从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位

目的：建立一种有效从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位HspA的方法。方法：重组基因工程大肠杆菌发酵后，表达的Hp r HspA包涵体经洗涤，变性，复性，采用Q Sepharose High Performance阴离子交换层析和Superdex75凝胶过滤层析分离纯化，使用SDS－PAGE和HPLC检测纯度，选用ELISA和动物实验对纯化蛋白的免疫学活性和生物学活性进行鉴定。结果：Hp的HspA包涵经洗涤和溶解后，Hp的HspA的纯度＞60％，包涵体溶解液经阴离子交换层析和凝胶过滤层析后纯度超过95％，Hp的HspA纯品经检测具有良好的免疫学活性和生物学活性。结论：本研究建立的分离纯化方法可从包涵体中获得高纯度的重组HspA蛋白，为进一步的动物实验研究奠定了基础。     

洁净手术部对建筑设计的需求

功能先进的洁净手术部已成为现代综合医院的重要标志,近年来得到政府、医疗界、工程技术界的重视.2002年12月GB50333-2002"医院洁净手术部建筑技术规范"的国家标准(简称国标)正式颁布.其中对洁净手术部用房规定了主要技术指标,在实施指南中对设备管理做出了要求.随着医疗市场的需求,全国各地投资改造、新建洁净手术部已成为潮流.我院7500平方米洁净手术部(设备层3000平方米,手术区3000平方米,附属区1500平方米)运营近3年的时间接待来访医院百余家.现就使用后对建筑方面的一些建议供大家讨论借鉴:     

48例易性癖患者围手术期的心理护理

目的：探讨易性癖患变性手术的心理状态。方法：对48例易性癖患行变性手术前后实施有针对性的心理护理。结果：有效的心理护理能进一步改善变性手术患的心理状态，促进易性癖患心理康复。结论：针对易性癖这一特殊群体，开展积极有效的心理护理，对不良心理的康复至关重要。     

大鼠小肠缺血再灌注后血中NO,SOD浓度及肺中Bax,Bcl-2表达的改变

目的：研究大鼠小肠缺血再灌注后后血中一氧化氮（NO），超氧化物歧化酶（SOD）的浓度变化以及肺组织中Bax,Bcl-2的表达，探讨小肠缺血再灌注后对肺组织的损伤，方法：建立小肠缺血再灌注模型，分对照 ，再灌注后0，30min，1，2h,1,3,7d共8组，于各时点检测血中Bax,Bcl-2的表达情况。结果：大鼠小肠缺血再灌注后NO浓度0min明显升高，2h时降低，随后升高，7d时达高峰，SOD浓度0min明显下降，2h 时升高，随后下降，7d时达最低，Bax,Bcl-2免疫阳性细胞主要位于肺组织中血管内皮细胞和肺泡上皮细胞，再灌注0min,Bax,Bcl-2阳性细胞率增多，30min时Bax,Bcl-2阳性细胞率均升高分别为17．1％和78．1％，Bcl-2表达高于Bax，两者差别显著（P＜0．01），2h时降低，其后升高，7d时阳性细胞率达高峰分别为94．1％和83．4％，Bax表达明显高于Bcl-2，两者差异显著（P＜0．01）。结论：大鼠小肠缺血再灌注后可引起血中NO，SOD的浓度变化和Bax及Bcl-2阳性细胞在肺组织中的表达改变并可能引起肺组织细胞凋亡和损伤。     

烧伤后红细胞免疫的变化及意义

对近年来烧伤后红细胞免疫的研究作一综述。     

重庆市城市居民1991～2000年死亡损失生命年分析

目的：研究重庆市城市居民20世纪90年代疾病所致早死的生命损失。方法：用死亡损失生命年YLLs为测量单位，计算不同性别、不同社区的死因别标化YLLs率，及分析1991～2000年死因别标化YLLs率的变化趋势。结果：非传染性疾病标化YLLs率为42.58‰，占全死因的82.76%，其中，恶性肿瘤标化YLLs率为12.80‰，占30.06%，脑血管疾病标化YLLs率 6.62‰，占15.55%，呼吸系统疾病标化YLLs率5.77‰，占13.55%，心脏病标化YLLs率4.38‰，占10.29%；意外死亡标化YLLs率为7.59‰，占全死因的14.75%；传染病、妇科及围产期疾病标化YLLs率为1.28‰，仅占2.49%。在社区之间，死因别标化YLLs率存在明显差异。结核病和精神病标化YLLs率曾出现上升趋势。结论：非传染性疾病已成为该城市居民的主要疾病负担，结核病防治不能放松，精神卫生工作急待开展。     

