无线便携式组织血氧检测仪的开发与研制

目的 开发研制一种便携式组织血氧检测仪,用于临床上实时、动态检测断指/断肢再植、皮瓣移植术后组织血氧值,帮助医护人员早期评估再植组织的血运情况。方法 基于近红外光谱法,利用人体血液中含氧血红蛋白和脱氧血红蛋白对近红外光吸收度不同的原理来进行组织血氧检测,采用无线蓝牙技术实现终端数据传输,并通过长时程的大数据管理和人工智能算法对再植组织的血氧水平进行智能评价。结果 设备的再植组织血氧参数测量范围为20%～100%,误差值为±2%,有效无线传输距离>3 m,基于人工智能算法的大数据管理,可以实现组织血氧水平的标定和评价。结论 无线便携式组织血氧检测仪体积小、重量轻、测量数据准确,能够帮助医护人员实时了解再植组织的恢复情况,有利于把握治疗的最佳时机。     

某血液分析仪的性能评价

目的评价美国Beckman Coulter Hmx全自动血液分析仪性能。方法按照国际血液学标准化委员会(ICSH)和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的有关标准对常用血液指标进行检测。结果 Hmx分析仪各项指标线性良好r>0.995;批内批间精密度在规定范围内;各项参数携带污染率低;其测定结果与ICSH推荐参考方法相关性良好r>0.97;与手工法对100例白细胞分类(DC)结果比较,两者中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞的r分别为0.959、0.961、0.908、0.718、0.314。结论 Hmx分析仪各方面性能良好,CBC参数快速、准确、精密、可靠,可供国内大中型医院实验室对大批量全血标本进行有效筛检。     

抗凋亡基因bcl-2启动子CpG岛的高甲基化状态见于28.3%(13/46例)的膀胱癌患者尿沉淀细胞DNA

目的:检测上海地区膀胱癌患者尿沉淀细胞中3个肿瘤相关基因启动子CpG岛的甲基化谱式异常频率,继而评估其应用前景。方法:采用甲基化特异性PCR方法分析尿沉淀细胞DNA中DAPK1、bcl2和hTERT3个基因的启动子CpG岛甲基化状态,并通过RTPCR方法评估DAPK1基因在膀胱癌细胞系中的表达状态。结果:对膀胱癌细胞系中DAPK1基因的启动子CpG岛甲基化状态及其表达(mRNA水平上)所做的分析,确立了高甲基化状态与表达静息化之间的相关性。对46例临床确诊的膀胱癌患者和84例非膀胱癌对照(包括前46例术后的36例)的尿沉淀细胞中DNA甲基化的分析发现,仅bcl2基因的高甲基化见之于28.3%(13/46例)的膀胱癌患者,而84例的对照中均为去甲基化状态。结论:在美国膀胱癌患者尿沉淀细胞中频发DNA高甲基化的靶点在上海地区膀胱癌患者人群中频率很低,因此寻找在后者中频发DNA高甲基化的新靶点实属必要。     

MSRE-gPCR技术分析多基因DNA甲基化对肝细胞癌的诊断价值

背景与目的:DNA甲基化是潜在的肿瘤标志物.本研究运用自行建立的甲基化敏感性限制性内切酶一定量PCR(methylation-sensitive restriction enzymes-based quantitative PCR,MSRE-gPCR)方法检测肝细胞癌(hepatocellutar carcinoma,HCC)组织中多个基因的DNA甲基化状态,筛选可用于HCC诊断的DNA甲基化标志物组合.方法:以47对HCC患者癌组织和癌旁组织、8例正常人肝组织为材料,运用MSRE-gPCR方法检测这102例肝组织中APC、GSTPI、RASSFIA、p16、SFRP1、RUNX3、Hint1、SOCS1和HIC-1基因的启动子甲基化状态.结果:APC、GSTPI、RASSF1A、p16、SFRP1、RUNX3基因在肿瘤组织中的甲基化率分别为70.2%、70.2%、63.8%、29.8%、44.7%和36.2%,均显著高于对应癌旁组织(P均＜0.05);而Hintl、SOCSI和HIC-1基因甲基化水平在HCC肿瘤和癌旁组织间无显著差异.联合检测APC、GSTP1、RASSF1A和SFRP1 4个靶点,可检出所有HCC病例.这些基因的甲基化水平与患者肿瘤大小、分化、包膜及HBV感染等临床病理参数均无显著相关性.结论:联合检测APC、GSTPI、RASSFIA和SFRPI的DNA甲基化状态对于HCC风险评估和分子诊断具有重要价值.     

