细菌自动鉴定仪3例布鲁氏菌误鉴定及文献复习

目的探讨VITEK2 Compact微生物自动鉴定仪对布鲁氏菌误鉴定的原因及局限性。方法 2例无明显诱因发热患者血培养分离菌株,1例左胫骨病变患者骨髓培养分离株。采用VITEK2 Compact细菌鉴定系统、形态学、传统手工生化方法对分离株进行鉴定。采用PCR扩增16S rRNA基因并测序,对所测得的核酸序列进行同源性比对分析。结果 3株缓慢生长的革兰阴性短小杆菌,使用VITEK2 Compact鉴定仪GN鉴定卡首次鉴定为支气管败血鲍特菌(1例)及人苍白杆菌(2例)。基于16S rRNA基因序列分析表明,菌株与马耳他布鲁菌或人苍白杆菌核酸匹配度高达100%,完全排除支气管败血鲍特菌的可能,结合动力试验阴性,排除人苍白杆菌的可能。将保存的菌株用VITEK2 Compact鉴定仪GN鉴定卡复检,结果为马耳他布鲁氏菌。复习文献,发现使用一些商业的细菌鉴定系统产生布鲁氏菌被错误鉴定的案例时有发生。布鲁氏菌可被误鉴定为苯丙酮酸莫拉菌(以前为苯丙酮酸冷杆菌)或解脲寡源杆菌(API20NE系统,法国生物梅里埃,Marcy-I′Etoile,France,人苍白杆菌(API20NE系统,快速NF Plus系统,Innovative Diagnostic Systems Inc.,Atlanta,USA),流感嗜血杆菌生物IV型,莫拉菌属(MicroScan panels Siemens Healthcare Diagnostics Inc.,West Sacramento,CA,USA),动物溃疡伯格菌(MicroScan Walk-Away system using MicroScan NegCombo Type44panel)。结论 16SrRNA基因序分析是鉴定临床缓慢生长的革兰阴性杆菌的有效手段,微生物自动鉴定仪鉴定缓慢生长细菌(如布鲁氏菌)有明显局限性,对布鲁氏菌病等传染病的临床治疗及流行病学调查可产生误导。建议细菌鉴定系统生产厂家应该完善其数据库中专家系统,当细菌鉴定系统报告为人苍白杆菌、解脲寡源杆菌、苯丙酮酸莫拉菌、支气管败血鲍特菌、动物溃疡伯格菌、莫拉菌属或流感嗜血杆菌生物IV型等少见菌种时,应该在鉴定仪器专家系统中提示需与布鲁氏菌鉴别,有效预防布鲁氏菌引起的实验室获得性感染。有关上述非常见菌感染的文章中若仅有常规细菌鉴定而无分子生物学鉴定的案例,建议慎重报道。     

肾移植术后肺部感染致急性呼吸窘迫综合征临床救治

目的 探讨肾移植术后肺部感染引发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的临床救治.方法 对2004年～2005年入住该科RICU的12例肾移植术后并发肺部感染致ARDS患者临床表现,胸部X线,病原体特点及救治经过进行回顾性分析.结果 全部患者表现为发热、咳嗽、咳少性黏痰,进行性呼吸窘迫,严重低氧血症.X线以双肺约会温性斑片状,磨玻璃样改变为主,严重者发展为"白肺".病原体以巨细胞病毒,细菌,真菌为主.经抗病菌,抗真菌三联治疗,呼吸机辅助通气以及CRRT治疗抢救成功4例,死亡4例,由于经济原因放弃治疗4例.结论 肺部感染致ARDS是肾移植术后患者的主要死亡原因.尽早使用高效广谱抗生素和抗病毒,抗真菌治疗结合呼气未正压通气,及CRRT治疗是抢救成功的关键.     

鲍曼不动杆菌检出率、耐药性变迁与用药量关系分析

目的:分析沈阳军区总医院2005～2008年4个年度间鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Aba)检出率及耐药性变迁规律,主要药物用量与酎药率变化之间的关系,为有效控制Aba感染率及耐药性不断上升的研究提供流行病学资料.也为临床医生用药提供指导.方法:统计本院2005年1月～2008年12月临床送检标本中Aba检出率、耐药率、抗生素用量并分析三者间相互关系.结果:Aba菌株检出率2005、2006年度<3%,接下来的2个年度迅速上升到8.6%和15.7%;期闻Aba对常用药物的耐药率逐年上升,2008年的敏感率已下降到30%以下:碳青霉烯类药物在2005、2006年度保持95%以上的敏感率.2007年开始,其敏感性急剧下降,2008年敏感率只有30%:对Aba最有效的药物为头孢哌酮/舒巴坦,其敏感性也从2006年度的91.4%下降到了2008年度的47.2%.随碳青霉烯类药物用药频度的增加,Aba对该类药物的耐药率在2年中无明显变化,累积2年后Aba对其耐药率急剧升高.4年中,左氧氟沙星、头孢吡肟用药频度与耐药率有相同的变化趋势;头孢他啶、阿米卡星用药频度下降,但耐药率依然呈上升趋势.结论:Aba的临床检出率和耐药率上升呈一致性趋势:不同药物之间相互诱导耐药的机制在临床实践中应予足够的重视,制定临床抗生素用药策略如抗生素交替使用以达到降低细菌耐药目的情况下,应充分考虑到不同类型药物之间的诱导耐药现象.     

