentiation)".本文就骨髓干细胞分化为肝样细胞及其临床治疗肝系疾病做一综述.     

标本离心时间对凝血四项检测结果的影响

目的探讨不同离心时间对凝血四项检测结果的影响。方法用枸橼酸钠抗凝管采集40例健康者及70例住院患者外周血标本,3 000r/min分别离心5、10、15min,分离血浆标本进行凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)和凝血酶时间(TT)检测。结果 PT、APTT、Fg和TT检测结果在5、10、15min 3个离心时间组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论上述离心时间对凝血四项检测结果无影响,与《全国临床检验操作规程》的要求有所不同,需建立新的离心时间标准。     

基于细胞穿透肽技术对p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白功能的研究

目的 构建基于TAT技术的p38 MAPK蛋白转运系统并对导入细胞的融合蛋白的功能进行鉴定。方法 采用亚克隆方法构建重组质粒pHis-TAT-p38和pHis-TAT-p38（AF）无活性突变体,并诱导原核表达纯化融合蛋白;将这两种蛋白加入培养的ECV304细胞,在高渗刺激下,通过检测p38底物ATF2的磷酸化水平,以观察由TAT转导进入细胞His-TAT-p38及其无活性突变体对内源性p38活性的影响。结果 酶切和测序结果表明,载体构建正确;SDS-PAGE凝胶电泳可见原核表达纯化得到高纯度目的蛋白：Western blot表明,融合蛋白His-TAT-p38及其突变体能够以一种时间和浓度依赖性方式高效转导进入细胞：导入His-TAT-p38蛋白后,结果发现导入的野生型p38可增强内源性p38的功能,而无活性突变体则竞争性抑制了内源性p38MAPK蛋白的功能,从而阻止或抑制其对内源性底物ATF2的磷酸化．使得信号不能传递下去,进而抑制p38MAPK通路的活动。结论 成功建立了基于TAT的蛋白转运系统．并证实TAT能够以浓度和时间依赖方式高效转运蛋白进入真核细胞;进入细胞的His-TAT-p38和His-TAT-p38无活性突变体蛋白均具有较高的生物学活性,在高渗刺激作用下前者可以增加p38磷酸化水平,而后者则显著抑制p38信号通路的活性。     

Advances in the study of the effects of enteric α-defensins on the pathogenesis of inflammatory bowel diseases

防御素作为小肠腺泡底部潘氏细胞分泌的主要抗菌肽,具有广谱的杀菌、抗炎、抗病毒功能,对肠道的黏膜屏障功能和免疫功能都有非常重要的维持和调节作用.近年发现防御素和炎症性肠病(IBD)的发病联系紧密.现将近年来肠源性防御素在IBD发病机制中作用的研究进展进行综述,以期为今后IBD的治疗提供一定的理论依据.     

人IP10启动子红色荧光蛋白报告基因载体的构建及在细胞中的表达

目的：构建IPl0启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体，为研究细胞内IPl0的基因表达调控和相关的信号转导机制提供重要工具。方法：采用基因重组技术构建含IPl0启动子区的红色荧光蛋白报告基因载体pDsRedl-1-IPl0；用脂质体瞬时转染HEK293细胞，观察IPl0启动子对脂多糖（LPS）刺激的反应。结果：酶切和DNA测序证明所构建的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的；该表达载体在HEK293细胞静息状态下表达水平很低，经LPS刺激后，在荧光显微镜下可看到高亮度的红色荧光。结论：所构建的IPl0启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的，对生理相关刺激有很好的反应，可有效地用于IPl0基因表达信号调控机制的研究。     

血浆置换治疗重症蝮蛇咬伤疗效观察

目的探讨血浆置换治疗重症蝮蛇咬伤的临床疗效。方法 18例重症蝮蛇咬伤患者在给予蛇咬伤局部切开排毒、封闭、抗毒血清和支持保护治疗的基础上进行血浆置换,观察治疗效果。结果本组18例患者中,14例(77.8%)痊愈出院,1例放弃治疗出院,3例死于多器官功能衰竭(16.7%)。本组病例共进行血浆置换46例次,其中发生过敏反应8例次(17.4%),低血压6例次(13.1%),出血6例次(13.1%),感染2例次(4.3%),血浆分离器破膜1例次(2.2%)。结论血浆置换是治疗重症蝮蛇咬伤的有效方法。     

