贵州小型猪2型糖尿病动物模型的建立

目的　建立贵州小型猪 2型糖尿病模型 ,并观察其胰腺结构变化。方法　将贵州小型猪1 0头随机分为 2组 ,5只饲以基础饲料作为正常组 (A组 ) ,5只饲以高脂高糖饲料作为实验组 (B组 )。共观察 6个月。在 0 ,2 ,3,4,5 ,6月末采取动物禁食过夜后空腹血 ,测定血浆中血糖和血清中胰岛素。于第 6个月末 ,全部处死动物 ,取动物胰腺。取一部分胰腺用 1 0 %甲醛溶液固定 ,常规石蜡包埋切片 ,H .E染色 ,光学显微镜下观察 ;另一部分胰腺用 2 .5 %戊二醛固定 ,常规电镜样品制备 ,透射电镜下观察并照相。结果　实验组 2个月后即出现高血糖 ,并随时间延长而逐渐升高 ,对照组血糖未见升高 ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。实验组血清胰岛素稍有升高 ,3个月后逐渐降低 ,6个月后明显降低 ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。实验组胰腺组织表现为胰岛萎缩 ,胰岛边缘皱缩 ,胰岛数目减少 ,胰岛内细胞数量亦减少 ,多数细胞呈梭形 ,细胞核呈杆状 ,胰岛周围少量淋巴细胞浸润 ,出现空泡变性。透射电镜下观察到实验组胰岛 β细胞肿胀 ,部分结构溶解、细胞呈空化 ,细胞颗粒溶解或脱落 ,胰岛周围细胞内可见较大的脂滴。α细胞结构有局灶溶解呈空泡状结构 ,腺泡细胞内粗面内质网模糊 ,部分扩张严重。结论　高脂高糖饲料可诱发     

广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型LOX-1表达的研究

目的 建立猪动脉粥样硬化(AS)模型,探讨该模型中LOX-1表达的变化.方法 将10头广西巴马小型猪分别喂正常(CD)和高脂、高糖、高胆同醇(HFSCD)饲料,每月末测定血脂水半.第5个月末处死动物,采用苏丹Ⅳ检测动脉粥样斑块病变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westem Blot印迹分别检测主动脉组织中LOX-1的mRNA和蛋白质表达.结果 与CD组比较,HFSCD组血浆甘油三酯、高密度脂蛋白胆同醇(HDI-C)和总胆同醇水平异常升高;动脉有明显的脂质条纹及斑块;动脉粥样硬化小型猪主动脉组织的LOX-1的mRNA及蛋白质的表达均上=调(P＜0.05).结论 高脂、高糖、高胆同醇饲料喂养小型猪可建立As动物模型;AS小型猪主动脉组织的LOX-1表达上调.     

产NDM-1、IMP-4和KPC-2碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药特点

目的探讨本院临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因的携带情况及对17种常用抗菌药物的耐药特点。方法采用VITEK Compact-2全自动微生物分析系统进行菌株的鉴定和药敏试验,收集耐碳青霉烯类药物肺炎克雷伯菌24株,采用改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;PCR技术扩增耐药基因,包括碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和Amp C酶基因,并对扩增产物进行测序和BLAST比对分析。结果菌株对头孢菌素类、单环内酰胺类、β-内酰胺酶抑制剂复合物、氟喹诺酮类和呋喃妥因等抗菌药物表现出较高的耐药性,但对氨基糖苷类药物丁胺卡那和妥布霉素的敏感性较好,敏感率分别为100.0%和62.5%。24株耐药菌株中,有16株改良Hodge试验阳性,阳性率为66.7%;PCR扩增结果显示:12株检测出blaKPC-2基因,3株检测到blaIMP-4基因,2株blaNDM-1阳性,所有菌株都携带blaSHV基因,12株携带blaTEM基因,13株携带blaCTX-M基因,7株携带blaDHA基因。结论本院CRKP以产KPC-2为主,但同时还出现了NDM-1和IMP-4金属酶。     

