电镜的应用和病理解剖学的发展

病理解剖学的发展是同观察工具的进步分不开的。早在17世纪,西欧开始进行了大量尸体检查,用肉眼看到了疾病在人体内部所造成的各种变化,病理解剖学才有了第一阶段的发展。光学显微镜(以下简称光镜)的发明,在细胞水平上阐明了多数疾病的发生展规律,使病理解剖学从十九至二十世纪初,经历了迅速发展的第二阶段,对医学发展的贡献很大。但光镜只能分辨放大一、二千倍的影象。电镜的研制,使人们有了放大几万倍、几十万倍以至150万倍的工具(我国已制成80万倍的电镜),揭开了细胞内部超微结构的世界(又称亚细胞结构)直到大分子水平,使病理解剖学获得了迅速发展。     

肝癌单克隆抗体HAb_(18)在人体肝癌导向诊断、治疗中的应用

肝癌的导向治疗,自80年代以来发展较快,已成为肝癌综合治疗的手段之一.铁蛋白抗体和甲胎蛋白抗体的标记与治疗显示一定的效果,但作为一种剂型尚有差距.本文报道抗肝癌单抗HAbl8进入I期临床导向诊断、治疗的意义和应用情况。 抗体的纯化与标记,按Goding法,用杂交瘤腹水经Sephacryls-300层析柱纯化为IgG.再用胃蛋白酶(Sigma)切割,分     

肝癌相关抗原与其单克隆抗体研究近况

肿瘤是细胞分裂和分化异常的结果,已经证实,细胞突变发生肿瘤时出现新的抗原。肿瘤细胞既有与正常细胞相同的抗原,也有能引起宿主免疫反应的特异性移植抗原。但屹今为止,要证实人体肿瘤特异性抗原是困难的,只有一些与肿瘤相关的抗原(TAA,Tumor Associated Antigen),主要有与病毒有关的抗原,血型抗原,胚胎性抗原和分化抗原。这些抗原的表达与起源细胞差别甚微,仅仅是某个构型的改变或某种组份在数量上的增减。因此,一般方法难以深入研究。近年,杂交瘤技术的发展推进了     

伴发Stevens-Johnson综合征样损害的全身性Wegener肉芽肿病一例报告

患者,女,32岁,于1981年12月15日受凉后咳嗽、咳少量白色粘痰.18日发热达40℃,伴多汗,右胸痛.30日胸片右肺中部阴影.1982年1月13日体温正常,但痰量增多.胸片右肺病变明显扩大、有透光区和液平面,左肺见两处新病变而入院.     

乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中HBx、MHBs^t mRNA的表达及其意义

目的: 检测乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中乙型肝炎病毒X基因(HBx)及截短型乙型肝炎病毒表面抗原(MHBst)mRNA的表达, 探讨HBx、 MHBst在HBVGN发生中的意义.方法: 采用原位杂交的方法对40例HBVGN患者的肾组织进行HBx、 MHBst mRNA检测.结果: HBVGN患者肾组织中存在HBx、 MHBst mRNA, HBx、 MHBst mRNA主要分布于肾小管上皮细胞的胞质内, 少数肾小球上皮、内皮、系膜细胞的胞质内也有分布; 肾小管上皮细胞内HBx、 MHBst mRNA阳性率分别为82.5%(33/40)、 80%(32/40), 肾小球内HBx、 MHBst mRNA阳性率分别为30%(12/40)、 22.5%(9/40), HBx、 MHBst mRNA在肾小管上皮细胞的表达明显高于肾小球(P＜0.01).结论: 在HBVGN肾组织, 特别是在肾小管上皮细胞的胞质存在HBx、 MHBst mRNA的表达, 提示HBV感染及其基因整合可能在HBVGN发生中有一定意义.     

牛蛙核糖核酸酶基因原核表达载体的构建及表达

目的 :克隆牛蛙核糖核酸酶 (RC RNase)基因 ,构建重组原核表达载体 ,利用大肠杆菌系统表达RC RNase蛋白。　方法 :采用RT PCR的方法从牛蛙肝脏中克隆RC RNase基因 ,并进行序列测定 ;将RC RNase基因插入到 6×His表达载体 pRSET A中 ,构建成表达质粒pRSET RC RNase ,用异丙基巯基半乳糖 (IPTG)在大肠杆菌BL2 1(DE3)中诱导表达 ,并以免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定。　结果 :扩增出一条约 380bp的基因片段 ,双酶切鉴定和序列测定的数据与预期结果一致。经IPTG诱导 ,融合蛋白 (His) 6 RC RNase在大肠杆菌中得到成功表达 ,SDS PAGE上出现相对分子质量约为 16 0 0 0的一条新生蛋白带 ,经蛋白印迹验证为表达蛋白。薄层扫描显示 ,表达产物占菌体总蛋白的 12 .5 % ,主要以包涵体形式存在。　结论 :正确克隆出RC RNase基因 ,并在大肠杆菌中得到成功诱导表达 ,为进一步研究其生物学特性和功能奠定了基础。     

抗体工程与病理学

抗体是一种免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）。抗体工程指的是抗体的人工改造、构建与重组。如同桥梁工程、水力工程是人力对桥梁及水力的构建与改造一样。抗体工程可以分为两种，一种是抗体化学工程，如抗体的标记，抗体与亲合物质结合以及EnVision法等。一般所谓抗体工程是指抗体的基因工程，是通过基因操作、扩增、酶切、连接、构建以及重组来实现的。乍看起来，抗体工程与病理学，特别是诊断病理学，并不那么亲切。但是，实地考查起来，它们之间也不那么遥远，而且随科学的发展，正让它们越走越近。     

F1k1胞外1—3区基因的克隆及核酸疫苗的构建

目的：克隆并构建小鼠F1k1胞外1—3区核酸疫苗，并检验疫苗引起特异性免疫反应的能力。方法：RT—PCR克隆F1k1胞外1—3区，构建核酸疫苗pcDNA3．1( )-F1k1Domainl-3，脂质体转染COS7细胞，western—bolt检测表达；疫苗免疫小鼠；以小鼠血管内皮细胞为靶细胞，以免疫的小鼠脾细胞作为效应细胞，采用标准4h^51Cr释放法计算CTL特异性杀伤率。结果：扩增出1252bp片段。疫苗DNA自动测序证明所获基因片段序列阅读框架正确。Western—blot检测转染疫苗的COS7细胞显示细胞中有分子质量为44kDa的蛋白表达；疫苗组与对照组比较，CTL杀伤率差异有显著性。结论：pcDNA3．1( )F1k1—Domainl-3核酸疫苗可有效的引起针对F1k1的免疫反应。     

人肝癌培养细胞粗提膜相关抗原的单克隆抗体

用人肝癌培养细胞粗提膜免疫Balb/c小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤(SP_2/o)细胞在PEG作用下融合。以LLISA筛选抗体。通过免疫荧光和免疫酶标进行组织定位。初步获得一株抗人肝癌细胞膜相关抗原的单克隆抗体杂交瘤—命名FP—5。用此抗体在涂片上对人肝癌细胞膜呈阳性反应,在3例手术切除的人肝癌活检冰冻切片中,肝癌组织细胞亦呈阳性反应。FP—5细胞株染色体为83—108条,含1—2条中着丝点标记染色体。经6次克隆化体外培养6个多月,仍持续分泌特异性抗体,此抗体鉴定属鼠的IgM型。