人骨髓间充质干细胞体外分化为雪旺样细胞的方法

目的 :建立人骨髓间充质干细胞体外向雪旺样细胞定向诱导分化的方法。方法 :取健康人骨髓血标本 ,利用percoll(密度为 1.0 73 g·ml-1)分离骨髓单个核细胞 ,在DMEM LG + 10 % (体积分数 )FBS中培养 ,通过流式细胞术对培养细胞进行表型测定 ,对第 2、3、5、8代间充质干细胞进行定向诱导分化 ,用单抗S 10 0、神经胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillargacidicprotein ,GFAP) ,通过免疫组化方法对诱导的细胞进行鉴定。 结果 :经 percoll分离的间充质干细胞可传 16代 ,细胞数增加了大约 6× 10 7倍。流式细胞术结果显示 :percoll分离出来的未经培养的细胞 ,其CD2 9+CD4 4 +CD3 4 -CD4 5 -细胞数为 3 2 .4 7%± 3 .4 9% ,而培养后贴壁细胞中CD2 9+CD4 4 +CD3 4 -CD4 5 -细胞数为 94 .3 8%± 1.5 0 %。诱导后免疫组化染色结果显示 :由 β ME +bFGF预诱导、β ME +bFGF诱导的S 10 0阳性细胞最多 ,可达 90 %± 4 % ,GFAP阳性细胞为 2 1%± 5 %。结论 :人骨髓中间充质干细胞能定向诱导分化成雪旺样细胞。     

鸡胚股骨无血清培养研究软骨形成和骨形成

为探讨软骨形成和骨形成的作用机制，用孵化14天鸡胚股骨进行无血清培养，对其细胞增殖分化和基质矿化情况进行观察。结果显示：股骨在培养期间长度增长，骺端增大。软骨细胞、成骨细胞增殖分化成熟;成骨细胞分泌基质小泡和类骨质，并有奶盐沉积。提示鸡胚股骨在无血清培养条件下，可在体外进行软骨形成和骨形成，此模型可用来进行骨形成研究。     

腰穿放液治疗160例外伤性蛛网膜下腔出血的体会

目的：探讨腰穿放液对外伤性蛛网膜下腔出血的作用。方法：对１６０名外伤性蛛网膜下腔出血的病人行腰穿放液，少则２次，多则７次。结果：所有病人症状均好转，从脑脊液的力学上看脑脊液恢复正常性状的时间缩短，结论：腰穿放液治疗外伤性蛛网膜下腔出血是十分有效的方法，近期内临床症状明显改善，远期并发症减少。     

血管紧张素Ⅱ受体—1在清醒大鼠血压波动性调节中的作用

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体－１（ＡＴ１受体）在清醒ＷＫＹ大鼠和自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血压波动性（ＢＰＶ）调节的作用。方法：应用计算机化清醒自由活动大鼠血流动力学监测技术，分别观察了：（１）静注新型非肽类ＡＴ１受体拮抗剂Ｌｏｓａｒｔａｎ（Ｌｏｓ）；９２）静注神经节阻断剂氯异朵铵；（３）静注Ｃｈｌｏｒ和Ｌｏｓ；（４）静滴血管紧张素Ⅱ（ＡＮＧⅡ）及静注Ｃｈｌｏｒ后静滴ＡＮＧⅡ对ＷＫＹ大鼠和ＳＨＲ血压     

人促红细胞生成素在大肠杆菌中融合高表达：稀有密码子对外源蛋白翻译速率的影响

本实验分别用两种融合表达载体（ｐＧＥＸ－２Ｔ及ｐＤＳ－６Ｈ）在大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ中表达人促红细胞生成素（ｈ－ＥＰＯ）。结果发现，虽然ｈ－ＥＰＯ基因中大肠杆菌使用频率为０％或１％的密码子占密码子总量的１４．３％，但实验中却取得了较高的蛋白表达量。ｐＧＥＸ－２Ｔ和ｐＤＳ－６Ｈ中表达的融合蛋白（分子量：４４４００和２３８００）分别占细菌总蛋白的２９．７％和１７．５％。从而提示，一个基因中的密码子使用频率与翻译延长速率之间可能不是一种简单的对应关系。表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ中５＇融合基因长度达１３００ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ中仅为３６ｂｐ，而ｐＤＳ－６Ｈ但两者表达水平却无显著差异，因此作为翻译起始限制因素的翻译起始区的ＡＴＧ下游顺序仅需长约３６个核苷酸。     

Experimental Studyon Anti－tumor Effect of SplenocytesInduced by Anti－CD3McAb，PHA and IL－2

（沈张悦）（邵静芳）（王晓林）（朱慧芬）ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎＡｎｔｉ－ｔｕｍｏｒＥｆｆｅｃｔｏｆＳｐｌｅｎｏｃｙｔｅｓＩｎｄｕｃｅｄｂｙＡｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂ，ＰＨＡａｎｄＩＬ－２￥ＳＨＥＮＧｕａｎ－ｘｉｎ，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｌｉ...     

