鼠源性JEV-McAh用于快速诊断及免疫治疗的实验研究

本文综合报道了本室近年来在鼠源性JEV-McAb用于快速诊断及免疫治疗方面的研究结果。(1)应用淋巴细胞杂交瘤技术建立了6株稳定分泌JEV-McAb杂交瘤细胞系,并鉴定了它们的生物学和免疫学特性;(2)建立了用单抗快速检出JEV抗原、抗体及免疫复合物的方法;(3)对3株有中和活性     

水中脊髓灰质炎病毒细胞感染模型中病毒株与细胞株的筛选

目的：根据5种细胞系对脊髓灰质炎病毒1型（PV1）5个毒株的敏感性筛选适用于病毒消毒实验的病毒株和细胞系．方法：比较各毒株在不同细胞系中增殖3d～7d后的细胞病变作用（CPE）、半数组织培养感染里（TCⅡ）50）、蚀斑计数（PFU）及免疫印迹（DIBA）试验结果．结果：CPE与TCID）检测表明，同一细胞系Hep2和Hela中病毒感染细胞作用强弱为Henan，Hebei＞Brunhide，Mahony＞Sabin株；不同细胞系对同一病毒株的敏感性为Hep－2＞BGM＞Hela,Vero＞RD细胞．DBA检测提示，Henan株较Brun－hide更易检出．结论：Henan株及Hep－2细胞可作为PV消毒实验所用的病毒和细胞．     

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎患者的初步研究

将抗日本乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)的单克隆抗体(McAb)2H_4、2F_2、mC_3三种腹水等量混合后,制备成IgG或其F(ah′)_2。用0.3/0.15μm的微孔滤膜过滤除菌。经小白鼠体内急、慢性毒性试验,家兔体内发热试验,无菌试验,与人体重要脏器的交叉试验以及DNA测定等鉴定证实,该制剂安全可靠,适合于人体内注射应用。在小白鼠。幼山羊及恒河猴实验性治疗研究,证实有效的基础上,对临床症状典型,抗JEV-IgM抗体阳性的两个乙脑患儿,进行了探索性治疗:发现疗效良好,观察三月余,无异常反应。     

脂质体对JEV－E糖蛋白的佐剂作用研究

目的：观察脂质体对日本脑炎病毒Ｅ糖蛋白的佐剂作用；方法：利用改进的振荡法，使亲和层析提取的日本脑炎病毒Ｅ糖蛋白包裹于脂质体中，制备出脂质体－Ｅ蛋白结合物，并分组免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；通过ＥＬＩＳＡ，血凝抑制试验（ＨＩ）和中和试验（ＮＴ）等指标观察．结果：脂质－Ｅ蛋白免疫组的特异性抗体水平明显高于游离Ｅ蛋白组；在两批病毒攻击保护性试验中，前者保护率分别为５０％和５７％，后者分别为３８％和３０％．结论：脂质体对日本脑炎病毒Ｅ糖蛋白有明显的佐剂作用．     

产生流行性乙型脑炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立(简报)

自从Kohler和Milstein(1975年)首创淋巴细胞杂交瘤技术制备特异性单克隆抗体以来,该技术发展迅猛,已渗透到生物医学的各个领域,在病毒学中也得到了广泛应用。目前已制备出流感病毒、付流感病毒、腺病毒、麻疹病毒、单纯疱疹病毒、疱疹性口炎病毒、SV_(40)病毒、EB病毒、呼肠病毒及HBsAg等的单克隆抗体,用于这些病毒的抗原分析及实验诊断将     

Concentration and Purification of Japanese Encephalitis Virus from Infected Mouse Brains

A suspension was prepared from the infant mouse brain in-fected by JEV.It was clarified by centrifugation.Protamine sulfatewas added to the supernatant with a final concentration of 5 mg/ml,and the contaminated protein was removed.The recovery of HAand infectivity was 66% and 55% respectively.The supernatant was concentrated by differential centrifugationand purified by rate zone centrifugation in sucrose density gradientwith recovery of 29% of HA and 37% infectivity.The purificationfactors(PF)were 138 for HA and 175 for infectivity.SHA without any infectivity were found on the top of gradientcolumn.The immunological characteristics of the componentsawait further studies.     

水中脊髓灰质炎病毒感染性、抗原性及核酸指标检测方法的评价研究

目的：建立水中脊髓灰质炎病毒1型（PV1）感染性、抗原性及核酸检测指标并比较三种指标的优缺点．方法：分别用蚀斑计数（PFUA）、免疫印迹（DIBA）和逆转录PCR（RT－PCR）三种方法检测病毒感染性、抗原性和核酸片段完整性，并比较各方法的敏感性和特异性．结果：RT－PCR对PV1有株特异性，DIBA则对PV1有型特异性，而PFUA对PV1无型间及株间特异性；PFUA，RT－PCR和DIBA对PV1Henan株（105TCID50／mL）最低检出稀释度分别为5×10-5，5×10-5和1×102．结论：PFUA有较高的敏感性，但存在缺乏特异性，sd～7d的检测时间及因需细胞培养造成的不易操作、高经费支出等缺陷．DIBA虽有型特异性，但敏感性差，目因靠肉眼判断结果判定误差大．RT－PCR结果快速、特异、敏感、操作简便、省时省力．     

鼠源性单克隆抗体在乙脑患者体内动态的初步观察

１５名西安地区乙脑患者，平均年龄３岁．在患者志愿接受鼠源性ＭＣＡｂ治疗，以及ＭｃＡｂ制剂严格按照质控标准制备的前提下，静脉一次给予５ｍｇ鼠源性乙脑ＭｃＡｂ。于给药后当时、第３天、第７天、第１０天及第１４天分别来血，测其ＭＣＡｂ浓度和有无抗鼠ＩｇＧ抗体产生。结果显示给药后当时血中ＭｃＡｂ浓度为１μｇ／ｍｌ，血中浓度半衰期为４天；到第１０天体内ＭｃＡｂ为０．０１μｇ／ｍｌ。１５例患者中有２例在第７天产生抗抗体，１例在第１０天，１例在第１４天测到抗抗体．其余１１例在第１４天仍未测到抗抗体产生。     

ELISA测定乙脑患者血清抗体的初步观察

本文通过实验条件的选择,建立了检测流行性乙型脑炎(以下简称乙脑)血清抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,初步应用于乙脑的临床诊断,并和血凝抑制试验(HIT)、补体结合试验(CFT)进行了比较。 一、实验条件及方法 (1)所用乙脑病毒抗原曾试用过补体结合抗原、