HPLC法测定人血浆中对乙酰氨基酚浓度

建立测定人血浆中对乙酰氨基酚浓度的HPLC法,并应用于人体药代动力学研究.血浆样品用6%高氯酸沉淀蛋白.色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18柱,流动相为0.02 mol·L-1甲酸铵溶液(含甲酸0.2%)-甲醇-乙腈(88∶6∶6),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长245nm.血浆中内源性物质对样品测定无干扰.本方法线性范围为0.1～20μg·mL-1 (r=0.9996),最低定量浓度为0.1μg·mL-1,方法回收率为99.0%～100.2%,日内、日间RSD均小于6%.本法简便、准确,适用于对乙酰氨基酚药代动力学的研究.     

单硝酸异山梨酯阿司匹林缓释片在人体内的药动学及生物等效性

20名健康受试者随机交叉单剂量(单硝酸异山梨酯60mg和阿司匹林75mg)和多剂量口服单硝酸异山梨酯阿司匹林缓释片(受试制剂)、单硝酸异山梨酯缓释片及阿司匹林肠溶片(参比制剂)后,分别采用HPLC-MS法和HPLC-UV法测定人血浆中单硝酸异山梨酯和水杨酸浓度。药动学参数见文中表1和表2。经双单侧t检验结果表明,以单硝酸异山梨酯为研究对象,两制剂具有生物等效性;以阿司匹林为研究对象,两制剂的吸收程度相当,但受试制剂吸收速度较快。     

反式曲马朵在大鼠肝微粒体O-去甲基代谢中的立体选择性

目的研究反式曲马朵O-去甲基代谢的立体选择性.方法高效毛细管电泳法测定大鼠肝微粒体孵育液中反式曲马朵和O-去甲基曲马朵对映体的浓度,酶促动力学方法研究O-去甲基曲马朵对映体的生成.结果 (-)-O-去甲基曲马朵生成有较大的Vmax;反式曲马朵两对映体间存在相互作用,使(+)-O-去甲基曲马朵生成的Vmax明显减慢;奎宁及奎尼丁对(+)-O-去甲基曲马朵生成的抑制作用较强.结论反式曲马朵O-去甲基代谢有立体选择性,对映体间的相互作用及酶抑制剂使其立体选择性程度加强.     

双黄连和清开灵注射液与5种喹诺酮类药物的配伍

目的;考察双黄连与清开灵注射液跟5种喹诺酮类药物的配伍变化.方法;采用体外交叉配伍试验观察其外观、pH变化,仪器法检测配伍前后的不溶性微粒.结果;环丙沙星注射液跟双黄连和清开灵注射液配伍即产生混浊,其他混合液外观、pH均无明显变化.配伍前各供试液不溶性微粒检查均符合《中国药典》规定,而配伍后不溶性微粒均不符合《中国药典》规定.结论;双黄连和清开灵注射液与5种喹诺酮类药物不能直接伍用.     

高效毛细管电泳测定血清中盐酸反式曲马多对映体

目的 :建立测定人血清中盐酸反式曲马多对映体的高效毛细管电泳方法。方法 :血清中盐酸曲马多以乙酸乙酯提取、浓缩。含 0 8mmol·L-1磺丁基 - β -环糊精的 40mmol·L-1Tris缓冲液 (磷酸调pH至 2 5 )为分离介质 ;进样电压 10kV ,2 0s,入口为阳极 ;分离电压 15kV ,柱温 2 5℃ ,检测波长 2 14nm。结果 :盐酸曲马多的 4种立体异构体达到基线分离 ,且血清组分无干扰峰 ;以盐酸顺式曲马多的一对映体为内标 ,( ) -盐酸反式曲马多、 (- ) -盐酸反式曲马多的血清浓度在 2 5～ 32 0ng·mL-1范围内 ,峰面积与内标峰面积的比值和浓度呈良好的线性关系 ;回收率在 90 %和 10 8%之间 ;日内、日间RSD分别小于 18%和 2 1% ;最低检测浓度为1 2 5ng·mL-1。结论 :本方法适用于临床药代动力学研究。     

右美托咪定抑制丙泊酚诱导原代培养皮层神经元凋亡

目的 探讨右美托咪定抑制丙泊酚诱导原代培养皮层神经元凋亡的机制.方法 体外原代培养7d的大鼠皮层神经元,给予500 μmol/L丙泊酚和(或)不同浓度右美托咪定处理12 h后,分为丙泊酚组、右美托咪定+丙泊酚组,对照组给予同溶剂的20％脂肪乳,用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测各组神经元存活率的变化,Hoechst33258核染色法检测神经元调亡,蛋白质印迹法(Western blotting)测定神经元磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)和细胞色素C(Cyt-C)蛋白水平.结果 与对照组比较,丙泊酚组神经元存活率明显下降,神经元凋亡率明显增加,pCREB蛋白水平明显降低,Cyt-C蛋白水平明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.01).与丙泊酚组比较,右美托咪定+丙泊酚组神经元存活率明显增加,神经元凋亡率明显下降,pCREB蛋白水平明显增加,Cyt-C蛋白水平明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 右美托咪定可对抗丙泊酚引起的原代培养皮层神经元凋亡,其机制可能与增加pCREB蛋白水平,降低Cyt-C蛋白水平有关.     

