HBV治疗的基因变异及其检测方法研究

拉米夫定(Lamivudine)是一种慢性乙型肝炎抗病毒治疗新药,具有很强的抑制HBV复制的作用。但由于其抑制病毒复制作用短暂,停药后易于复发,因此需要长期用药,然而长期服药治疗可引起HBV DNA多聚酶活性区核苷酸序列的变异,称为YMDD变异[1]。Nancy[2]报道一组Ⅲ期临床试验,拉米夫定治疗1、2、3和4年后HBV变异率分别为17%、40%、55%和67%,且变异后的HBV对拉米夫定的敏感性下降,对临床疗效也产生了一定影响。因此,选择和建立简便、快速、特异并适合临床应用的实验方法用于检测YMDD的变异,对及时调整治疗方案、合理用药及提高疗效具有重要意义。1.基因变异拉米夫定是一类新的双脱氧核苷类似物,最早开发用于治疗HIV,后来发现他具有抑制HBV复制的作用。拉米夫定在服用后于体内代谢成为拉米夫定三磷酸化物(3TC-TP)。HBV在复制过程中存在前基因组RNA的逆转录过程,3TC-TP在逆转录过程中渗入到新合成的DNA链中,由于其戊糖环为双脱氧硫代呋喃糖环,不具有3‘羟基,不能形成磷酸二酯键,所以可以阻止下一个核苷酸的渗入,达到抑制HBV复制的目的。HBV变异株基因存在突变,此突变主要发生在HBV ...     

儿童过敏性紫癜患者食物特异性IgG抗体检测分析

目的探讨食物特异性IgG抗体与儿童过敏性紫癜的相关性。方法采用ELISA方法检测209例儿童过敏性紫癜患者血清中13种食物特异性IgG抗体。结果 209例过敏性紫癜患儿中有139例检测到1-13种食物特异性IgG阳性升高,总阳性率为66.5%（139/209）;特异性IgG阳性率较高（10%以上）的主要致敏食物有2种,分别为鸡蛋（39.2%）和牛奶（38.8%）;食物特异性IgG浓度分级结果表明,鸡蛋和牛奶均可引起不同程度的食物不耐受,而其余多数食物则以引起轻度不耐受（即IgG浓度为＋1级）为主。统计学分析表明：不同性别患儿食物特异性IgG阳性率无显著性差异（P〉0.05）;7岁以下年龄组患儿食物特异性IgG总阳性率（77.9%）显著高于7-14岁年龄组患儿阳性率（59.8%,P〈0.05）;汉族和少数民族两组患儿食物特异性IgG总阳性率无显著性差异（P〉0.05）,但单种食物IgG阳性率比较发现,汉族患儿鸡蛋特异性IgG阳性率显著高于少数民族患儿（P〈0.05）,少数民族患儿鳕鱼特异性IgG阳性率显著高于汉族（P〈0.05）。结论食物特异性IgG抗体与过敏性紫癜具有密切相关性,食物特异性IgG抗体检测对过敏性紫癜病因诊断将具有重要意义。     

宁夏地区回族苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变分析

目的了解宁夏地区回族苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因的突变构成及特点。方法采用PCR产物直接测序的方法,测定18例回族苯丙酮尿症患儿PAH基因全部外显子及其启动子区域序列。结果在36个PAH等位基因中共检出24个突变等位基因,突变检出率为66.67%(24/36),包括14种突变类型,其中错义突变7种、无义突变4种、缺失突变2种、剪切位点突变1种。较为常见的突变类型有R243Q、R241C、S16fsX10、R111X、L430P,其余突变类型均为散在发生。查阅国外文献、专业网站及数据库发现S16fsX10、Y414X、S303fsX38是世界未见报道的新的PAH基因突变类型,L430P和D222G突变是国内未见报道的新突变。结论研究结果显示宁夏地区回族苯丙酮尿症患儿PAH基因突变表现出多样性、复杂性和特殊性,具有显著的民族特色。     

多重PCR技术在Y染色体微缺失快速筛查中的应用

目的探讨多重聚合酶链反应(PCR)技术在Y染色体微缺失快速筛查中的应用价值。方法以38例健康男性和46例无(少)精症男性外周血淋巴细胞基因组DNA为模板,采用针对Y染色体无精子因子(AZF)4个亚区(AZFa～d)15个序列标签位点(STS)的多重引物进行PCR检测,并以琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物。结果 84例受试者多重PCR检测成功率为100%,且特异性好,扩增效率高。健康男性标本可检出15个STS。患者中检出AZFc+d微缺失1例。结论多重PCR是快速筛查Y染色体微缺失的有效工具。     