19S-IgM-TPELISA对新生儿先天性梅毒诊断价值的研究

目的:采用19S-IgM-TP ELISA方法对可疑新生儿先天性梅毒进行检测,并与TRUST、TP ELISA的检测结果进行比较,探讨19S-IgM-TP ELISA方法在新生儿先天性梅毒的早期诊断和疗效观察中的临床意义。方法:实验组为50例拟诊新生儿先天性梅毒患儿,男23例,女27例;对照组为非梅毒新生儿20例,男10例,女10例。实验组治疗前、后二次静脉采血,分别应用19S-IgM-TP ELISA、TRUST、TP-ELISA方法进行检测,分析三种方法在驱梅治疗前后检测结果;对实验组确诊先天性梅毒患儿行脑脊液生化检测。对实验组13例19S-IgM-TP ELISA阴性的患儿随访1个月,再次进行上述三种方法复查。结果:50例实验组标本中,TRUST法检测36例阳性,阳性率72.00%(36/50);TP-ELISA法阳性49例,阳性率98.00%(49/50);19S-IgM-TP ELISA法阳性37例,阳性率74.00%(37/50);三种检测方法检出阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=13.77,P<0.01)。依临床表现及19S-IgM-TP ELISA检查结果确诊为先天先梅毒为37例。第1个疗程结束时37例新生儿梅毒,死亡1例,其余36例血清学19S-IgM-TP ELISA转阴率为97.22%(35/36),TRUST转阴率为61.11%(22/36),TP-ELISA转阴率2.78%(1/36),三种检测方法转阴率比较,差异有统计学意义(χ2=65.76,P<0.01)。对实验组13例19S-IgM-TP ELISA阴性患儿出院后1月随访复查。12例患儿初次TRUST检查阴性仍为阴性,1例TRUST滴度下降至在1∶1;12例TP-ELISA仍阳性,1例患儿TP-ELISA阴性(原来阴性),19S-IgM-TP ELISA检测13例均阴性。结论:19S-IgM-TPELISA方法其设备需求较低、方法简单易行、观察结果客观、试剂标准化,敏感性高、特异性强,19S-IgM-TP ELISA方法检测可作为新生儿先天性梅毒的早期确诊依据,有助于早期判断新生儿梅毒治疗疗效观察。     

乙肝患者病毒核酸载量与乙肝病毒外膜大蛋白含量相关性的研究

目的：探讨乙型肝炎患者病毒核酸载量与血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白（HBV-LP）含量的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和实时荧光定量PCR法分别检测307例乙型肝炎患者血清的HBV-LP、HBV-M和HBV DNA,并进行相关性分析。结果：307例乙型肝炎患者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关（r=0.943）;在131份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.42%和93.89%,两者差异无显著性（P〉0.05）;在176份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.02%和56.25%,两者差异无显著性（P〉0.05）。结论：血清HBV-LP水平能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标。     

巨细胞病毒感染患儿尿微量蛋白及尿酶检测的意义

目的 观察婴幼儿感染人巨细胞病毒(HCMV)对肾脏的早期损伤。 方法 分别收集20例健康婴儿、21例HCMV潜伏感染和27例活动性感染婴幼儿尿液标本,用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测尿HCMV-DNA载量;速率散射比浊法测定尿微量清蛋白（MA）和转铁蛋白（Tf）;苦味酸速率法测定尿肌酐（Cr）;速率法测定尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）和γ-谷氨酰转移酶（GGT）的活性。 结果 健康婴儿对照组、HCMV潜伏感染组和活动性感染组间尿液中MA（F=1.740,P>0.05）和Tf（F=0.160,P>0.05）水平差异无统计学意义;活动性感染组尿GGT和NAG活性与健康婴儿对照组、潜伏感染组间差异有统计学意义（P<0.05）;HCMV感染患儿尿GGT、NAG活性与HCMV DNA载量的对数值均无相关性（r分别为0.098和0.201,P均>0.05）。 结论 HCMV感染患儿尿液中GGT和NAG活性的测定有助于临床早期肾损伤的判断。     

