鳖甲煎丸通过NF-κB信号通路抑制肝癌细胞上皮间质转化的作用机制

目的:研究鳖甲煎丸对转化生长因子-β₁(TGF-β₁)诱导Hep G2细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨其抑制肝癌细胞EMT的作用机制。方法:以Hep G2细胞为研究对象,将细胞随机分为空白组,模型组(10μg·L^-1TGF-β₁),鳖甲煎丸低(10μg·L^-1TGF-β₁+0.55 g·kg^-1鳖甲煎丸)、中(10μg·L^-1TGF-β₁+1.1 g·kg^-1鳖甲煎丸)、高(10μg·L^-1TGF-β₁+2.2 g·kg^-1鳖甲煎丸)组,索拉非尼组(10μg·L^-1TGF-β₁+0.03 g·kg^-1索拉非尼)。用10μg·L^-1TGF-β₁诱导Hep G2细胞发生EMT,构建EMT模型。分别给予相应的含药血清处理后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞增殖情况,分别采用细胞划痕实验,transwell迁移实验检测细胞迁移情况,采用免疫荧光、蛋白免疫印迹法分别检测EMT,核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,TGF-β₁刺激4 d后,细胞呈梭形改变,细胞之间变得松散,间隙增宽,伸出触角,同时E-钙黏素(E-cadherin)蛋白表达降低(P<0.05),N-钙黏素(N-cadherin),波形蛋白(vimentin)蛋白表达升高(P<0.05),说明TGF-β₁刺激4 d成功构建了Hep G2细胞的EMT模型组。与模型组比较,用相应含药血清处理48 h,各用药组均能抑制已发生EMT作用的Hep G2细胞增殖,其中以鳖甲煎丸低、高剂量组最为显著(P<0.01)。与模型组比较,鳖甲煎丸中剂量组E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),磷酸化(p)-p65,N-cadherin,vimentin蛋白表达降低(P<0.05)。与空白组比较,细胞划痕实验和transwell迁移实验表明TGF-β₁增强了Hep G2细胞的迁移能力(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组和索拉非尼组抑制Hep G2细胞迁移能力(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组促进p65,Snail入核表达;与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组和索拉非尼组抑制p65和Snail入核表达。结论:鳖甲煎丸可能通过抑制NF-κB信号通路来抑制TGF-β₁诱导Hep G2细胞的EMT进程、增殖和迁移,从而发挥抗肝癌的作用。     

“药用植物组织培养”实验教学的几点思考和建议

针对药用植物组织培养实验教学中存在的实验内容单一和考核方法片面等问题,提出如何建立特色药用植物组织培养实验教学体系及先基础后应用、综合考评等改进设想,从而有利于激发学生学习兴趣,培养学生独立获取知识和应用知识的能力。     

预设框架质控法在ELISA中的应用探讨

目的 探讨预设框架质控法在ELISA中应用的可行性.方法 查阅同一质控批号ELISA检测的连续20批室内质控测定值,应用即刻法、预设框架质控法和Levery-Jennings (L-J)法分别进行分析,观察其在控、告警与失控情况.结果 案例一:在即刻法中,20次质控测定值中的第6点为告警,其余测定值均为在控;在预设框架质控法中,20次质控测定值中的第6点为失控,第7点为失控,其余测定值均为在控;在L-J法中,20次质控测定值中的第6点为失控,第7点为告警,其余测定值均为在控.案例二:在即刻法中,20次质控测定值全在控;在预设框架质控法中,20次质控测定值中的第22点告警,其余测定结果在控;在L-J法中,20次质控测定值中的第22点为告警,其余测定值为在控.结论 预设框架质控法可以作为ELISA检测的室内质控方法.     

老年女性慢性尿潴留误诊为巨大卵巢囊肿1例

患者,女,59岁,农民。发现下腹部进行性增大的包块4月余来诊。查体:腹部膨隆,如孕5个多月大,下腹部可扪及约24×20cm大小活动性包块,表面光滑,质度中等,有囊性感,近前腹壁,活动以横向为大,纵向较小,轻度压痛,B超检查:下腹部可探及一椭圆形包块,大小为25×18×11cm;上界脐上2cm,下抵耻骨联合,边缘光滑,形态规则,有强回声的薄壁包膜,内为清晰暗区。子宫体积缩小大小为5.2×4.0×2.4cm,形态规整,回声均质,附件及膀胱显示不清,嘱患者排尿后再查,声像图所见无异常改     

缺氧诱导因子-1α对肝星状细胞影响的研究进展＊

肝纤维化是慢性肝病进程中肝脏反复损伤和修复的结果，是以细胞外基质过度累积为主要特征的病理过程。肝星状细胞异常活化是肝纤维化的细胞学基础，其活化受多种因素影响，其中，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）发挥了重要作用。HIF-1α作为机体适应缺氧应激的关键细胞因子，对肝星状细胞的活化、增殖和促细胞外基质形成、促血管新生能力的改变有重要意义。中医药可通过调控HIF-1α的表达以及改善肝脏乏氧微环境减轻肝纤维化的程度，因此HIF-1α有望成为中医药防治肝纤维化的新靶点。本文就HIF-1α的概述、HIF-1α调控肝星状细胞活化、自噬、凋亡等功能以及中医药调控HIF-1α的表达防治肝纤维化等方面作一综述。     

