栽培鸡血藤藤茎次生代谢产物的动态积累变化研究

【目的】研究栽培鸡血藤藤茎中次生代谢产物在不同生长期的动态积累变化趋势,为其采收期的合理制定提供科学依据。【方法】参照《中国药典》（2010年版一部）附录XA测定醇溶性浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,采用高效液相色谱法同时测定原儿茶酸、儿茶素及表儿茶素的含量。【结果】鸡血藤藤茎中醇溶性浸出物、总黄酮及指标性成分原儿茶酸、儿茶素和表儿茶素的含量均随着生长年限的增加呈递增的趋势;而1年中不同月份样品的醇溶性浸出物、总黄酮、表儿茶素的含量变化均呈抛物线状,7～9月含量达到峰值;儿茶素的含量则一直呈上升状态;7～9月采收的4～6年生鸡血藤样品中醇溶性浸出物已达到现行版《中国药典》的要求。【结论】初步建议栽培鸡血藤藤茎以7年生以上采收为宜,其最佳采收年限与采收月份有待进一步研究确定。     

医学生医患关系认知现状及其对专业学习的影响

目的:调查医学生对医患关系的认知情况及其对专业学习的影响.方法:使用自制调查问卷对蚌埠医学院临床医学专业大一至大五的学生进行抽样调查.结果:高年级比低年级有更多的医学生认为现在的医患关系非常紧张(P<0.01),医生是一个高风险职业(P<0.01),在目前的医患关系下工作肯定会压力不小(P<0.01),担心以后会面临医患纠纷的困扰(P<0.01);高年级比低年级有更少的医学生对未来一段时间医患关系的改善比较乐观(P<0.01),认为今后一段时间医患关系的发展前景不断改善(P<0.01),医患纠纷的发生双方均有责任(P<0.01);低年级比高年级更重视职业道德(P<0.05);新闻媒体是医学生了解医患关系的主要途径,教师的言传身教成为影响医学生对医患关系看法的不可忽视的因素;高年级对专业的满意度低于低年级学生(P<0.01);认为医患关系紧张的医学生学习积极性比认为医患关系不紧张的医学生高(P<0.01).结论:当前不良的医患关系已经通过多种渠道对医学生的专业满意度和择业观造成了负面影响,需要从社会、媒体、学校、教师等多方面加强措施减少这种负面影响.     

非线性动力学方法可预警直立倾斜试验中血管迷走性晕厥的发生

目的 量化评价血管迷走性晕厥血压下降过程中的脑血流自动调节功能,用于在晕厥相关症状出现前预测其发生。方法 选取20位直立倾斜试验证实的血管迷走性晕厥患者,另选取20名正常对照者。所有被试在直立倾斜试验前都要平卧30 min,同时使用TCD 2 MHz Doppler监测探头监测双侧大脑中动脉血流速度,心电监护监测心率,使用连续每搏血压监测指端无创连续血压。在进行10 min基线数据采集后,被试继续进行70°直立倾斜试验,每位被试至少直立30 min,或在30 min内出现晕厥发作或晕厥前兆时或当被试出现突发血压下降≥20 mmHg时终止检查。利用多模态血流血压分析(multimodal pressure-flow analysis,MMPF)的非线性动力学方法对不同时相的脑血流自动调节功能进行分析。利用信号分析的方法将脑血流信号记录中的重搏切迹深度量化测量,定义新的预测参数晕厥指数(syncope index,SI)用于评估血压变化时的脑血管张力。结果 病例组在血管迷走性晕厥发生时的晕厥指数与倾斜试验开始时的基线数值相比存在明显下降(0.16±0.10 vs. 0.27±0.10,P<0.01), 而对照组在倾斜试验结束时的晕厥指数与倾斜试验开始时的基线数值相比差异无统计学意义。对于血管迷走性晕厥组的患者,在晕厥发生前3 min,搏动指数与基线数据相比未见明显变化(P>0.05),但晕厥指数已出现明显下降(0.23±0.07 vs.0.29±0.07,P<0.01)。结论 当血管迷走性晕厥发生时脑血流动态调节功能衰竭,小血管张力的丧失与脑血流自动调节功能的丧失是相关的;晕厥指数可以作为提前预测血管迷走性晕厥发生的一个有用的参数。     