一种简单、稳定、可靠的屏氧酶1基因多态性分析法

目的：建立一种简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。方法：取外周静脉血100μl，用ROSE法提取基因组DNA，用两对引物：P192F 5′-TAT TGT TGC TGT GGG ACC TGA G-3′,P192R 5′-CAC GCT AAA CCC AAA TAC ATC TC-3′；P55F 5′-GAA GAG TGA TGT ATA GCC CCA G-3′,P55R 5′-TTT AAT CCA GAG CTA ATG AAA GCC-3分别进行PCR扩增，用限制性内切酶AlwI,NlaⅢ对两种PCR产物分别进行酶切，3％琼脂糖凝胶电泳。结果：扩增的两个PCR产物在192、55多态性位点大小分别为99bp、170bp。Alw I酶切后，凝胶电脉得到完全酶切（66bp,33bp)，部分酶切（99bp、66bp、33bp)，未被酶切（99bp)三种类型DNA片段（RR，QR，QQ基因型）；NlaⅢ酶切后，凝胶电脉得到部分酶切（170bp,126bp,44bp)，未被酶切（170bp)两种类型DNA片段（LM，LL基因型）。经双盲重复检测，结果一致。应用此方法对胃癌患者血样标本检测，发现其PON1基因多态性在192位点频率较高。结论：采用一步PCR－RFLP技术可以建立简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。     

ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原—I及广东人参考值的测定

OBJECTIVE: To explore a method for quantitative detection of soluble human leukocyte antigen class I(HLA-I) antigens, with the assistance of which we attempt to define the reference value of the antigen in the population of Guangdong Province. METHODS: Sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was employed with W6/32 monoclonal antibody serving as the solid phase antibody and beta2 microglobulin antibody as the first antibody. HRP-labeled second antibody and the substrate were added for enzyme-catalyzed coloring. On the basis of the standard curve obtained by sHLA-I standard reagent in serial dilution, the concentration of sHLA-I antigens in the samples of 60 normal subjects from the population of Guangdong province was detected. RESULTS: The sensitivity of this assay was 2.84 ng/ml with variation coefficients of 5.80% within the same batch and 9.00% between batches. The recovery rate ranged from 98.57% to 100.15%. The level of sHLA-I antigens in normal individuals was 699.54+/-360.10 ng/ml. CONCLUSION: Sandwich ELISA is sensitive, specific and stable in the detection of sHLA-I.     

谷胱甘肽S-转移酶在原发性肝癌中的表达

目的：为了解谷胱甘肽S－转移酶及其同工酶在原发性肝癌患者中的表达情况。方法：采用免疫组化方法对不同分化程度肝癌组织32例和肝硬化组织11例行GSTs和GST－π表达的研究，并以γ-GT作为对照；同时对128例不同肝病患者血清中GSTs活性作检测。结果：GSTs、GST－π及γ－GT的表达与肿瘤的分化程度有关，分化越差，阳性率越低，反之亦然；GST－π在分化良好组阳性表达率明显高于肝为后肝硬化组（P＜0．05）；血清GSTs活性检测肝癌组与正常对照组相比没有显著性差异（P＞0．05）。结论：GST－π是优于γ-GT的肝癌标志酶，尤其在分化程度良好的肝癌，对临床区分肝癌的分化程度有一定的意义。     

硒对紫外线诱导HLF细胞凋亡的保护作用

目的：探讨紫外线诱导人HLF细胞凋亡时DNA降解特点，以及硒对紫外线诱导细胞凋亡的保护作用。方法：紫外线分别照射体外培养的人肺成纤维细胞3min和5min，同时添加亚硒酸钠（8ng/ml），设立对照组。利用吖啶橙荧光染料染色鉴定凋亡细胞，利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder。结果：紫外线可以诱导人肺成纤维细胞（28代）凋亡，作用存在时间效应关系。紫外线诱导人肺成纤维细胞凋亡时，未出现典型的DNA ladder现象。硒对于紫外线诱导的细胞凋亡有显著的抑制作用。结论：DNA ladder不能作为细胞凋亡的唯一的标志，紫外线诱导的细胞凋亡与DNA ladder的出现并不总是一致的。硒具有拮抗紫外线诱导的细胞凋亡作用。