Nd:YAG激光加BCG膀胱灌注治疗浅表性膀胱癌

本文将45例经Nd:YAG激光治疗的膀胱癌患者随机分组,对33例做了卡介苗(BCG)膀胱灌注,12例做了噻替派(thiotepa)膀胱灌注,并分别随访了3～18个月,平均9.8个月,BCC组膀胱癌再发率3％(1/33),噻替派组膀胱癌再发率为25％(3/12)(P<0.01)。     

Role of EDRF in the Regulation of Shear Rate in Large Coronary Arteries in Conscious Dogs

To determine whether dilation of large coronary arteries normalizes shear during increased flow following brief occlusion, six dogs were instrumented to measure aortic and left ventricular pressures, left circumflex coronary artery external diameter, and coronary blood flow. The coronary artery was occluded for 15 or 30 s. Data were obtained before and after blockade of EDRF synthesis with nitro-L-arginine. Internal coronary artery diameter and wall shear were calculated on a moment-to-moment basis and the area under the flow curve was measured. Peak flow and shear rate were unaffected by NLA or by the occlusion duration. Flow curve area increased with the duration of occlusion. Internal and external diameters increased significantly for 15 s occlusions before NLA (by 4 ± 1% in external diameter and by 11 ± 4% in internal diameter) and for 30 s occlusions before NLA (by 5 ± 1% in external diameter and by 14 ± 5% in internal diameter) but not after NLA. Adenosine infusions of 0.05, 0.10, 0.50, and 1.0 μmol/kg/min were also used to dilate the coronary arteries. With each infusion, flow, shear and diameter were allowed to reach steady state. Steady state shear was reduced only slightly and did not approach the baseline state. We conclude that increased shear rate causes an increase in coronary artery diameter which is EDRF dependent. Increased coronary artery diameter during reactive hyperemia and adenosine infusions did not normalize wall shear.     

赖型钩体flaB2与VR1012中的CpG基序分析

目的：对问号赖型钩端螺旋体（赖型钩体）DNA疫苗[包括内鞭毛蛋白基因（flaB2)和质粒DNA表达载体（VR1012）]的CpG基序（CpG motifs)进行分析，为DNA疫苗免疫机制的阐明和提高DNA疫苗的效能奠定基础。方法：以flaB2与VR1012构建重组DNA的免疫原，对flaB2及VR1012全核苷酸序列进行计算机分析（分类、计数和定位）。结果：CpG的“C”的侧翼为两个嘌呤，“G”的侧翼为两个嘧啶，在flaB2中共3个，分别为GACGCT，GACGTC和GACGCC；在VR1012中共11个，分别为GACGTC1个，GACGCT2个，GACGCC1个，GACGTT1个，GGCGTT2个，GGCGCT2个，GGCGCC1个，AACGCT1个，其中特别重要的TGACGTCA4个和TAACGCCA有1个，位于5'端456－463；509－516；592－599；778－785和486－493；4个TGACGTCA和1个TAACGCCA均位于5'端且相对集中。结论：赖型钩体flaB2与VR1012构成的DNA疫苗含有TGACGTCA等CpG，这些基序又称免疫刺激序列，构成了DNA疫苗中的佐剂。     

日本血吸虫童虫保护性单克隆抗体的建株和鉴定

本研究获8株抗日本血吸虫(中国大陆株)童虫的单克隆抗体,从中确定一株具有体内保护性功能的单克隆抗体(编号为N15D9),其保护率范围为14-39％。经间接免疫荧光法和ELISA试验检测,N15D9能与尾蚴、3h龄机械转化童虫和5d龄肺童虫的表膜抗原反应。经3h龄机械童虫可溶性抗原的免疫印迹法分析,N15D9能识别132、96和10kDa抗原分子。