系统性老年性淀粉样变患者血清转甲状腺素蛋白出现三种修饰基团减少

目的:探讨转甲状腺素（TTR）蛋白代谢修饰与淀粉样变形成的分子机制。方法:本研究首先利用ProteomeLabPF-2D系统依据蛋白质等电点分选各个pH值范围蛋白质,然后利用抗人TTR抗体,点免疫印迹实现鉴定TTR蛋白存在于被收集的范围。利用硫黄素T（ThT）试剂,测定各个收集部分溶液中淀粉样变的含量,进一步利用飞行质谱的表面增强激光解吸/电离时间（SELDI-TOF-MS）分析各个部分TTR蛋白的修饰类型。结果:系统性老年性淀粉样变（SSA）患者和健康志愿者血清pH范围分别为 8.1～8.0,4.0～4.6及6.8～5.8范围时出现高丰度蛋白。并且SSA患者pH6.8~5.8范围淀粉样变含量明显高于对照组（P＜0.05）,其中SSA组与健康组相比,血TTR 蛋白N端氨基酸修饰基团包括磷酰基（Phosphoryl）、羟基（Hydroxyl）、葡萄糖胺（O-GlcNac）基团修饰阴性。结论:SSA患者血TTR 蛋白N端氨基酸修饰基团Phosphoryl、Hydroxyl、O-GlcNac的减少可能与淀粉样蛋白的形成有关。     

体外辐射模拟P53依赖的小鼠肠干细胞损伤研究

目的 建立6 Gy小鼠肠干细胞体外辐射模型,模拟在体P53依赖的肠干细胞辐射损伤修复过程.方法 分离C57BL/6(野生型)、P53-/-小鼠小肠隐窝,分别于基质胶内接种进行3D培养,24 h后予X线6 Gy照射.比较两组隐窝克隆出芽过程和照后6d克隆存活率.对野生型隐窝克隆用RT-PCR检测照后24 h内不同时间点P53靶基因Bax、Bbc3、Mdm2、P21、Bcl2l1以及肠干细胞特征性基因Lgr5、Olfm4、Ascl2的表达.结果 C57BL/6和P53-/-小鼠小肠隐窝于接种后48 h出芽,在接种后96 ～ 120 h形成类器官样结构.6 Gy辐照可诱导C57 BL/6隐窝细胞24 h内大量死亡,完全抑制克隆出芽,仅(43.84 ±5.73)％的克隆存活;而对P53-/-小鼠隐窝出芽时间无影响,且有(83.69±5.89)％隐窝克隆存活,显著高于对照组(P＜O.01).在野生型隐窝克隆中,P53下游靶基因的表达可被辐射迅速激活,并在24 h内维持高水平,而干细胞特征性基因在12h迅速下降,24 h到达最低水平.结论 6 Gy照射小鼠小肠隐窝能较好地模拟在体P53依赖的促凋亡因素对肠干细胞的损伤.     

血清学生物标志物对急性呼吸窘迫综合征进展及预后的预测研究

目的 探讨血清学生物标志物对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)早期诊断预警及预后判断的预测效果.方法 采用多中心、前瞻队列研究的方法,从2014年1月开始纳入各中心收治的ARDS与ARDS高危病例.采集患者的人口学资料,检测患者在入组24 h内的血清学指标(sRAGE、CC16、Ang-2、sICAM-1、PAI-1、SuPAR、HMGB1).采用Logistic回归分析对影响高危ARDS患者发展成为ARDS危险因素和影响ARDS预后的危险因素.用ROC曲线比较单个危险因素或联合多个危险因素对ARDS发生的预警及ARDS死亡预后的预测效果,计算其预测的灵敏度、特异度及约登指数.结果 共纳入ARDS患者59例,ARDS高危患者41例.ARDS发生的独立危险因素有HMGB1、sICAM-1、Ang-2、CC16、PAI-1.其中HMGB1预测效果最好(AUC=0.908),其次根据AUC大小顺序为CC16(AUC=0.861),Ang-2(AUC=0.858),PAI-1(AUC=0.801),sICAM-1(AUC=0.773).单指标分析中,敏感度最高的单指标为HMGB1与sICAM-1,皆为79.7％,特异度最高的指标为HMGB1、CC16与Ang-2,皆为87.8％.在联合预测中,HMGB1与Ang-2联合预测,特异度最高,为95.1％,其AUC也为最高(0.92).HMGB1、Ang-2与PAI-1指标联合预测,敏感度最高,为89.9％.多指标联合预测,可以在一定程度上提高对ARDS诊断预测的灵敏度和特异度.对ARDS预后分析,sRAGE与Ang-2是其死亡的独立危险因素.sRAGE(AUC=0.791)比Ang-2(AUC=0.67)对ARDS患者死亡预测效果好.两指标联合可以提高ARDS死亡预测的特异性.结论 在ARDS高危患者中,HMGB1、sICAM-1、Ang-2、CC16、PAI-1是其发展成为ARDS的独立危险因素.HMGB1与Ang-2联合预测有较好的特异性,HMGB1、Ang-2与PAI-1联合预测有较好的敏感性.对于ARDS患者,sRAGE与Ang-2的增高预示着ARDS患者预后不良,两者联合预测可以提高预测的特异性.     