美罗培南非敏感多重耐药肺炎克雷伯菌败血症临床治疗结果分析

目的评估可疑产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌多重耐药菌株败血症抗生素治疗方法。方法收集2011年10—11月本院术后感染发热患者（男9例,女9例）分离的肺炎克雷伯菌,常规药敏试验测定菌株最小抑菌浓度（MIC）,改良Hodge法检测碳青霉烯酶,回顾性分析患者临床资料。结果18株KPN为多重耐药菌株,耐药表型对所有三代头孢菌素耐药,对四代头孢菌素头孢吡肟敏感或中介;碳青霉烯酶试验阳性,产金属β-内酰胺酶（MBLs）试验阳性。药敏试验回报前经验用药抗菌治疗;药敏结果报告后,3例患者药敏结果显示经验用药药物敏感,继续用该药治疗,抗菌治疗7—12d;2例患者合并念珠菌感染;其余13例患者,在药敏结果报告后改用亚胺培南／西司他丁钠,治疗3—5d后,白细胞计数、体温即恢复正常。结论对于临床可疑产碳青霉烯酶的多重耐药KPN菌株感染,临床是否可以继续使用该类药物治疗,药敏试验结果仍是主要依据,与碳青霉烯酶（可降解碳青霉烯类药物）的产生与否无直接关系。     

耐碳青霉烯的多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的调查沈阳地区多重耐药鲍曼不动杆菌（Multi—drug Resistant Acinetobacter Baumannii,MDR—Aba）的同源性,了解是否存在该类耐药株的克隆流行。方法收集2007年10月-2008年12月沈阳军区总医院住院患者临床分离出的MDR—Aba40株。用K—B纸片扩散法检测其对临床常用抗生素的敏感性,用脉冲场凝胶电泳（Pulsed—field gel electrophoresis,PFGE）对所选菌株进行分子分型。结果脉冲场凝胶电泳结果显示,40株MDR—Aba茵株分为A,B,C三个型,其中A型包括A1（28株主要分布于呼吸、神经外、急诊、心外等8个病区）,A2（2株,分布于呼吸、急诊病区）,A3（6株,分布于神经外、呼吸等病区）三个亚型;B型、C型各2株,主要分布于急诊病区。结论调查期间该院部分科室有A型MDR—Aba菌株克隆流行,主要为A1型,同时有少量的A2,A3亚型;偶见B型、C型。可见及早采取有力的院内感染防控措施,是防控耐碳青霉烯MDR—Aba暴发流行的当务之急。     

PCR-HRM方法快速鉴定布鲁氏菌的初步应用

目的 本研究旨在建立准确、快速地鉴定布鲁氏菌菌种及生物分型的PCR-HRM(高分辨率熔解曲线)方法。方法 根据目的基因序列,参考文献合成6对基因扩增引物(1对布鲁氏菌属特异引物,5对种间特异引物),应用PCR-HRM方法鉴定布鲁氏菌属6个种19个生物型的标准菌株,并初步应用到临床分离的35株布鲁氏菌中。结果 采用布鲁氏菌属特异引物(Bspp),6个种19个生物型的标准菌株均扩增出同样形状的溶解曲线,与其它对照菌株的曲线不同;采用5对种特异引物,6个种的标准菌株均有特征性PCR-HRM曲线;临床分离的35株布鲁氏菌的PCR-HRM曲线与羊种布鲁氏菌标准菌株的一致。结论 该研究采用的PCR-HRM分析方法,获得了布鲁氏菌属及6个种标准菌株的不同曲线图,可准确鉴定临床分离的羊种布鲁氏菌,可用于临床微生物实验室疑似布鲁氏菌感染的初步鉴定。     

布氏杆菌感染1例

1病例报告患者女,43岁,某乳制品厂清洁工。无明显诱因发热2月余,伴全身乏力、关节痛,遂来我院血液科就诊。查体:体温37.8℃,脉搏82/min,血压110/70mmHg。实验室检查:白细胞5.58×109/L,中性0.48,淋巴0.40,血红蛋白117g/L,血小板224×109/L,丙氨酸氨基转移酶29U/L,天冬氨酸氨基转移酶21U/L,血沉20mm/h。无菌抽取静脉血8ml加入普通需氧血培养瓶中,置于Bact/Alert3D血培养仪中震荡培养。3天后仪器报警阳性,分离至血平板及巧克力琼脂平板于35℃孵箱中培养。48h后长出表面光滑、湿润的小菌落,染色为革兰阴性球杆菌。生化反应:氧化酶和触酶阳…     

肠球菌耐药性分析及耐万古霉素基因检测

为调查沈阳军区总医院2009年7月～2010年7月年度内肠球菌耐药性,对耐万古霉素肠球菌(VRE)进行耐药基因型研究,以期为临床治疗及院内感染控制提供实验室资料。依据2008年美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的微量稀释法(MIC)对肠球菌及VRE进行药敏试验,E-test法检测VRE的最小抑菌浓度;PCR方法检测万古霉素的耐药基因。研究年度内共分离屎肠球菌89株,粪肠球菌55株。结果表明,屎肠球菌对氨苄西林、青霉素、喹诺酮类药物耐药率均超过90%,对高浓度庆大霉素的耐药率也超过了70%;粪肠球菌耐药性较低,对氨苄西林、青霉素等耐药率不到30%。检出3株VRE,2株为屎肠球菌,1株为粪肠球菌。耐药表型分析表明,2株屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁均高度耐药,MIC>256 mg/L,且合并耐青霉素类、氨基糖甙类药物,对四环素耐药性也显著下降,仅对氯霉素、利奈唑胺敏感。耐药基因检测表明,2株VRE耐药基因为VanA。结论:屎肠球菌耐药性高于粪肠球菌,临床分离率也较粪肠球菌高。VRE对多种抗菌药物耐药,临床治疗可选择药物少,需加强院内感染控制,防止耐药菌株的扩散。