高糖高脂联合低剂量STZ诱导版纳微型猪2型糖尿病动物模型的建立

目的 用云南版纳微型猪建立一种新的2型糖尿病模型,探讨高糖高脂联合链脲佐菌素(STZ)对糖、脂代谢及肝、肾、胰组织结构的影响.方法 高糖高脂联合低剂量STZ诱导云南版纳微型猪2型糖尿病模型,观察其血糖、胰岛素、血脂的变化,并对其肝、肾、胰组织结构的病理改变进行研究.结果 喂养12月后,与正常对照组比较,模型组空腹血糖值明显升高,血清总胆固醇、甘油三酯水平升高(P<0.05),胰岛β细胞受损,脂肪变性明显,胰岛数量明显减少,胰岛内细胞数目亦减少,胞核浓染、缩小,红染加深;肝脏脂肪样变性,肝细胞索排列紊乱,肝细胞肿胀呈气球样变,肾小球肥大,硬化,肾小球内细胞增多,空泡变性.结论 高糖高脂联合STZ可诱导版纳微型猪发生胰岛素抵抗、糖尿病,既表现2型糖尿病的特征,又表现1型糖尿病的特征,成功模拟了人类2型糖尿病的发病过程.     

循环肿瘤细胞及游离DNA甲基化在肝细胞癌患者中的研究进展

随着对肿瘤认识的不断深入,人们发现在原发肿瘤形成和生长的早期阶段,肿瘤细胞即可以脱离原发肿瘤组织释放到外周血形成循环肿瘤细胞,同样在肿瘤形成的早期阶段就会出现肿瘤细胞的坏死和凋亡,这些凋亡或坏死的肿瘤细胞也可以释放其DNA入外周血形成血浆或血清游离的DNA,因此对肿瘤患者循环肿瘤细胞及游离DNA的分析被认为是实时的"液相活检",肿瘤患者中的循环肿瘤细胞具有非常强的异质性,我们可以根据其物理和生物学性质采用不同的技术对其进行富集和检测;可以借助现代分子生物学手段对循环游离DNA进行提取,并对其遗传学和表观遗传学的异常改变进行分析,这可为肿瘤的早期诊断、疗效评估、复发监测及预后判断提供重要的信息.本文结合本课题组的研究重点,就循环肿瘤细胞及游离DNA及其甲基化在肝细胞癌患者的研究进行综述.     

梅毒疫苗发展的需求、挑战与前景

梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种即梅毒螺旋体（Tp）引起的一种性传播疾病,尽管可被廉价有效的抗生素治愈,但依然在发展中国家流行和发达国家再现,严重危害公众健康。感染性梅毒给全球带来医疗负担,先天性梅毒被认为是影响全球胎儿和新生儿最重要的感染性疾病,梅毒感染还会增加感染和传播艾滋病的风险。全球梅毒的高发和防治该病的失败,使得对梅毒疫苗的需求迫在眉睫。在动物模型中用γ射线致弱的Tp长期免疫动物获得了完全保护,提示了发展梅毒疫苗的可行性及Tp外膜表面成分在诱导免疫保护中的重要性。梅毒适宜发展疫苗用于防治,但实现这一目标前需要解决好参与人员、研究以及市场问题。     

腺瘤性结肠息肉病基因甲基化在肝细胞癌分子诊断中的价值

目的:建立甲基化敏感性限制性内切酶-定量PCR(methylation-sensitive restriction enzyme-quantitative PCR,MSRE-qPCR)方法,并应用该方法探讨血浆腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)基因甲基化检测在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断中的应用价值。方法:用HhaⅠ消化DNA样品,qPCR技术评估酶切效率,建立优化的MSRE-qPCR方法。用MSRE-qPCR法检测45例肝组织(20例HCC及其相应匹配的非癌组织和5例正常肝组织)中APC甲基化水平;应用亚硫酸氢盐测序PCR(bisulfi te sequencing PCR,BSP)对MSRE-qPCR检测结果进行验证,并与甲基化特异性PCR(methylation-specifi c PCR,MSP)检测方法比较。运用MSRE-qPCR技术检测72例HCC、37例肝良性病变和41例健康志愿者血浆标本的APC甲基化状态。结果:建立的MSRE-qPCR方法可定量检测低至1%的APC甲基化片段。MSRE-qPCR和MSP检测结果均显示,HCC组织中APC基因发生高频率甲基化。MSRE-qPCR检测结果经BSP验证准确无误,且与MSP检测结果具有较好的一致性(Kappa=0.955,P<0.0001)。HCC患者血浆APC甲基化水平高于肝良性病变及健康志愿者(P<0.0001)。血浆APC甲基化分析与血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)联合检测可提高HCC诊断效率。结论:MSRE-qPCR可定量检测APC甲基化水平。血浆APC甲基化分析对于HCC的非侵入性诊断具有重要价值。     

血乙型肝炎病毒RNA定量检测在慢性乙型肝炎患者精准诊疗中的价值

目的 评价血乙型肝炎病毒(HBV)RNA定量在慢性乙型肝炎(CHB)患者核苷类似物(NAs)治疗疗效监测中的价值,分析HBV RNA与其他HBV相关指标的相关性.方法 选取169例CHB患者,其中149例NAs抗病毒治疗的患者设为治疗组,20例无抗病毒治疗的患者设为未治疗组,检测所有患者的HBV RNA,并收集同期检测...     

