用尿沉淀细胞DNA甲基化状态的分析检测膀胱癌

目的：确定尿沉淀细胞DNA中的13个肿瘤相关基因启动子的甲基化谱式分析在膀胱癌诊断中的价值。方法：用定性甲基化特异性（methylation specific polymerase chain reaction，MSP）的方法，对92例临床确诊的膀胱癌患者、23例非肿瘤性尿路疾病患者、6例脑外科患者、7例健康志愿者检测了尿沉淀细胞DNA中肿瘤相关基因启动子的甲基化状态。结果：在临床确诊的92例膀胱癌患者中被检测的13个基因的高甲基化状态出现频率显著高于23例非肿瘤性尿路疾病患者，差异有统计学意义（P〈0．05）。而6例脑外科患者和7例正常健康人的尿沉淀细胞DNA中，上述基因均为去甲基化状态。若以任一个基因高甲基化为膀胱癌的指征，88．0％（81／92例）的膀胱癌可被检出。结论：MSP法分析尿沉淀细胞DNA中肿瘤相关基因启动子的甲基化状态可有效地检出膀胱癌。     

10个基因的启动子CpG岛甲基化状态与乳腺癌细胞对5-氟尿嘧啶敏感性的关系

目的 探讨10个基因的启动子CpG岛甲基化状态与乳腺癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的关系,确定与乳腺癌细胞株5-Fu敏感性相关的启动子CpG岛类基因.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Bcap-37、T47D和ZR-75-30乳腺癌细胞株对5-Fu的敏感性.应用甲基化特异性PCR(MSP)方法,检测3株对5-Fu敏感性有差异的乳腺癌细胞株中BAG1、C110RF31、CBR1、CBR4、GJA1、FOXL2、IGFBP6、P4HA1、SRI和TYM基因的启动子CpG岛甲基化状态,并用实时定量PCR的方法检测PKSS21、LOX、IGFBP6、ABCC8和CHFR基因的稳定态mRNA表达的水平.结果 IGFBP6和FOXL2基因在对5-Fu敏感和耐药的乳腺癌细胞株中的甲基化状态有差异.除CHFR基因以外,PRSS21、LOX、IGFBP6和ABCC8基因的表达水平与启动子CpG岛甲基化状态有关,处于甲基化状态时表达水平低,而在处于去甲基化状态时表达水平高.结论 在敏感和耐药乳腺癌细胞株中存在甲基化状态差异的基因为IGFBP6和FOXL2基因,这为进一步开展DNA甲基化标志在乳腺癌化疗耐药中的应用研究提供了依据.     

2021—2022年温州市住院儿童急性呼吸道感染病原谱变化分析：一项单中心研究

目的：对比分析2021年和2022年温州市住院儿童急性呼吸道感染（ARIs）病原谱变化特点,为温州市儿童ARIs的精准诊治及防控提供科学依据。方法：回顾性分析2021年1月至2022年12月收治于温州医科大学附属第二医院育英儿童医院的ARIs住院患儿的13种呼吸道病原体检测结果,对比分析2021年和2022年ARIs住院患儿的病原谱特征,以及在不同性别、不同年龄、不同季节和病原体感染模式等方面的差异及变化趋势。结果：2021年和2022年病原体总阳性率分别为70.74%(3 477/4 915)和70.74%(6 099/8 622)。2022年检出率排名前五位的主要病原体,从2021年依次为鼻病毒（HRV）、呼吸道合胞病毒（HRSV）、副流感病毒（HPIV）、腺病毒（HADV）和偏肺病毒（HMPV）,转变为HRV、肺炎支原体（Mp）、HRSV、HADV和HMPV。2022年Mp、HADV和HMPV检出率较2021年明显升高（均P<0.01）,HRV、HRSV、HPIV检出率较2021年明显下降（均P<0.01）。2022年呼吸道病原体总体检出率男童略高于女童,以2～<...     

流式荧光杂交法检测人乳头状瘤病毒基因分型的疑难结果分析及其对策

目的 分析HPV基因分型时出现的疑难结果,并探讨相应的对策.方法 采用流式荧光杂交法检测2017年和2018年所有HPV标本,按照HPV疑难标本的复检规则和报告细则进行复检和报告,回顾统计分析标本复查率和复查结果一致性,并分析复查不一致的原因及其结果特征.结果 2年内共检测64 664份HPV标本,符合疑难标本有2 2...     

