紫外分光光度法测定全血胆碱酯酶活性测定试纸中溴化乙酰胆碱含量方法的建立

目的 建立紫外分光光度法测定全血胆碱酯酶活性测定试纸（简称测酶试纸）中溴化乙酰胆碱含量的方法,并验证该方法的可行性。
方法 利用溴化乙酰胆碱和溴百里香酚蓝（测酶试纸的两种主要成分）的溶解性差异,将测酶试纸中的溴化乙酰胆碱洗脱下来,以浓度为2.8、5.6、8.4、11.2、14.0 mmol/L的溴化乙酰胆碱对照品溶液制作测酶试纸中溴化乙酰胆碱含量测定方法的标准曲线,并对该法的标准曲线线性、准确度、精密度、耐用性及回收率进行验证。
结果 该方法的标准曲线线性良好,线性相关系数的平均值为0.999 79。该法的准确度、精密度和耐用性良好,批内和批间相对标准偏差均不超过4%,加样回收率在94.90%~106.22%之间。
结论 该方法可用于测定测酶试纸中溴化乙酰胆碱的含量。
     

F344大鼠4种饮用水饲养2年实验病理学观察

目的观察F344大鼠在自然生存状态下常年饮用天然矿泉水、自来水、纯净水和矿物质水等4种饮用水对其生存寿命、疾病发生率、死亡率等指标的影响,为GLP条件下动物饲养用水选择和动物自发病变的研究提供背景数据。方法 SPF级8周龄F344大鼠336只,雌雄各半,随机分为4组,分别饮用天然矿泉水、自来水、纯净水和矿物质水4种饮用水,每组84只动物。实验开始后第6个月、12个月、18个月和24个月每组分别活杀8、16、16和44只动物,称重动物心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、肾上腺、睾丸（或卵巢）、附睾（或子宫）和脑等脏器并计算脏器系数,常规病理学取材、制片后显微镜检查,比较各组动物在4个时间点发生病变的类型和发病率。结果各组动物发病以F344大鼠常见的自发性病变为主,包括非增殖性病变和增殖性病变。主要的非增殖性病变包括心脏乳头肌纤维化,肺细支气管旁慢性炎症,肾脏肾小管扩张、蛋白管型、肾小管萎缩和钙沉积等,生殖器官退行性改变等;高发的肿瘤性病变主要包括睾丸间质细胞瘤、垂体腺瘤、单核细胞白血病、皮下纤维瘤、乳腺纤维腺瘤、嗜铬细胞瘤等。各组动物上述病变类型及发病率、生存时间、死亡率等指标比较均未见明显差异。结论天然矿泉水、自来水、纯净水和矿物质水等4种饮用水对F344大鼠生存时间、死亡率、自发病变类型与发生率没有影响。本研究为了解不同饮用水对实验动物的影响提供了参考,丰富了F344大鼠自发病变的病理学数据积累。     

全氟异丁烯对小鼠肺组织巯基的影响

目的 观察全氟异丁烯（perfluoroisobutylene,PFIB）吸入性急性肺损伤（acute lung injury,ALI）发病过程中,肺组织内巯基的变化情况。方法 采用动态吸入PFIB周身暴露装置染毒小鼠,Ellman试剂法检测PFIB染毒前后小鼠肺组织内巯基（总巯基、蛋白巯基和非蛋白巯基）的含量变化。结果 染毒后,小鼠肺组织中非蛋白巯基（主要是还原型谷胱甘肽）含量与正常动物相比显著性的逐渐升高。结论 氧化性损伤可能不是PFIB吸入性肺损伤发病过程中主要的致病因素。     

TFPI-2／KD1的克隆表达及其生物学性质研究

目的克隆表达人组织因子途径抑制物-2（hTFPI-2）Kunitz结构域1（KD1）基因。方法提取健康女性正常分娩胎盘中总RNA，采用RT-PCR法合成hTFPI-2全长cDNA后行PCR扩增，以扩增得到的hTFPI-2／KD1基因片段与原核表达载体pET22b进行连接并转化E-coli DH5α，获得重组质粒pET22b-hTFPI-2／KD1。将重组质粒pET22b—hTFPI-2／KDI转化至E-coli BL21，获得重组菌株E-coli BL21[pET22b-hTFPI-2／KD1]。以异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，对表达产物进行SDS—PAGE和蛋白质印迹分析，并利用Ni^2＋NTA柱进行亲和层析纯化，采用发色底物法和明胶酶谱法分别检测hTFPI-2／KDl抑制胰蛋白酶和基质金属蛋白酶（MMP）的活性。结果核酸序列测定显示克隆的hTFPI-2／KD1基因序列与理论序列相符。SDS-PAGE和蛋白质印迹分析显示E-coliBL21[pET22b-hTFPI-2／KD1]诱导表达产物相对分子质量与预期相符，经纯化后获得了完整的hTFPI-2／KD1蛋白，发色底物法和明胶酶谱法检测显示其具有抑制胰蛋白酶、MMP-2和MMP-9的活性。结论通过原核表达系统成功获得高效表达并具有生物活性的hTFPI-2／KD1，为进一步研究其功能奠定了基础。     

