LBP对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的调节作用

目的 采用脂多糖结合蛋白(LBP)和脂多糖(LPS)以不同比例、不同方式刺激THP-1细胞分泌细胞因子,探讨LBP在LPS转运和活化过程中的调节作用,以及单核巨噬细胞受LPS活化后其炎性和负炎性因子分泌的平衡情况.方法 将THP-1细胞进行增殖和传代后,经PMA刺激,转化为巨噬细胞.实验分为4个组:LPS组(用不同浓度LPS单独刺激)、LBP组(用不同浓度LBP单独刺激)、LBP/LPS预孵育组(LBP和LPS以不同浓度比例混合,37℃孵育15min)、LBP/LPS不孵育组(先加一定浓度LPS,再以不同浓度比例加入LBP).分别培养4、12、24h后,吸出上清液,发光法检测TNF-α,IL-10和IL-6水平,并进行统计学分析.结果 THP-1细胞为悬浮生长,用PMA诱导转化后变为巨噬细胞,变为贴壁生长.分别用1、10、100、1000ng/ml LPS单独刺激巨噬细胞分泌TNF-α,1ng/ml和其他组间均有统计学差异(P<0.05),其余3组间无统计学差异(P>0.05).用LBP刺激巨噬细胞,LBP浓度为1000ng/ml时,TNF-α和IL-6分泌达到最高.LBP/LPS不孵育组中,TNF-α和IL-6分泌曲线在LBP/LPS为10出现最高峰.LBP/LPS预孵育组的TNF-α和IL-6分泌曲线较平缓,无明显分泌高峰.LPS浓度为1000ng/ml时IL-10为8±0pg/ml,其余组IL-10均小于5pg/ml.经析因分析,LPS和LBP之间有交互关系(F=3.425,P<0.01),两者是否预孵育和培养时间有交互作用(F=4.240,P=0.026),LBP浓度和是否预孵育之间有交互作用(F=4.896,P<0.01).LPS浓度和是否预孵育,LPS浓度和培养时间,LBP浓度和培养时间均无明显交互作用(P>0.05).结论 LPS是活化单核巨噬细胞的重要物质,LPS在高浓度时刺激巨噬细胞分泌细胞因子具有饱和现象.LBP本身在高浓度时具有刺激巨噬细胞的活性,低浓度的LBP能增强LPS对巨噬细胞的活化,高浓度LBP则起到负性调节作用.体外单核细胞经PMA分化成巨噬细胞后,再用LPS刺激,IL-10无明显分泌,引起炎性和负炎性因子的严重失衡.     

腹腔镜下前列腺癌根治性切除术围术期加速康复外科方案的构建

目的 构建适合我国护理实际的腹腔镜下前列腺癌根治性切除术(laproscopic prostatectomy,LP)围术期加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)方案.方法 系统检索国内外关于外科手术围术期ERAS的相关文献及指南,采用JBI证据等级与质量评价方法对其评定...     

经脐单孔腹腔镜下肾癌根治术的护理体会

目的探讨经脐单孔多通道腹腔镜手术治疗肾癌的护理要点。方法回顾性分析并总结2008年9月至2011年1月在第二军医大学长海医院行经脐单孔多通道腹腔镜下肾癌根治术的24例患者的临床资料,术前护理重点主要是做好心理护理及各项准备;术后护理重点是注意病情观察,除按常规护理之外,应加强监测健侧肾脏功能,预防并发症,并给予出院指导。结果本组24例患者均痊愈出院,无术后并发症发生。结论根据患者的疾病特点及手术方式,采取积极有效的围术期护理,有效落实相关健康知识宣教,是促进患者康复、提高护理质量的重要保证。     

藻红蛋白对人结肠癌SW-480细胞凋亡的诱导作用

目的研究藻红蛋白(PE)对人结肠癌SW-480细胞凋亡的诱导作用。方法采用MTT法检测PE对SW-480细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测PE对SW-480细胞凋亡的影响。采用激光共聚焦显微镜Annexin V-FITC/PI双荧光染色观察藻红蛋白作用后SW-480细胞的变化。结果 PE对SW-480有较强的生长抑制作用,并呈剂量-效应关系(r=0.87,P<0.01),当PE剂量为40μg/mL,作用时间48 h时,其对SW-480细胞的抵制率达54.01%,IC50值为34.32μg/mL。结论 PE对SW-480细胞有较强的抑制作用,可以诱导其凋亡。