颅内动脉瘤的外科手术治疗

颅内动脉瘤破裂出血的致死率约40％,再次破裂出血后的死亡率50％～75％。因此及时发现颅内动脉瘤,并选择合适手术方法,提高手术技巧,积极防治动脉瘤再次出血,对降低颅内动脉瘤患者死、残率,提高临床疗效有重要意义。2003年1月--2008年1月本科对经DSA明确诊断的21例颅内动脉瘤行开颅显微手术夹闭,现将该组病例有关资料结合作者在动脉瘤显微手术夹闭手术治疗中的初步体会报告如下。     

注重思想教育,强化教学实践

“医生”是个听来平淡,无味,抑或是让人生畏让人忌讳的称谓,然而有多少人知道,要真正地得到这个称谓,做一个合格的医生要付出多少的艰辛、操劳甚至是奉献。而要做好一个国家培养大批医生的老师,其中的付出和辛劳就是可想而知的了。但为了祖国的医疗事业,为了人民的健康,带教好学生,为国家培养合格的医疗栋梁,这是我们作为先期医生,带教老师责无傍贷的义务和责任。十多年的带教工作,使我对带教的过程及方法积累了点滴的认识和体会,现报告如下。1鼓励学生消除畏难情绪,充满信心进入实习。 学生初入科室,首先要让学生知道,千里之行,     

早期不同频次高压氧联合亚低温对重度颅脑外伤患者脑神经功能的影响

目的 探讨早期不同频次高压氧联合亚低温对重度颅脑外伤(sTBI)患者脑神经功能的影响.方法 选取泰兴市人民医院2016年3月至2019年2月收治的86例sTBI患者为研究对象,分成A组和B组,每组43例.两组给予不同频次高压氧联合亚低温治疗,其中A组高压氧治疗每天2次,B组高压氧治疗每天1次.格拉斯哥预后(GOS)评分...     

抑制T细胞增殖的抗CD45单克隆抗体的建立

目的 寻找能调节T细胞功能的相关分子,进行与T细胞介导的自身免疫性疾病相关的研究。方法 从BALB/c小鼠骨髓中收集树突状细胞,免疫Wistar大鼠,进行细胞融合,建立杂交瘤细胞系。筛选得到很多株能调节T细胞功能的杂交瘤细胞系,对其中一株最能抑制T细胞增殖的杂交瘤细胞系进行了进一步的深入研究。结果 显示其目标分子是CD45,同时增殖实验结果显示该抗体能显著抑制T细胞增殖反应。结论 抗CD45单克隆抗体能有效抑制T细胞增殖,有望将本抗体用于T细胞介导的自身免疫性疾病的相关预防及治疗中。     

Ommaya管在脑室出血治疗中的应用

目的探讨Ommaya管在脑室外引流的应用。方法选取15例脑室出血的患者,以Ommaya管进行脑室穿刺外引流,头皮针穿刺Ommaya囊,尿激酶冲洗。结果经10～18d(平均14d)引流后,引流液澄清,CT复查脑室内高密度影消失,试夹管24h临床症状无恶化。15例除1例因再出血死亡,1例植状状态生存外,其余13例病人的病情均得到明显改善。结论应用Ommaya管引流可以延长脑室外引流时间,不易感染,操作简单,病人痛苦少,可重复多次穿刺,可应用于脑室出血的治疗。     

高糖对人脐静脉内皮细胞ET-1、vWF表达的影响

目的 探讨体外培养条件下高糖状态对人脐静脉内皮细胞假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)表达的影响. 方法 体外培养,利用高浓度葡萄糖诱导内皮细胞HUVEC-12细胞株功能损伤.实验分为正常对照组、低剂量高糖组、中剂量高糖组和高剂量高糖组,普通光镜和Hoechst 33258荧光染色观察HUVEC-12细胞形态和核形态的变化;逆转录-聚合酶链式反应检测细胞内ET-1、vWF mRNA的表达;细胞免疫荧光检测细胞内ET-1、vWF蛋白水平的改变. 结果 与对照组细胞比较,不同浓度高糖处理内皮细胞72 h后,普通光学显微镜下观察到,细胞数目减少,圆形细胞明显增多,细胞间隙增宽,细胞边界不清;Hoechst33258染色结果表明有细胞核浓缩、出现高亮度蓝色荧光的凋亡细胞,并呈剂量依赖性损伤细胞;细胞ET-1、vWF mRNA及蛋白表达上调. 结论 高糖对人脐静脉内皮细胞有显著的损伤作用,可能与vWF、ET-1表达升高有关.