以酶解法从中药及药渣制备β—葡萄糖的研究

本实验首次将工业纤维素酶应用于中药及药渣中，探讨利用工业纤维素酶使中药及药渣的纤维素酶解为β－葡萄糖；实验结果表明：在５０℃，ｐＨ４．５，底物浓度为１５％的条件下，４８小时可酶解得５％以上的β－葡萄糖。     

中国三囊库蠓亚属的种类分布及分类研究(双翅目:蠓科)

本文报告了我国三囊库蠓亚属Culicoides(Trithecoides)已知24种。亚属的鉴别特征,主要特征测量值以及雌虫和雄虫分种检索表。     

幽门螺杆菌cagA菌株感染对IL-8蛋白在胃癌组织中表达的影响

目的 探讨胃癌组织中HpcagA菌株感染对IL-8蛋白表达的影响。方法 采用流式细胞技术，对27例胃癌及相应的癌旁正常组织中IL-8蛋白的表达进行定量检测，用PCR法，对27例胃癌组织中HpcagA基因进行扩增。结果 27例胃癌组织中中，有25例（92%）可明显表达IL-8蛋白；而相应的癌旁正常组织中，基本没有IL-8蛋白的表达或仅有弱相应的癌旁正常组织中，基本没有IL-8蛋白的表达或仅有弱表达，HpcagA感染的胃癌组织中，IL-8的表达水平为64.27%，高于未感染HpcagA的胃癌组织（39.86%)。结论 IL-8在胃癌组织中的高表达与HpcagA感染有关。即HpcagA菌株感染可上调IL-8在胃癌组织中的表达水平。     

中国东北地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者HIV毒株的耐药基因变异研究

目的　研究我国东北地区未接受抗逆转录病毒治疗的HIV AIDS患者HIV毒株的逆转录酶和蛋白酶耐药变异情况 ,为开展大规模临床抗病毒药物治疗提供本底数据。方法　RT PCR和套式PCR扩增HIVpol区基因 ,双脱氧法测定逆转录酶和蛋白酶基因序列 ,与国际耐药数据库比对辨别耐药变异。结果　 (1) 5 3例患者毒株亚型分析结果 :B′亚型 4 7例 ,B′ C亚型 4例 ,A、B亚型各 1例 ;(2 )未发现逆转录酶和蛋白酶原发耐药变异存在 ,但发现存在逆转录酶抑制剂继发变异 :M4 1L(1.9% )、I6 3M (1.9% )、L74I (1.9% )、S6 8G (1.9% )、V75L (3.8% )、V10 6I (1.9% )、I135L T (5 .7% )、V179D (7.5 % )和V189I (1.9% ) ,无症状感染者RT继发耐药变异出现率为 11.8% ,而艾滋病患者为5 2 .6 % (P <0 .0 1)。存在大量蛋白酶耐药继发变异V77I (88.7% )、L6 3P (86 .8% )、E35D (81% )、A71V(2 4 .5 % )、R4 1K (15 .1% )、L10I (9.4 % )、R5 7K (9.4 % )、D6 0E (9.4 % )、N37D (5 .7% )、G16E (3.8% )、I15V (1.9% )、M36I (1.9% )、K5 5R (1.9% )和L89M (1.9% )。未发现明显的亚型特异性耐药变异。结论　在中国东北地区未接受抗逆转录病毒治疗的HIV AIDS患者中未发现毒株逆转录酶和蛋白酶耐药原发变异 ,但大量继发耐药变异的存在提     

IL-10RA基因多态性及其与系统性红斑狼疮关系的研究

目的:确定SLE模型小鼠IL-10RA基因变异及其与SLE表现型是否存在关联。方法:用微卫星遗传标记及数量性状位点(QTL)分析方法确定SLE模型小鼠B/W F1的SLE易感基因精确染色体定位并选取候选易感基因,对候选易感基因进行测序分析,选取有基因序列异常的候选易感基因进行PCR-SSCP分析,确定候选易感基因碱基序列变异位点与抗染色质抗体、抗DNA抗体,抗组蛋白抗体及蛋白尿等SLE表现型的相关关系。结果:QTL分析结果表明B/W F1×NZB小鼠抗染色质抗体易感基因与NZW型IL-10RA基因紧密连锁;测序分析发现IL-10RA基因编码区有18处碱基变异,其中7处碱基变异将导致编码氨基酸的变异;抗染色质抗体、抗DNA抗体,抗组蛋白抗体及蛋白尿等SLE表现型与NZW型IL-10RA基因密切相关。另一种SLE模型小鼠MRL的IL-10RA基因存在相同变异。结论:NZW小鼠IL-10RA基因编码区碱基序列存在变异,B/W F1×NZB小鼠SLE表现型与NZW小鼠第9染色体IL-10RA编码区碱基变异相关,提示IL-10RA可能是SLE模型小鼠的一个SLE易感基因。     

