腺病毒介导的CDglyTK基因影响胃癌细胞形态学及生长特性的效应

目的:观察已转染双自杀基因的胃癌细胞和未转染双自杀基因的胃癌细胞在形态学及生长特性方面的差异性。方法:实验于2005-03/2006-03在南方医科大学肿瘤研究所完成。质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK为南方医科大学珠江医院普外科保存。用感染复数为100时,将启动子融合基因腺病毒(Ad-KDR-CDglyTK)体外感染SCG7901细胞株。通过倒置荧光相差显微镜、光镜、透射电镜等技术观察转染基因的胃癌细胞的形态学变化。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,同时用四甲基偶氮唑盐方法进行生长曲线的测定。结果:①腺病毒介导的KDR启动子驱动的双自杀基因对胃癌细胞体外培养的形态无明显影响。②已转基因的SCG7901细胞和未转基因的SCG7901细胞处于G1期,比率分别为(49.00±0.58)%,(51.02±0.91)%(t=1.862,P=1.12),处于S期比率分别为(16.20±0.36)%,(14.00±0.99)%(t=2.07,P=0.84),处于G2期比率分别为(34.60±0.96)%,(34.31±0.86)%(t=0.223,P=0.831)。③已转基因SCG7901细胞和未转基因SCG7901细胞具有类似的生长状态(F=0.042,P=0.838>0.05)。结论:已转染KDR启动子融合基因的胃癌细胞和未转染的胃癌细胞在形态及生长特性方面无显著性差异。     

三点法经脐单孔腹腔镜胆囊切除术的临床应用

目的探讨根据胆囊三角解剖特点设计的经脐单孔腹腔镜胆囊切除术( SILC)的可行性和临床疗效。方法回顾性分析2012年3月—2013年3月南方医科大学珠江医院肝胆二科采用“三点法”经脐SILC治疗的204例胆囊良性病变患者的临床资料,其中男85例、女119例,年龄23~68岁、平均47岁;胆囊结石176例,胆囊息肉21例,胆囊结石和息肉并存者3例,胆囊腺肌病4例。结果204例中,198例获得成功,术中胆囊三角均暴露良好,手术成功率为97.1%(198/204);4例在剑突下增加1个操作孔,2例中转开腹。198例手术成功患者均随访1个月,均恢复良好,无腹痛、发热、胆漏、出血及切口感染等并发症。术后2周复查,手术切口处未见明显手术瘢痕。结论根据胆囊三角解剖特点设计的经脐SILC能够在术中良好地暴露胆囊三角,该方法操作简单、安全、可行性好,性价比高,是一种值得临床推广的单孔腹腔镜胆囊切除方法。     

"蓝碟"手助腹腔镜结直肠癌切除术18例报告

目的探讨手助腹腔镜(HALS)结直肠癌切除术的可行性和临床疗效。方法对18例结直肠癌患者采用HALS行结直肠癌切除术,其中右半结肠癌6例、左半结肠癌9例、直肠癌3例。结果所有患者以HALS方式获得手术成功,无中转开腹。平均手术时间178min,平均出血量60ml。术后疼痛轻,仅1例需使用镇痛药物。肠功能恢复早,肠道恢复通气平均41h。术后住院时间平均10.3d。发生并发症2例。随访6~18个月,无操作孔种植,1例局部复发。结论HALS结直肠癌切除术是治疗结直肠恶性肿瘤切实可行的手术方法,其短期疗效与开腹手术相当。     

双自杀基因重组腺病毒对胃癌细胞及血管内皮细胞的体外特异性杀伤作用

目的研究腺病毒介导的KDR启动子驱动CD／TK融合基因（AdKDR—CDglyTK）对胃癌细胞及血管内皮细胞的选择性杀伤作用。方法选择表达KDR的MGC803细胞、ECV304细胞和不表达KDR的LS174T细胞，用腺病毒重组体AdEasy-KDR—CDglyTK和AdEasy—CMV—CDglyTK感染之，观察其感染效率并以RT—PCR方法检测转基因细胞CDglyTK的表达．然后给予不同浓度的前药5一FC及GCV处理，观察该体系对不同细胞株的杀伤效应。结果两种重组体对各细胞株的感染率相似，其感染率随腺病毒滴度的增高而递增。RT—PCR检测发现：除感染AdKDR—CDglyTK的LS174T细胞外．感染AdCMV—CDglyTK的所有细胞及感染AdKDR—CDglyTK的MGC803细胞、ECV304细胞均有目的基因CDglyTK的表达。以感染复数为100的两种腺病毒分别感染各细胞株，其表现出对前药不同的敏感性：感染AdCMV—CDglyTK的所有细胞株和感染AdKDR—CDglyTK的MGC803细胞、ECV304细胞对前药具有较高的敏感性．且其敏感性差异无显著性意义（P〉0．1）；相比之下，感染AdKDR—CDglyTK的LS174T细胞对前药不敏感（P〈0．001）。双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因的疗效（P〈0．001）。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养，观察到该体系明显的旁观者效应。结论KDR基因启动子可调控双自杀基因系统选择性杀伤表达KDR胃癌细胞及血管内皮细胞。     