热打击后小鼠肺和脑组织病理学的改变

目的 制备小鼠热打击模型,研究热打击和复温治疗过程中动物肺和脑组织的病理形态学改变.方法 BALB/c小鼠随机(随机数字法)分为对照组和热打击组,对照组动物始终置于(25±0.5)℃,湿度35±5%环境下,热打击组置于仿真高温气候舱内,舱内温度(35.5±0.5)℃,相对湿度(60±5)%,记录小鼠直肠温度(Tc),并按Tc分为39℃、40℃、41℃、42℃组,分别于Tc达到41℃后移置(25±0.5)℃,相对湿度(35±5)%环境下复温12 h组和24 h组和达到42℃后移置常温复温6 h组(n=6).分离动物肺和脑组织行HE染色,显微镜下观察并照相.结果 动物对热打击的Tc变化均一,低程度的热打击即可使肺部发生明显病理改变,进一步的热打击表现为进行性加重的间质血管显著扩张充血,大量肺泡腔出血,部分肺泡上皮细胞脱落,肺泡结构模糊不清,而复温则可以使病变明显减轻.脑组织在低程度的热打击时仅表现为轻度的脑水肿,随着打击程度的加重,除了脑水肿加重外,还渐进性出现神经元细胞变性坏死.在体温达到41℃后复温则病变有所减轻,而体温达到42℃后再复温病变进一步加重.结论 肺和脑对热打击和复温的病理改变表现出各自特征性改变,并且同复温的时机和时间有着一定的关系,此为理解中暑发生发展至多脏器功能障碍综合征(MODS)的发病机制提供了实验基础.

Abstract：

Objective To prepare mouse model with heat stress and determine its pathological changes of the lung and brain during heat stress. Methods BALB/c mouse were randomly (random number) divided into two groups, control group and heat stress group. The animals in the control group were sham- heated at a temperature of ( 25 ± 0.5) ℃ and humidity of (35 ± 5 ) %. The animals of heat stress group were placed in a prewarmed incubator maintained at (35.5 ± 0.5) ℃ and relative humidity of (60 ± 5) %. Rectal temperature (Tc) was monitored, and when Tc respectively reached 39 ℃, 40 ℃ , 41 ℃ and 42 ℃, those study animals were killed. The other animals were removed from the incubator and allowed to cool at an ambient temperature of (25 ±0. 5)℃ and humidity of (35 ±5)% , respectirvely for 12 and 24 hrs when Tc reached 41 ℃ , and for 6 hrs when Tc reached 42 ℃. The lung and brain of all the animals were isolated. Hematoxylin and eosin stain and light microscope were used to detect their pathological changes. Results All the animals displayed uniform response to the heat stress. Low degree of heat stress could induced obviously pathological changes of the lung, progressively greater damage to lung with further congestion of lung matrix, asystematic hemorrhage of alveolar space, abscission of alveolar epithelial cell and disappear of pulmonary alveolus tissue structure were detected with the rise of Tc to 42 ℃. However, absorption of congestion and hemorrhage and recovery of pulmonary alveolus tissue structure could also be seen with cooling at ambient temperature. With low degree of heat stress, the brain only showed moderate edema. Neuronal denaturation and necrosis were detected when Tc reached to 42 ℃. Interestingly, the lesions of brain further aggravated even through cooling treatment after Tc reached to 42 ℃ , but recovery could been observed after cooling treatment followed with Tc of 41 ℃. Conclusions The pathological changes of the lung and brain showed distinctive lesions to heat stress and cooling treatment, and these changes were correlated with the timing and time of cooling treatment, which provide the experimental basis to further study the mechanisms between the heatstroke and multiple organ dysfunction syndrome (MODS).