抗人大肠癌单链抗体的构建、表达及其体内外生物学活性的检测

目的 将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1(mAb)的VR和VL基因进行重组，构建和表达ND－1scFv，并对其在体内外的生物学活性进行检测。采用RT－PCR技术，从能够分泌mAb ND-1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH和RL基因，通过重叠延伸拼接PCR在VH和VL基因间引入连接短肽，体外构构建ND－1scFv基因，并在大肠杆菌中表达。采用间接免疫荧光（IFA）EY IF工IMPG-1scFv的免疫学活性。用^99Tc^m标记ND－1scFv后，将偶联物给予荷瘤裸鼠，观察其在动物体内的显像及生物学分布。结果 SDS－PAGEW显示，重组蛋白Mr为30000，同预期结果一致。IFA及ELISA检测表明，ND－1scFv保留了与亲本抗体相近的免疫学活性，对表达相应抗原的靶细胞具有行异结合活性。体内放射免疫实验显示，^99Tc^m-ND-1scFv在荷瘤小鼠体内的生物学分布，呈明显的肿瘤积聚趋向，注入体内1h血中T／NT即在2．61。结论 获得免疫学活性良好的ND－1scFv，对荷瘤动物体内肿瘤的定位快速，准确，可望成为有效的肿瘤诊断和治疗的导向载体。     

HLA-Ⅱ类基因单倍型与中国北方汉族人皮肌炎/多发性肌炎的相关性研究

目的：探讨HLA-DRB1、DQB1基因单倍型与中国北方地区汉族人皮肌炎，多发性肌炎的相关性。方法：采用聚合酶链反应，序列特异性引物(PCR-SSP)技术，检测中国北方汉族皮肌炎，多发性肌炎患者的HLA-DRB1、DQB1等位基因。结果：与100例正常对照组比较，在52例皮肌炎，多发性肌炎患者中HLA-DRB1^#040x-DQB1^#0301、DRB1^#040x-DQB1^#0401单倍型频率明显增高，经统计学检验两组差别有显著意义，P值分别为0.0307、0.0033。HLA-DRB1^#150x-DQB1^#0602单倍型频率明显降低，P值为0.0201。在38例皮肌炎组中，HLA-DRB1^#040x-DQB1^#0301、DRB1^#040x-DQB1^#0401、DRB1^#070x-DQB1^#0201、DRB1^#120x-DQB1^#0303单倍型频率明显增高，P值分别为0.0292、0.0015、0.0450、0.0192，两组差别有统计学意义。在14例多发性肌炎患者中HLA-DRB1^#070x-DQB1^#0301单倍型频率明显增高，P值为0.0141。结论：特异单倍型可能是决定皮肌炎，多发性肌炎发病及皮肌炎、多发性肌炎异质性的重要因素。     

人巨细胞病毒UL136基因在临床低传代分离株中多态性分析

目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)UL136基因在临床低传代分离株中的多态性，探讨其多态性与HCMV先天性感染不同致病性之间的关系。方法 对48株经荧光定量PCR方法检测HCMV DNA为阳性的临床低传代分离株进行HCMV ULl36全序列PCR扩增，对于扩增阳性的12株PCR产物进行ULl36基因全序列测定及结果分析。结果 48株临床低传代分离株ULl36 PCR扩增，12株阳性，阳性率25％，以HCMV Toledo株作为参考株，进行序列比较分析表明，12株临床分离株ULl36开放阅读框架(open reading frame，ORF)长度均与Toledo株相同，为723bp，编码241个氨基酸的蛋白。DNA序列变异均为碱基替换，不同临床分离株ULl36基因与Toledo株进行同源性比较，结果在核苷酸水平为97．7％～99．3％，氨基酸水平为96．6％～99．1％。ULl36编码蛋白的氨基酸变异率为0．83％～3．3％。二级结构预测分为两种构象。大多数HCMV ULl36蛋白翻译后修饰位点在所有分离株中均高度保守，仅几个位点在一些分离株中存在缺失或新增。Toledo株及12株临床分离株核苷酸及氨基酸序列系统进化树分析表明：45J最接近Toledo株。结论 12株临床低传代分离株HCMV ULl36基因DNA及其编码产物的氨基酸序列比较保守，但仍存在一定多态性。未发现不同临床分离株ULl36基因多态性与HCMV先天性感染的表现关系。     

精神病人手术治疗前后WMS、WAIS测试结果分析

目的　探讨精神病的外科手术疗法对病人脑功能的损害。方法　应用韦氏记忆 ( WMS)、智力 ( WAIS)量表分别对1 0名精神病人进行手术治疗前后的测试。结果　精神病人手术治疗前后 ,记忆、智力量表分没有显著差异 ( P>0 .0 5 )。结论　精神病的外科治疗对病人的脑功能没有不良影响。     

大鼠实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎模型

目的 :建立大鼠实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎 (EAU)模型 ,为探讨人类葡萄膜炎的发病机制奠定基础。方法 :18只Wistar大鼠用 3只不同剂量牛视网膜可溶性抗原 (S Ag)免疫后 ,每日扩瞳进行EAU临床观察 ;当大鼠出现中度以上EAU临床表现时处死、其他大鼠第 3～ 4w时处死后眼球摘除 ,行组织学观察。结果 :3组不同剂量S Ag免疫大鼠EAU发病率分别为 :10 0 μgS Ag组 6只大鼠 (12只眼 )为 2 12、2 0 0 μgS Ag组 6只大鼠 (12只眼 )为 6 12、30 0 μgS Ag组 6只大鼠 (12只眼 )为8 12 ;组织学炎症评分分别为 :0、16 76± 11 0 2、17 5 6± 9 96。结论 :使用中等纯度的S Ag ,以及中等敏感度的Wistar大鼠 ,可成功诱发出EAU模型