高效液相色谱法测定人血浆中奥美拉唑浓度

建立测定人血浆中奥美拉唑浓度的高效液相色谱法,并应用于人体药代动力学研究。血浆样品中加入内标非那西丁后用乙酸乙酯提取,色谱柱为ZorbaxSB-C18柱,流动相为0·05mol·L-1乙酸铵溶液(用氨水调至pH7·0)-乙腈(68∶32),流速为1·0ml·min-1,紫外检测波长302nm。血浆中内源性物质对样品测定无干扰。本方法线性范围为0·01~2μg·ml-1(r=0·9997),最低定量浓度为0·01μg·ml-1,提取回收率大于80%,方法回收率为98·6%~103·1%,日内、日间RSD均小于6%。本法简便、准确,适用于奥美拉唑药代动力学的研究。     

国产和进口氟康唑胶囊剂的人体生物等效性研究

目的:以进口氟康唑胶囊为参比制剂,研究两种国产胶囊剂在健康人体的相对生物利用度,评价其生物等效性.方法:18名健康志愿者按照3制剂3周期优化拉丁方设计,分别单剂量口服参比制剂和两种受试制剂(A:每粒50 mg;B:每粒150 mg),剂量均为300 mg,HPLC法测定人血浆中氟康唑的浓度.结果:受试制剂A、B和参比制剂的主要药代动力学参数:cmax分别为(5.39±0.90)、(4.96±0.62)和(5.13±0.72)μg/ml;tmax分别为(1.6±0.9)、(1.7±0.7)和(2.2±0.8)h;AUC0-120h分别为(215.8±31.8)、(207.5±37.1)和(213.5±38.5)μg·h·ml-1;AUC0-∞分别为(237.8±39.0)、(232.4±52.0)和(234.0±48.7)μg·h·ml-1;t1/2分别为(34.7±5.9)、(35.7±9.4)和(33.1±6.5)h.受试制剂A、B相对于参比制剂的相对生物利用度分别为(102.5±15.8)%和(97.9±12.1)%.结论:受试制剂A、B与参比制剂具有生物等效性.     

曲克芦丁片的人体生物等效性研究

目的:研究2种曲克芦丁片的人体相对生物利用度,评价其生物等效性.方法:20名健康男性志愿者按照2制剂2周期的随机交叉试验设计,分别单剂量口服参比制剂和受试制剂,剂量均为900 mg,采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中曲克芦丁的浓度,用DAS 1.0软件计算各药代动力学参数,并进行生物等效性统计分析.结果:受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:cmax分别为(1.83±0.90)和(2.02±1.54)ng/ml;tmax分别为(1.20±0.50)和(1.00±0.40)h;AUG0～12h分别为(8.48±3.74)和(8.51±5.44)ng·h·ml-1;AUC0-∞分别为(9.47±4.55)和(9.97±6.15)ng·h·ml-1;t1/2分别为(2.80±2.00)和(4.00±2.40)h.2种制剂的cmax、tmax、AUC0～12h和AUG0-∞均无显著性差异,双单侧t检验结果表明,受试制剂cmax的90%置信区间落在参比制剂的70%～143%范围内,受试制剂AUG的90%置信区间均落在参比制剂的80%～125%范围内,受试制剂的相对生物利用度为(113.6±39.5)%.结论:曲克芦丁片2种剂具有生物等效性.     

盐酸加替沙星胶囊的人体相对生物利用度研究

目的:比较两种国产盐酸加替沙星制剂的人体相对生物利用度.方法:18名健康志愿者按照两制剂两周期的随机交叉试验设计,分别单剂量口服受试制剂(盐酸加替沙星胶囊)和参比制剂(盐酸加替沙星片)400 mg,采用HPLC-紫外检测法测定人血浆中加替沙星的浓度,用DAS 1.0软件对所得药代动力学参数进行统计分析.结果:受试和参比制剂的主要药代动力学参数如下:cmax分别为(4.29±0.72)和(4.04±0.45)μg/ml;tmax分别为(1.5±0.7)和(1.5±0.6)h;AUC0～36h分别为(40.26±4.77)和(37.89±4.09)μg·h·ml-1;AUC0～∞分别为(41.69±5.20)和(39.12±4.53)μg·h·ml-1;t1/2分别为(7.1±0.8)和(7.1±0.8)h.受试制剂相对于参比制剂的相对生物利用度为(106.3±6.6)%.结论:两制剂各药代动力学参数均无显著差异,二者具有生物等效性.