强直性脊柱炎患者 TNF-α表达水平测定分析

目的：通过比较强直性脊柱炎（AS）患者与健康人之间 TNF-α的表达差异,探讨其在该病发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定强直性脊柱炎患者和健康人血浆中 TNF-α蛋白含量;荧光定量 RT-PCR 法对外周血单个核细胞中 TNF-αmRNA 表达量进行测定。结果强直性脊柱炎患者血浆 TNF-α含量（26．307±15．737 ng/L）高于健康人（11．147±13．868 ng/L）,P ＜0．05,差异有统计学意义;强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞 TNF-αmRNA 表达量（0．0024±0．0177）显著高于健康人（0．0014±0．0004）,且 P ＜0．05,差异有统计学意义。结论AS 患者 TNF-α表达量高于健康人,是强直性脊柱炎发病机制中一种重要细胞因子。     

脑心通预处理可减轻急性低压低氧诱发的小鼠认知功能损害

目的：探讨脑心通对急性低压低氧诱发的空间记忆功能损害的预防作用及机制。方法：36只小鼠随机分为2组：对照组,给药组;每组包括3个亚组（常压常氧组、海拔4000m组、海拔8000m组,n=6）。比较Y型电迷宫测试成绩及脑组织CAT、SOD、GSH、GSH-PX、MDA及LD的含量。结果：脑心通可以改善低压低氧小鼠的电迷宫测试记忆保持率;提高小鼠脑组织SOD、GSH、GSH-PX和CAT含量（P〈0.01）,而减低了MDA与LD的含量（P〈0.01）。结论：脑心通可减轻急性低压低氧导致的小鼠空间记忆能力下降,其机制与抑制氧化应激反应有关。     

应用PCR技术检测HBsAg携带者血清中HBV DNA

应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增38例HBsAg携带者和58例正常人血清中的HBV DNA特异性片段,通过与HBsAg滴度及HBV血清标志物进行对比分析,发现HBVDNA阳性率与HBsAg滴度呈正相关(r=0.981,P<0.005)与HBeAg减低、抗-HBe产生以及其后的e系统消失过程呈相应递减趋势.并且在单项抗-HBs阳性的血清中,HBV DNA检出率可达10%.     

PCR及其衍生技术在乙型肝炎病毒定量检测中的应用进展

乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）是严重危害人类健康的病毒之一，是重要的肝脏疾病致病因子。目前全世界慢性HBV感染患者至少有3．8亿，我国就占了1．5亿，其中有2000万人为慢性乙肝患者，每年此病死亡的人近50万，     

吸烟对男性精液质量的影响

目的 探讨吸烟对男性精液质量的影响.方法 应用伟力彩色精子质量分析系统对180例不育男性(96例不育吸烟组和84例不育非吸烟者)和112例正常生育男性精液从精液量、液化时间、精子总数、精子密度、精子活力、精子活率等参数方面进行分析.结果 (1)不育吸烟组、不育非吸烟组与正常对照组比较,精子活力、精子活率等参数显著降低(P＜0.05或P＜0.01),液化时间延长(P＜0.05),而精液量、精子密度和精子总数之间无显著性差异(P＞0.05);(2)不育吸烟组与不育非吸烟组相比,精子活力、精子活率显著降低(P＜0.05或P＜O.01);(3)小烟量组和短烟龄组与不育非吸烟组相比,精液各参数之间差异无显著性(P＞O.05).大烟量组和长烟龄组与不育非吸烟组相比,精子总数、精子密度、精子活力和精子活率都显著降低(P＜O.05或P＜0.01),液化时间显著延长(P＜0.01);(4)小烟量组和短烟龄组分别与大烟量组和长烟龄组相比,精子密度、液化时间、精子活力和精子活率等均有显著性差异(P＜0.0 1).结论 (1)吸烟对男性精液质量的不良影响存在量效和时效关系.(2)大量吸烟(日吸烟量＞20支)和长期吸烟者(烟龄＞10年)可能是引起男性不育的重要原因之一.