Fas cDNA克隆、表达及重组蛋白纯化的研究

目的:获得高质量及充足的Fas重组蛋白。方法:采用PCR构建表达重组质粒,亲和层析纯化Fas重组蛋白,ELISA检测其免疫学功能。结果:①PCR扩增获得目的片段约 470 bp。②Sanger双脱氧链终止法测序表明,该 DNA序列仅 174位由A→G突变,属于同义突变,与已知的Fas膜外区氨基酸完全一致。③重组质粒经IPTG诱导有一蛋白得以表达,其目的融合蛋白占细菌总蛋白的17. 4%,分子量约为 34．3 kD。④经 Factor Xa切割 Fas融合蛋白,纯化获得 Fas重组蛋白,Western印迹出现特异性Fas蛋白带,分子量为21．3kD,与预测结果相吻合。⑤ELISA检测 Fas重组蛋白,具有抗体的免疫学活性。结论:成功地表达并纯化了Fas重组蛋白,解决了Fas不易获得的难题,为研究Fas提供了良好的实验材料。     

胰岛素样生长因子(IGF)与子宫内膜异位症关系的研究进展

本文对IGF家族的组成、结构、在多种肿瘤中的作用机制及其在内异症中的研究进展作一综述,旨在为内异症的诊治提供新的依据。其中研究较明确的是IGF-I和IGFBP-3。IGF-I促进甾体激素的生成、促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,与多种肿瘤的发生有关。IGF-I促进异位子宫内膜生长,与内异症形成有关。IGFBP-3作用与IGF-I相反,可能是通过与IGF-I的结合而实现。     

难治性便秘综合治疗及影响因素的评价

目的评价综合治疗对难治性便秘的疗效及影响因素。方法将84例难治性便秘分为非重叠组和重叠组。应用个体化综合治疗4周,观察便秘症状评分变化及总有效率,分析IC患者的重叠症状和心理障碍状态对疗效的影响。结果(1)84例便秘患者中,重叠组和非重叠组分别占40.5%和59.5%。(2)重叠组和非重叠组的总有效率分别为50.0%和78.0%(P<0.05)。(3)对37例IC患者的心理测试调查显示,59.4%(22/37)有心理障碍状态,重叠组和非重叠组伴有心理障碍状态对治疗的总有效率分别为4.8%和31.5%(P<0.05)。结论适合个体化的综合治疗使多数难治性便秘缓解症状,但伴有重叠症状,尤其心理障碍状态则影响疗效。     

胰岛素样生长因子结合蛋白与胰岛素抵抗的关系

胰岛素样生长因子系统是一个由配体、受体、结合蛋白及蛋白酶构成的复杂网络,会受到诸多因子的调节.该系统中的胰岛素样生长因子结合蛋白在不同细胞的增殖和分化中起着重要的作用.临床及体内外研究表明胰岛素抵抗形成过程中,IGFBP出现异常表达.IGFBP通过不同机制抑制或促进胰岛素抵抗的形成.     

睡眠剥夺对HSP70表达及脑超微结构的影响

目的：观察睡眠剥夺（SD）后大鼠脑组织HSP70表达的变化及对超微结构的影响。方法：44只雄性SD大鼠随机分为11组，每组4只，免疫组织化学方法检测HSP70的表达，电镜观察海马超微结构的变化。结果：睡眠剥夺后12小时即可在大脑皮质及海马观察到HSP70阳性细胞，2—3天数量达到高峰，7天时明显下降。白天睡眠剥夺12小时（SDd12h）组HSP70阳性细胞数较夜晚睡眠剥夺12小时（SDn12h）组多（P〈0．05）。RS组大脑皮质HSP70阳性细胞数较白天睡眠剥夺1天（SDd1d）组减少（P〈0．05）。白天睡眠剥夺3天（SDd3d）海马出现超微结构改变，白天睡眠剥夺7天（SDd7d）后改变更加明显。结论：睡眠剥夺可影响大鼠脑组织HSP70表达及超微结构。     