Curcumin co-treatment ameliorates resistance to gefitinib in drug-resistant NCI-H1975 lung cancer cells

Objective

To examine whether a combinative treatment with curcumin enhances the effects of the epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor (EGFR-TKI) gefitinib on cell proliferation, clonogenic capacity and apoptosis in the drug-resistant lung cancer cell line NCI-H1975, and further investigate the molecular mechanisms involved.

嗜肺军团菌mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体的构建及表达

目的 选取嗜肺军团菌mip/flaA优势抗原表位基因,构建mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体,并在原核系统中表达,为后续制备嗜肺军团菌蛋白疫苗提供初步的实验基础。方法 运用生物信息学方法对Mip和FlaA蛋白的二级结构和表面特性如理化性质、亲水性、可塑性、抗原指数以及胞外区等方面进行分析,选择其活性表位可能存在的区域为优势抗原表位区。通过PCR扩增和T4连接酶构建pET-mip、pET-flaA和pET-mip/flaA优势抗原表位基因融合表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达。结果 Mip和FlaA都存在多个潜在的抗原表位位点,选取其优势抗原表位区域进行克隆和表达获得成功,并成功表达了mip/flaA二联优势抗原表位融合蛋白。结论 DNA Star软件和Expasy在线蛋白分析系统能够成功预测嗜肺军团菌Mip和FlaA 抗原的表位;选取其优势抗原表位成功构建了pET-mip/flaA二联原核表达载体,并高效表达。     

吴茱萸碱衍生物纳米粒的多功能性药效学研究

目的:研究吴茱萸碱丁酰基衍生物(evodiamine butyryl derivative,EAB)和吴茱萸碱丁酰基衍生物固体脂质纳米粒(evodiamine butyryl derivative-loaded lipid nanoparticles,EABLN)在大鼠体内的多功能性药效学行为。方法:采用薄膜超声法制备EABLN,对制剂的外观、粒径、电位和包封率进行检测。将32只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、EAB治疗组、EABLN治疗组,每天监测大鼠的体质量变化。治疗组先连续口服灌胃给药治疗1周后,再口服灌胃次黄嘌呤并皮下注射氧嗪酸钾后成功造就了大鼠的高尿酸血症模型,检测血清中尿酸(uric acid,UA)、血肌酐(serum creatinine,CR)、尿素氮(usea nitrogen,BUN)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、谷丙转氨酶(alanine ami...     

Foxo3a和p27kip1在大鼠坐骨神经损伤后背根神经节中的表达

Objective To investigate the expression of Foxo3a and p27kip1 in lumbar dorsal root ganglia (DRG) after injury of sciatic nerve in rats. Methods Adult rats were randomly divided into control group and experimental group. The rats in experimental group were subjected to sciatic nerve clamp.Expression and distribution of Foxo3a and p27kip1 and cellular proliferation and axon regeneration in DRG was detected by western blot and immunohistochemistry. Results Foxo3a protein levels begined to reduce at 1 day (7.0 ± 3.5), reached valley at 2 day (6.0 ± 3.8) after injury, and following Foxo3a downregulation, p27kip1 protein levels begined to decrease at 2 day (29.0 ± 3.5), reached valley at 7 day (21.0± 3.0) after injury. Down-regulation of Foxo3a and p27kip1 was expressed predominantly in neurons and glial cells by double immunolabelling. Foxo3a and p27kip1 were expressed in neurons [(37.8 ± 5.7)%, (43.3 ±4.3)%] and glial [(22.4 ± 3.9)%, (13.8 ± 3.2)%] cells in sections of DRG at 2 day after injury less than neurons [(73.6 ± 2.5)%, (84.1 ± 3.7)%] and glial [(61.3 ± 4.4)%, (68.7 ± 5.6)%] cells in sections of normal DRG. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and GAP-43 were up-regulation from 2 day, and PCNA reached peak at 7 day after injury.The glial cells were the main type of cellular proliferation.Conclusion Down-regulation of Foxo3a and p27kip1 in lumbar DRG is correlated with the proliferation of glial cells and axonal regeneration after sciatic nerve injury.