广西先天性甲状腺功能减退症新生儿筛查分析及切值的探讨

【目的】 了解广西地区新生儿疾病筛查促甲状腺素(thyrotropic-stimulating hormone,TSH)水平分布及筛查切值制定; 【方法】 对本区新生儿疾病筛查中心270 590例新生儿TSH筛查结果进行分析,使用百分位数法及ROC工作曲线计算TSH切值,并对不同切值情况下,确诊患者情况进行分析。 【结果】 新生儿疾病筛查TSH水平呈偏态分布,新生儿疾病筛查TSH水平P₅₀为1.89 mU/L,P₉₉为8.13 mU/L;结合ROC曲线结果得出本实验室TSH筛查切值为8.1 mU/L;根据其他方法提供的筛查切值,不同程度漏诊先天性甲状腺功能减退症患儿。 【结论】 不同的切值对筛查结果的影响较大,根据自身实验室实际情况制定适宜的切值是提高筛查质量的重要环节。     

甘肃道地党参生长动态研究

目的:研究党参的生长变化动态及其在不同栽培条件下的干物质消长规律,确定科学合理的田间管理。方法:采用2因素4水平随机区组法进行试验。结果与结论:掌握了党参各生长发育阶段干物质的消长变化规律,不同生长发育时期开始和结束的时间及其生物学特性的变化过程;在栽植密度和施肥量2因素效应下,对茎叶重的增加最具优势的处理组合为密度105万株/hm²和施肥量240 kg.hm^-2,对单根鲜重增加最具优势的处理组合为密度60万株/hm2和施肥量240 kg.hm^-2。有利于党参的规范化生产、产量的提高和质量的稳定。     

甘肃道地黄芪种苗的离体快繁研究

目的筛选出适于无菌短枝快繁的培养基及研究试管苗移栽驯化技术。方法以MS为基本培养基添加不同质量浓度的BA和NAA,对黄芪的不同外植体进行组织快繁研究。结果一年生植株的带芽茎段在MS BA0.1mg/L培养基上短枝长势最好;一年生植株的新生芽和两年生植株的带芽茎段,在MS BA0.8mg/L NAA0.1mg/L培养基上均能产生丛生芽。将短枝接种于1/2MS 0.1%活性炭或1/2MS NAA1.5mg/L 0.1%活性炭的培养基上,经诱导产生有效根。小苗经沙培驯化后,移栽成活。结论利用蒙古黄芪的无菌短枝快繁优良种苗是一种经济、快速、可行的育苗方式。     

鳖甲煎丸通过Wnt/β-catenin信号通路逆转大鼠肝卵圆细胞EMT的机制

目的 研究鳖甲煎丸对转化生长因子-β₁（TGF-β₁）诱导的大鼠肝卵圆细胞WB-F344上皮间质转化（EMT）的影响,探讨其逆转EMT改变的作用机制。方法 将WB-F344细胞随机分为空白组,TGF-β₁模型组（10 μg·L^-1TGF-β₁）,鳖甲煎丸低剂量组（10 μg·L^-1TGF-β₁+0.55 g·kg^-1鳖甲煎丸）,鳖甲煎丸中剂量组（10 μg·L^-1TGF-β₁+1.1 g·kg^-1鳖甲煎丸）,鳖甲煎丸高剂量组（10 μg·L^-1TGF-β₁+2.2 g·kg^-1鳖甲煎丸）,除空白组外,均采用TGF-β₁诱导WB-F344细胞构建EMT模型,分别加入鳖甲煎丸低、中、高剂量含药血清处理细胞,采用细胞划痕实验检测WB-F344细胞迁移能力的改变;使用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）,N-钙黏蛋白（N-cadherin）,波形蛋白（Vimentin）表达的变化;使用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测β-连环蛋白（β-catenin）mRNA表达的改变;使用细胞免疫荧光法检测β-catenin的表达。结果 与空白组比较,TGF-β₁诱导WB-F344细胞4 d,WB-F344细胞间隙从紧密逐渐变得松散,细胞形态由鹅卵石状向成纤维样细胞转变,且E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin蛋白表达升高（P<0.01）,说明成功构建了WB-F344细胞EMT模型。划痕实验结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组WB-F344细胞的迁移能力增强（P<0.01）;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组可以明显抑制WB-F344细胞的迁移能力（P<0.05）。Western blot结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin,Vimentin蛋白表达水平升高（P<0.01）;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin,Vimentin蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组中β-catenin mRNA表达升高（P<0.01）;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组中β-catenin mRNA的表达降低（P<0.01）。细胞免疫荧光结果显示,与空白组比较,TGF-β₁模型组β-catenin在细胞核内荧光表达增强;与TGF-β₁模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组β-catenin在细胞核内荧光表达减弱,且鳖甲煎丸对细胞核内β-catenin抑制作用与其浓度呈正相关。结论 鳖甲煎丸可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,逆转TGF-β₁诱导WB-F344细胞的EMT进程,抑制WB-F344细胞的迁移能力。     

比值法和基因检测G6PD酶活性的对比分析

目的对G6P／6PD比值法和基因两种不同的方法检测G6PD酶活性进行对比分析,评价其准确性和特异性。方法对来我院门诊就诊的G6PD缺乏儿童及新生儿疾病筛查初筛阳性召回的新生儿共91例,用G6W6PG比值法和基因进行G6PD酶活性检测,对这两种方法进行对比分析。结果91例患儿中,比值法检测,G6P／6PG小于正常值75例,正常16例。基因突变检测法,74例被检出存在基因突变,17例未检测到突变。结论两种方法无统计学差异。比值法可作为一种常规的筛查方法,经济实惠,可以推广到基层;而基因确诊费用昂贵,但作为分子水平诊断的方法,能够精确找到突变住点,更有利于指导临床用药,成为今后的发展方向。