路氏乳杆菌JCM1081黏附相关蛋白的初步鉴定

目的研究路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri,也称罗伊氏乳杆菌)JCM1081菌体表面蛋白对其黏附HT-29细胞的影响。方法将路氏乳杆菌JCM1081菌体进行胰蛋白酶、蛋白酶K处理;用氯化锂和盐酸胍对乳杆菌表面的蛋白进行抽提,进行SDS-PAGE后与黏蛋白受体进行Western blot,并对杂交阳性蛋白进行质谱分析鉴定。结果路氏乳杆菌JCM1081菌体经胰蛋白酶、蛋白酶K处理后,其对HT-29细胞的黏附力显著下降(P<0．01);用氯化锂去除路氏乳杆菌JCM1081菌体外表面的S层蛋白后,路氏乳杆菌JCM1081对HT-29细胞的黏附力无显著变化;Western blot结果显示相对分子质量(Mr)为29×103和14×103的两种菌体表面蛋白与黏蛋白受体杂交中出现了强阳性;质谱分析结果显示29×103蛋白与路氏乳杆菌ATCC55730的h0793蛋白相似性高达71．1％。结论路氏乳杆菌JCM1081菌体表面的蛋白参与了乳杆菌的黏附,其中29×103和14×103的两种胞壁表面蛋白能够特异地识别黏蛋白受体并与之结合,29×103蛋白属ABC转运蛋白家族。     

GSK-3及P70S6K在胰岛素抵抗大鼠肌肉中的表达及意义

目的:观察饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌中糖原合成酶-3(GSK-3)及核糖体S6蛋白激酶(P70S6K)的表达及变化情况,并探讨GSK-3和P70S6K在IR发生中的作用及意义.方法:将40只4周龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、高糖组、高脂组、高脂高糖饲养组,喂养8周后用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术(钳夹试验)对大鼠进行胰岛素敏感性的评估,采用Western blot法检测各组大鼠骨骼肌中GSK-3及P70S6K的含量,同时测定各组大鼠的附睾脂肪垫重量、血糖(BG)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)水平、超敏C反应蛋白(hsCRP).结果:高脂高糖组、高脂组大鼠产生明显IR,体重增加(P＜0.01),以附睾脂肪垫的重量增加更为显著(P＜0.01),TG、TC及FFA水平、hsCRP增加(P＜0.01),GSK-3、P70S6K在IR大鼠肌肉中的表达明显升高.结论:高脂高糖饮食可诱导大鼠产生IR,IR大鼠的hsCRP、TG、TC及FFA水平明显增高,大鼠产生IR与炎症反应有关,GSK-3、P70S6K在IR大鼠中的表达明显升高,在胰岛素信号传导中起负相调节作用.     

颞叶癫痫的临床特点与脑电图分析

目的：分析颞叶癫痫患的临床特点及脑电图定位的意义。方法：回顾分析92例颞叶癫痫患的脑电图。结果：左颞有癫痫样波42例，右颞有癫痫样波29例，双颞有癫痫样波21例，临床表现与癫痫样波发放部位有关，癫痫波的传导主要有容积传导和神经传导方式。结论：结合患临床表现与脑电图癫痫样波起始部位分析有助于致痫灶的定位。     

Examination of the Diagnostic Value and Estimation of the Chaos Phenomenon in Temporomandibular Joint Sounds Using Fractal Dimension

.The aim of this study is to estimate the chaos phenomenon in temporomandibular joints (TMJ) sound using fractal dimension (FD), and to examine the diagnostic value of the FD in comparing TMJ sounds produced by 6 asymptomatic and 25 symptomatic TMJ. Multiple mandibular opening and closing cycles recorded were used to calculate the waveform dimension and correlation dimension in the FD. Chaos in the TMJ sounds was estimated by the FD that was saturated with some constant value to an increase of embedding dimension. Results reveal that fractal analysis produces a high degree of reproducibility within, and similarity across subjects, and indicate that both FD values of the asymptomatic TMJ sounds are significantly higher than those of the symptomatic. These findings suggest that chaos is present in TMJ sounds and the difference in the FD is of diagnostic value in evaluation of pathological change in TMJ sound signals.     

细胞因子对T细胞生长激素基因表达的影响

目的 探讨各种细胞因子对T细胞生长激素（GH）基因表达的影响。方法 构建含人GH调控序列的荧光素酶报告基因质粒pGL2-GH-luc，然后转染入T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞中，在培养液中分别加入各种细胞因子。结果 生理浓度的IL－1β，TNF－β和IFN－γ，对Jurkat细胞中荧光素酶的表达具有抑制作用（P＜0．05）。结论 细胞因子参与了调节淋巴细胞GH基因的表达。