忆我的老师──著名解剖学家高贤华教授

高贤华教授离开我们已经三年了。这位国内外著名的解剖学家，原四川华西医科大学教务长，解剖教研室副主任给我们留下了极深的印象。他的敬业精神及其人文思想仍在不断地影响着我，鼓励着我。在他逝世三周年之际，我特书此文以表达我对高贤华教授的敬佩、谢意和怀念之情。JamesVanFket在他的《成功》一书中写道：成功的管理人员应具备“实事求是，高瞻远瞩”的品德。高贤华教务长正是个实事求是，深谋远虑的校领导者。他开拓进取，锐意改革。他还十分重视对青年学者的培养，鼓励选派优秀的中青年学者出国深造，以期学成归国为祖国的科学事…     

尿沉淀细胞DNA的甲基化谱式分析和膀胱癌的诊断

目的：寻找并评估通过对尿沉淀细胞DNA甲基化分析检出膀胱癌的基因组合。方法：甲基化特异性PCR（methylation specific polymerase chain reaction,MSP）。结果：对3株膀胱癌细胞系进行的20个基因启动子区域CpG岛甲基化状态分析发现,除BRCA1以外其他基因至少在细胞株的1个等位基因呈高甲基化状态。对40例膀胱癌组和3组非膀胱癌对照组的尿沉淀细胞DNA进行了6个基因甲基化状态分析发现,SALL3在膀胱癌组甲基化率为67.5%（27/40）,MT1A为50.0%（20/40）,HPP1为50.0%（20/40）,MYOD1为37.5%（15/40）,BRCA1为32.5%（13/40）,TMS1为5.0%（2/40）。这6个基因在3个非膀胱癌对照组,即非肿瘤性泌尿生殖系统疾病患者23例、脑外科患者6例和正常人群7例均呈去甲基化状态,所以可以受试基因中任一个基因呈现高甲基化状态作为膀胱癌的指征,该法检出膀胱癌的敏感性为90.0%（36/40）。结论：对这5个基因在尿沉淀细胞DNA中甲基化状态的检测可望有效地检出膀胱癌。     

儿童乙型病毒性肝炎病毒携带者血清新蝶呤水平分析

目的研究儿童乙型病毒性肝炎病毒(HBV)携带者血清新蝶呤水平变化及其与HBV复制的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和实时荧光定量PCR法分别检测150例儿童HBV携带者和60名健康儿童的血清新蝶呤水平、HBV DNA载量。结果慢性HBV携带者血清新蝶呤水平明显高于非活动性HBsAg携带者和健康儿童,差异有统计学意义(均P0.05);非活动性HBsAg携带者和健康儿童的血清新蝶呤水平差异无统计学意义(P0.05);血清新蝶呤水平与HBV DNA载量在统计学上无显著相关性(r=0.131,P0.05)。结论在儿童HBV携带者中,慢性HBV携带者比非活动性HBsAg携带者体内更容易引起细胞免疫激活,慢性HBV携带者在随访监测中更应被关注,其血清新蝶呤水平升高能提示病毒复制,但不反映病毒复制活跃程度。     

改良腹腔镜下脑室-腹腔分流术(附9例报告)

脑室-腹腔分流术是目前脑积水的主要治疗手段,作者2007年1月以来,腹腔镜辅助下脑室-腹腔分流手术9例,并对手术方法略加改进,效果满意. 1 资料与方法 全组9例患者,其中男6例,女3例,年龄40～68岁,平均52岁.梗阻性脑积水1例,交通性脑积水8例.脑积水的原因:脑外伤术后6例,动脉瘤夹闭术后1例,高血压脑出血术后1例,脑肿瘤1例.临床症状和体征:表现为不同程度的智力障碍5例,头痛、头晕伴呕吐5例,小便失禁4例,双下肢肌力减退3例.原手术骨窗减压区均膨隆.辅助检查:头颅CT检查7例, MRI检查2例.9例脑室系统均有不同程度扩大,侧脑室周围间质有不同程度水肿.术前均行腰穿检查,其中压力增高5例,正常4例.9例患者脑脊液蛋白浓度均高于正常值.     

儿童巨细胞病毒IgG抗体亲和力指数测定的意义

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)特异性IgG抗体亲和力指数(AI)在儿童HCMV感染诊断中的意义。方法:对150例临床疑似HCMV感染的儿童,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和微粒子酶免化学发光法检测尿液HCMV DNA载量和血清HCMV IgM/IgG抗体;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HCMV IgG抗体亲和力指数(AI)。结果:150例疑似HCMV感染的儿童尿液HCMV DNA阳性检出率为83%(124/150),病毒载量范围为2.67×103～1.31×106copies/mL;血清HCMV IgM阳性检出率为74%(111/150),HCMV IgG阳性检出率为91%(136/150),其中HCMV IgM单阳性检出率为6%(9/150),HCMV IgG/IgM双阳性检出率为68%(102/150);102例HCMV IgG/IgM双阳性标本,AI>60%占71%(72/102),40%≤AI≤60%占6%(6/102)例,AI<40%占24%(24/102)。结论:IgG抗体亲和力指数测定能准确地反映HCMV感染的活动状况,有助于HCMV感染的诊断与治疗。