抗凋亡基因bcl-2启动子CpG岛的高甲基化状态见于28.3%(13/46例)的膀胱癌患者尿沉淀细胞DNA

目的:检测上海地区膀胱癌患者尿沉淀细胞中3个肿瘤相关基因启动子CpG岛的甲基化谱式异常频率,继而评估其应用前景。方法:采用甲基化特异性PCR方法分析尿沉淀细胞DNA中DAPK1、bcl2和hTERT3个基因的启动子CpG岛甲基化状态,并通过RTPCR方法评估DAPK1基因在膀胱癌细胞系中的表达状态。结果:对膀胱癌细胞系中DAPK1基因的启动子CpG岛甲基化状态及其表达(mRNA水平上)所做的分析,确立了高甲基化状态与表达静息化之间的相关性。对46例临床确诊的膀胱癌患者和84例非膀胱癌对照(包括前46例术后的36例)的尿沉淀细胞中DNA甲基化的分析发现,仅bcl2基因的高甲基化见之于28.3%(13/46例)的膀胱癌患者,而84例的对照中均为去甲基化状态。结论:在美国膀胱癌患者尿沉淀细胞中频发DNA高甲基化的靶点在上海地区膀胱癌患者人群中频率很低,因此寻找在后者中频发DNA高甲基化的新靶点实属必要。     

肺炎支原体RNA和DNA检测技术对儿童肺炎支原体肺炎诊断的价值

目的探讨肺炎支原体(MP)RNA实时荧光核酸恒温扩增检测技术(MP-SAT)与肺炎支原体DNA实时荧光定量PCR(MP-DNA)对儿童肺炎支原体肺炎的诊断价值为临床提供参考。方法选择2016年1月-2017年6月就诊于温州医科大学附属第二医院的80例社区获得性肺炎(CAP)患儿为研究对象,所有患儿均接受MP-SAT和MP-DNA检测,比较两种检测结果与实际诊断的符合情况以及诊断的敏感性、特异性等。结果 80例社区获得性肺炎患儿中,肺炎支原体阳性患儿54例,阴性患儿26例;MP-DNA检测出阳性者41例,阴性39例,其中误诊、漏诊37例,与实际诊断结果的比较,差异有统计学意义(χ~2=4.379,P=0.036);MP-SAT检测阳性者49例,阴性31例,其中误诊、漏诊9例,与实际诊断结果的比较,差异无统计学意义(χ~2=0.681,P=0.409);MP-SAT检测对肺炎支原体感染的诊断敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确率均高于MP-DNA,组间比较差异有显著统计学意义(χ~2=14.388,P=0.000;χ~2=9.774,P=0.002;χ~2=10.780,P=0.001;χ~2=11.999,P=0.001;χ~2=23.921,P=0.000)。通过治疗,MP-DNA及MP-SAT检测阳性率均逐渐下降,但是第14天、第21天两种检测方式的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=4.298,P=0.038;χ~2=12.119,P=0.000),MP-DNA检测阳性率下降缓慢。结论 MP-SAT检测对于儿童支原体肺炎具有更好的诊断敏感性、特异性及准确率。     

改良腹腔镜下脑室—腹腔分流术（附9例报告）

脑室—腹腔分流术是目前脑积水的主要治疗手段，作者2007年1月以来，腹腔镜辅助下脑室—腹腔分流手术9例，并对手术方法略加改进，效果满意。     

温州市区育龄妇女孕前巨细胞病毒感染现状调查

目的了解温州地区育龄妇女孕前人巨细胞病毒（HCMV）感染的状况。方法收集2008年10月至2010年6日参加温州市龙湾区免费孕前优生筛查的妇女血标本2869份,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清HCMV IgG/IgM抗体;HCMV IgM抗体阳性标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测血HCMV DNA载量;HCMV IgG/IgM抗体双阳性标本,采用尿素变性结合ELISA技术检测IgG抗体亲和力指数（AI）。结果 2869份孕前妇女血清中HC-MV IgG抗体阳性检出率为97.77%（2805/2869）,HCMV IgM抗体阳性检出率为0.77%（22/2 869）,IgG/IgM抗体均阳性检出率占0.17%（5/2 869）;22份HCMV IgM阳性标本中,血HCMV DNA阳性检出率为68.18%（15/22）;5份HCMVIgG/IgM双阳性标本中,检出低亲和力IgG抗体1份,中等亲和力IgG抗体2份,高亲和力IgG抗体2份。结论温州市区育龄妇女孕前HCMV IgG抗体阳性率高;对HCMV IgM抗体阳性孕前妇女应进行多指标检测以判断HCMV感染的状态,为减少出生缺陷、做好优生优育服务提供依据。