氯沙坦钾对全氟异丁烯吸入性急性肺损伤的影响

目的探讨肾素-血管紧张素系统（renin—angiotensinsystem,RAS）中血管紧张素1I（angiotensinll,Angll）在全氟异丁烯（perfluoroisobutylene,PFIB）吸入性急性肺损伤（acutelunginjury,ALI）中的作用。方法使用全身暴露PFIB染毒装置对CDl小鼠实施染毒,采用Anglll型受体（anglll-typereceptor,ATl）特异性抑制剂氯沙坦钾作为工具药,以肺系数、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid,BALF）总蛋白含量及72h内存活率为观察指标,评估ATl受抑制状态下肺损伤情况。结果与结论在PFIB染毒前0．5h、染毒后0．5h、1h经腹腔注射方式给予实验CDl小鼠氯沙坦钾（40mg／kg）,虽然对各项ALI指标均有一定的改善趋势,但并不能起到显著的防治效果。以AngII为主要成分的RAS可能并不参与PFIB吸入性急性肺损伤早期炎症反应的扩大过程。     

毒物战的现实威胁

2002年,一份美国空军发起的关于毒物战争的研究报告引起了美国军方和平民灾难应急救援组织的关注。该报告通过对在战争中恶意使用有毒工业化学物质的历史事件的回顾,提出了毒物战（ toxic warfare ）的概念,并讨论了它对美国军事和国土安全的影响。该文综述了毒物战的历史及其对美国军事和国土安全的影响,分析了我国面临的毒物战威胁,并就应对毒物战威胁提出了若干启示。     

F344大鼠自发性肿瘤的病理学观察

目的积累本中心F344大鼠自发肿瘤背景数据,为开展新药诱癌试验做准备。方法SPF级F344大鼠336只,雌雄各半,体重180-200g,本中心屏障环境下饲养,随机分为4个组,即分别于6、12、18和24个月4个时间点处死动物32、64、64,176只,称量动物心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、胸腺、脑、睾丸（或卵巢）和附睾（或子宫）等器官并计算脏器系数,常规病理学取材制片后显微镜检查,观察统计4个时间点动物自发性肿瘤的类型和发病率。结果高发的肿瘤性病变主要包括睾丸间质细胞瘤、垂体腺瘤、单核细胞白血病、皮下纤维瘤、乳腺纤维腺瘤、嗜铬细胞瘤等。结论本实验结果丰富了现有F344大鼠自发性肿瘤的发病数据,为开展新药诱癌试验提供了背景资料。     

大耳白兔急性吸入全氟异丁烯肺影像表现

目的 利用CT和胸部平片技术开展全氟异丁烯(PFIB)吸入性肺水肿的早期诊断研究。方法 采用自制的大耳白兔头部暴露染毒装置进行大耳白兔PFIB急性暴露染毒,实验设计两个暴露条件,即PFIB 300 mg·m^-3,20 min,和PFIB 300 mg·m^-3,25 min。采用美国贝尼600 ma高频（100 kHz）常规Ｘ线机和美国柯达CR800计算机影像处理系统,常规拍摄胸部平片。采用西门子16排螺旋CT,进行常规CT扫描,层厚5 mm。结果 暴露前兔CT扫描显示：双肺容积如常,肺纹理清晰,双肺野未见异常密度影。在PFIB 300 mg·m^-3 20 min暴露条件下,兔CT扫描显示：至暴露后18 h,左肺中野外带呈现片絮状及毛玻璃样改变;21 h,左肺片絮状影较18 h减轻;24 h,范围缩小,密度增高;48 h,范围进一步缩小,密度进一步增高,余肺野未见异常改变。在PFIB 300 mg·m^-3 25 min暴露条件下,兔CT扫描显示：至暴露后6 h,右肺中野外带呈现淡薄云雾状影,9 h,右肺中野外带出现斑片状毛玻璃样影,余肺野未见异常,右肺毛玻璃样影进行性扩大,至15 h时全部呈现毛玻璃样改变,于暴露后17 h死亡。暴露前兔胸部平片结果显示：双肺容积如常,肺纹理清晰,双肺野未见异常密度影。在PFIB 300 mg·m^-3 20 min暴露条件下,兔胸部平片显示：至暴露后24 h,双肺中内带见少量小点片影,至暴露后48 h,表现为小点片影吸收。在PFIB 300 mg·m^-3 25 min暴露条件下,兔胸部平片显示：至暴露后3 h,可见双肺内带条片状影;至6 h,双肺内带条片状影较前增多;至暴露后12 h,双肺透光度降低;暴露后15 h,双肺中外带呈现毛玻璃样改变,提示出现肺泡性肺水肿;至暴露后17 h,双肺呈“白肺”样,均匀实变影。结论 及早对中毒患者进行影像学监测将有助于早期发现中毒患者,利于中毒患者的救治。