19S-IgM-TPELISA对新生儿先天性梅毒诊断价值的研究

目的:采用19S-IgM-TP ELISA方法对可疑新生儿先天性梅毒进行检测,并与TRUST、TP ELISA的检测结果进行比较,探讨19S-IgM-TP ELISA方法在新生儿先天性梅毒的早期诊断和疗效观察中的临床意义。方法:实验组为50例拟诊新生儿先天性梅毒患儿,男23例,女27例;对照组为非梅毒新生儿20例,男10例,女10例。实验组治疗前、后二次静脉采血,分别应用19S-IgM-TP ELISA、TRUST、TP-ELISA方法进行检测,分析三种方法在驱梅治疗前后检测结果;对实验组确诊先天性梅毒患儿行脑脊液生化检测。对实验组13例19S-IgM-TP ELISA阴性的患儿随访1个月,再次进行上述三种方法复查。结果:50例实验组标本中,TRUST法检测36例阳性,阳性率72.00%(36/50);TP-ELISA法阳性49例,阳性率98.00%(49/50);19S-IgM-TP ELISA法阳性37例,阳性率74.00%(37/50);三种检测方法检出阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=13.77,P<0.01)。依临床表现及19S-IgM-TP ELISA检查结果确诊为先天先梅毒为37例。第1个疗程结束时37例新生儿梅毒,死亡1例,其余36例血清学19S-IgM-TP ELISA转阴率为97.22%(35/36),TRUST转阴率为61.11%(22/36),TP-ELISA转阴率2.78%(1/36),三种检测方法转阴率比较,差异有统计学意义(χ2=65.76,P<0.01)。对实验组13例19S-IgM-TP ELISA阴性患儿出院后1月随访复查。12例患儿初次TRUST检查阴性仍为阴性,1例TRUST滴度下降至在1∶1;12例TP-ELISA仍阳性,1例患儿TP-ELISA阴性(原来阴性),19S-IgM-TP ELISA检测13例均阴性。结论:19S-IgM-TPELISA方法其设备需求较低、方法简单易行、观察结果客观、试剂标准化,敏感性高、特异性强,19S-IgM-TP ELISA方法检测可作为新生儿先天性梅毒的早期确诊依据,有助于早期判断新生儿梅毒治疗疗效观察。     

乙型肝炎病毒大蛋白在慢性乙型肝炎患者中检测的临床价值探讨

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白(HBV-LP)反映HBV复制的可靠性及其检测的临床价值和意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测304份慢性乙型肝炎患者血清标本的HBV-LP和乙型肝炎两对半结果,并应用实时荧光定量PCR方法平行检测HBV-DNA结果。结果 304例慢性乙型肝炎患者标本中,HBV-DNA的阳性率67.76%,HBV-LP的阳性率75.66%,两者差异无统计学意义;其中186例HBeAg阴性患者HBV-LP阳性率65.59%,高于HBV-DNA的阳性率(50.54%),差异有统计学意义(P<0.01);186例HBeAg阴性患者中,HBV-DNA和HBV-LP检出一致率为76.34%;血清中HBV-LP(OD值)与HBV-DNA拷贝数之间具有良好的相关性,相关系数(r)=0.853。结论 HBV-LP能反映出乙型肝炎病毒的复制情况;在HBeAg阴性乙型肝炎患者中,HBV-LP较HBV-DNA更能敏感反映HBV的感染复制状态;在无条件开展HBV-DNA检测的一些基层医院,HBV-LP可以作为反映乙型肝炎病毒的复制情况的一个很好的血清学指标。     