减体手术或手术切除联合氩超冷刀治疗晚期巨块多灶型肝脏恶性肿瘤

目的 探讨晚期巨块多灶型“无法治疗”的肝脏恶性肿瘤治疗的新途径。方法 采用手术切除或减体手术切除巨块多灶型肝脏肿瘤,术中配合氩超冷刀多探针低温手术系统对残余瘤体和肝脏其他病灶进行治疗。结果 实施减体手术联合氩超冷刀1例,巨块肿瘤切除联合氩超冷刀1例,单纯氩超冷刀治疗3例,巨块肿瘤切除联合氩超冷刀1例,单纯氩超冷刀治疗3例,其中1例氩超冷刀治疗后第8d,肿瘤较术前缩小50％,术后随方均生存,最长已生存6mo。结论 手术联合术中氩超冷刀治疗巨块多灶型肝脏恶性肿瘤措施是成功的,对所谓“无法治疗”的肝脏恶性肿瘤提供新的可行性治疗途径。     

AdKDR-CDglyTK融合基因系统对胃癌MGC-803细胞体的外杀伤作用

目的探讨腺病毒介导血管内皮生长因子第二受体,亦即酪氨酸激酶受体(kinase domain-containing receptor,KDR) 启动子驱动的CDglyTK融合基因体系对人胃癌细胞株MGC-803的杀伤作用。方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK 在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的MGC-803细胞株,并给予不同浓度的前药5-FC和／或更昔洛韦,观察该体系对MGC-803细胞株的杀伤效应及其旁观者效应;并以流式细胞仪检测细胞周期的变化,电镜观察细胞的病变。结果所得病毒滴度为2．0×1012pfu／ml。MGC-803细胞株感染率随腺病毒滴度的递增而增加。融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P<0．001)。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同比例混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应。流式细胞术检测表明该体系抑制MGC-803细胞DNA的合成,表现为G1期细胞比率增多及S期细胞减少(P<0．001)。同时,电镜下可见MGC-803细胞有凋亡和坏死改变。结论腺病毒介导KDR启动子驱动的CDglyTK融合基因体系可以有效地杀伤人胃癌细胞。     

自制免气腹装置腹腔镜胆囊切除21例

自制免气腹装置腹腔镜胆囊切除２１例俞金龙高毅杨继震杨军Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｃｈｏｌｅｃｙｓｔｅｃｔｏｍｙ，ｌａｐａｒｏｓｃｏｐｉｃ；ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｉｔｉｓ／ｓｕｒｇｅｒｙ；ｃｈｏｌｅｃｙｔｉｔｉｓ／ｔｈｅｒａｐｙ主题词胆囊切除术，腹...     

“三管一孔一脏器”技术在免气腹腹腔镜胆囊切除术中的应用

目的研究“三管一孔一脏器”技术在免气腹腹腔镜胆囊切除术中的应用效果。方法利用自制免气腹装置应用“三管一孔一脏器”技术完成免气腹腹腔镜胆囊切除术12例并进行分析。结果12例中,除1例中转气腹外,11例均顺利完成LC手术,无胆道损伤,无胆漏。结论“三管一孔一脏器”技术方法适用于免气腹腹腔镜胆囊切除术。     

KDR启动子驱动双自杀基因靶向杀伤人胃癌细胞的作用

目的:探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的双自杀基因体系对人胃癌细胞SCG7901的靶向杀伤作用.方法:应用重组腺病毒AdEasy-KDR-CDglyTK体外感染实验组SCG7901细胞株和对照组HepG2细胞株,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对SCG7901细胞杀伤效应及其旁观者效应.结果:携带双自杀基因和报告基因(GFP)的重组腺病毒载体,感染复数为100时,95%以上的受感染SCG7901和HepG2细胞中有GFP表达.已转染腺病毒的SCG7901和未转染SCG7901的细胞在细胞生长方面无显著性差异(t=0.224,P=0.823).已转染腺病毒的HepG2细胞和未转染HepG2的细胞在细胞生长方面也无显著性差异(t=0.120,P=0.904).在前药应用下,已转染腺病毒的SCG7901和HepG2细胞表现出对前药不同的敏感性,SCG7901细胞对前药具有较高的敏感性(F=109.43,P=0.000).融合基因的疗效优于单一自杀基因(F=162.22,P=0.000).将感染腺病毒细胞与未感染细胞以不同比例混和培养,观察到该体系明显的旁观者效应.结论:KDR基因启动子可以调控融合基因体系选择性地杀伤人胃癌SCG7901细胞,并存在旁观者效应.     

腹腔镜改良IPOM法治疗腹股沟疝39例

探讨改良腹腔镜补片植入术(IPOM)的临床效果。采用腹腔镜腹股沟疝修补术加补片植入术治疗腹股沟疝39例,植入补片采用钉合法与锁边缝合法相结合。39例均在腹腔镜下完成,手术时间为31~63 min,平均41±7 min,无血管损伤、无顽固性疼痛、无感染和排异反应。术后随访3~12个月,未见复发。腹腔镜改良型IPOM法操作简便,手术时间短,恢复快,效果良好,适合临床开展。