GSK-3β与cyclin D1在糖尿病版纳微型猪肾脏组织中的表达及意义

目的在建立版纳微型猪糖尿病胰岛素抵抗的模型基础上,观察其肾脏病变及GSK-3β、cyclin D1的表达变化,探讨二者之间可能存在的作用关系。方法高糖高脂饮食加低剂量STZ诱导版纳微型猪糖尿病模型,观察其血糖、胰岛素、肾脏组织结构病理变化,Realtime-PCR检测肾脏组织GSK-3β、cyclin D1 mRNA含量变化,研究二者相关性,探讨其作用机制。结果喂养12个月后,实验组较之对照组出现空腹血糖明显升高(P0.01),阶段性低胰岛素血症,肾小管上皮细胞水肿,间质胶原纤维增生,部分肾小球囊腔增大,内部细胞数目增加,肾小球肥大,基底膜增厚,GSK-3β、cyclin D1mRNA肾脏组织明显上调。结论高糖高脂饮食加低剂量注射STZ构建了版纳微型猪糖尿病胰岛素抵抗模型,上调肾脏组织GSK-3β、cyclin D1表达,二者表达正相关。     

小鼠睾丸基因PDZD9的克隆及亚细胞定位分析

目的 克隆小鼠睾丸基因PDZD9并构建pEGFP-C1-PDZD9重组栽体进行亚细胞定位分析. 方法 提取小鼠睾丸RNA,利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术从小鼠睾丸cDNA中分离PDZD9基因.将PDZD9基因定向克隆至带有绿色荧光报告基因的真核表达载体pEGFP-C1.利用阳离子聚合物方法转染COS7细胞,荧光显微镜下观察其亚细胞定位. 结果 小鼠睾丸基因PDZD9克隆成功,成功构建真核表达载体pEGFP-C1-PDZD9,亚细胞分析表明该蛋白定位于细胞核和细胞质中,主要分布在细胞核中. 结论 成功克隆了小鼠睾丸基因PDZD9,并初步分析了其在细胞中的定位情况,为下一步对PDZD9的功能研究奠定了基础.     

艾溴利平对糖尿病小型猪心肌组织蛋白激酶-B表达的影响

目的观察磷脂酰肌醇-3激酶信号通路中关键分子蛋白激酶-B(Akt2)在饮食诱导的糖尿病小型猪心肌组织中的表达,以及合成化合物艾溴利平对Akt2表达的影响,探讨艾溴利平在糖尿病心肌病变中的作用。方法15只雄性广西巴马小型猪按体重随机分为3组,每组5只。正常对照组饲正常饲料,高能量组饲高脂高糖高胆固醇饲料,加药组在高脂高糖高胆固醇饲料中加入艾溴利平(0.4 g·kg~(-1)·d~(-1))。每月末测定血糖、三酰甘油(TG)、胰岛素、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)并行口服葡萄糖耐量实验(OGTF)。5 mo末取部分心肌组织,用Western blotting和免疫组织化学方法检测Akt2蛋白的表达。结果与正常对照组相比,高能量组血糖、TG、胰岛素和HDL-C升高,糖耐量减低;加药组与高能量相比,血糖、TG和胰岛素明显降低,HDL-C水平升高,OGTF血糖清除和胰岛素分泌近似正常对照组。心肌组织Akt2蛋白表达量正常对照组为1.48±s 0.22,明显高于高能量组(1.00±0.16,P<0.01);而加药组Akt2蛋白表达量1.38±0.20,高于高能量组(P<0.01),与正常对照组相近(P>0.05)。结论高脂高糖高胆固醇饮食诱导的糖尿病小型猪心肌组织Akt2表达降低,艾溴利平能够上调心肌组织Akt2蛋白的表达。     

中西医结合治疗单纯疱疹性角膜炎45例

单纯疱疹性角膜炎是由单纯疱疹病毒引起的角膜损害,本病为危害严重的感染性眼病之一,易反复发作,致盲率高,目前多主张应用综合疗法治疗。我科采用中西医结合治疗的方法,治疗单纯疱疹性角膜炎患者45例（50只眼）,现报告如下。