慢病毒载体介导的RNAi技术构建稳定抑制β-catenin的人鼻咽癌细胞株

目的建立稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为探讨Wnt/β-catenin信号在鼻咽癌发生中的作用提供细胞模型。方法于β-catenin CTNNB1基因编码区选择3个siRNA靶点合成3对shRNA干扰序列,分别与pLKO.1载体连接,构建pLKO.1-sh-β-catenin质粒(干扰组1)、pLVTHM-sh-β-catenin(干扰组2)和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒(阴性对照组);将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集含慢病毒颗粒的上清液感染人鼻咽癌6-10B细胞,感染pLKO.1-sh-β-catenin和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒的细胞经嘌呤霉素筛选并扩大培养后得到稳定克隆株。Western blot检测干扰组β-catenin抑制效率及下游基因c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测比较细胞增殖状况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率。结果 Western blot检测结果显示pLKO.1-sh-β-catenin(干扰组1)干扰效率最佳,β-catenin及c-myc蛋白表达减少;MTT检测显示干扰β-catenin后细胞吸光度下降,细胞增殖受到抑制;穿过Transwell小室底膜的细胞数:干扰组1为(23.5±4.6)个,明显低于阴性对照组(50.3±5.3,P<0.01)及空白对照组(54.3±5.6,P<0.01)。结论成功构建了β-catenin shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为进一步研究以β-catenin为靶点的鼻咽癌基因治疗奠定基础。     

慢性主动脉瓣关闭不全患者左室功能对运动的反应

本文对41例慢性主动脉瓣关闭不全(chronic aortic regurgitation,CAR)患者和20例对照者的研究指出,症状性和无症状性CAR患者在运动时呈异常左心室功能储备力,主动脉瓣返流减少,且休息时主动脉瓣关闭不全越严重,运动时返流量减少越明显。     

退行性腰椎滑脱症的外科治疗

２１例老龄腰椎退行性滑脱症患者接受了腰椎后方减压术和１８个月以上的随访。以日本整形外科协会腰痛基准评分，优３８％、良１９％，中１４％和差２９％。结果提示多数病例通过简单的后方减压手术可获得较好的疗效，无需融合术。少数患椎节段不稳定的病例术后症状复发，复发与术后腰椎进一步滑脱有关，术前对腰椎的稳定性进行测评是有必要的。     

人睾丸和卵巢抑制素样物质的免疫组织化学定位

用人抑制素α亚基单克隆抗体（ＭｃＡｂ）腹水作为第一抗体，采用链霉卵白素－生物素－过氧化物酶（ＬＳＡＢ）免疫组织化学方法，在光镜下对人睾丸和卵巢中抑制素样免疫活性物质进行定位观察，结果显示：人睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞、Ｌｅｙｄｉｇ细胞、精原细胞、精母细胞和卵巢颗粒细胞、泡膜细胞及间质细胞等胞浆内存在人抑制素α亚基ＭｃＡｂ的阳性免疫染色反应，提示：这些细胞为抑制素的分泌来源。     

Protective effect of glutamine-enriched early enteral nutrition on intestinal mucosal barrier injury after liver transplantation in rats

Background

The effect of glutamine-enriched early enteral nutrition (Gln-EEN) on intestinal mucosal barrier injury after liver transplantation (LT) remains uncertain.

Methods

The Wistar-to-Wistar rat LT model was used to explore the protective effect of Gln-EEN. Morphologic changes of intestinal mucosa, levels of intestinal malondialdehyde and secretory immunoglobulin (sIgA), plasma endotoxin, D-lactic acid, serum tumor necrosis factor-α (TNF-α), rates of bacterial translocation, and expression of intestinal nuclear factor-κB, TNF-α, and intercellular adhesion molecule-1 were determined.

Results

After LT, intestinal mucosa was damaged seriously. At 12, 24, and 48 hours posttransplantation, levels of intestinal sIgA were decreased; levels of malondialdehyde, endotoxin, D-lactic acid, and TNF-α, the ratio of bacterial translocation, and the expression of intestinal nuclear factor-κB, TNF-α, and intercellular adhesion molecule-1 all were increased. However, changes in earlier-mentioned parameters in recipients treated with Gln-EEN were attenuated remarkably at 24 to 48 hours.

Conclusions

Our data show that Gln-EEN is a potent protectant against intestinal mucosal barrier injury after LT.     

线粒体去乙酰化蛋白SIRT3在噪声诱导隐匿性听力损失中的作用

目的 探讨线粒体去乙酰化蛋白(sirtuin-3,SIRT3)在噪声性隐性听力损失(noise-induced hidden hearing loss, NIHHL)中的作用。方法 将注射过SIRT3抑制剂[3-(1H-1,2,3-triazol-4-yl) pyridine,3-TYP]与未经处理的C57BL/6J小鼠分别于100 dB白噪声下暴露2 h,并在噪声暴露 (noise exposure, NE) 后1 d和14 d进行测听。利用免疫荧光染色观察内毛细胞 (inner hair cell, IHCs)带状突触(ribbon synapses, RS)的变化。冰冻切片下,4-羟基壬烯醛 (4-hydroxynonenal, 4-HNE)染色观察耳蜗内活性氧(reactive oxygen species, ROS) 的累积。结果 与对照组相比,噪声组及3-TYP组小鼠均在噪声后出现短暂性听力阈值的升高,ROS的累积及带状突触的丢失。与噪声组小鼠相比,3-TYP组小鼠在噪声后第14天听力未恢复正常,带状突触丢失明显,且伴有ROS的显著累积。结论 NE诱发了内耳的氧化应激反应,SIRT3可能通过抵抗氧化应激作用来保护耳蜗带状突触及听功能。     

脊柱术后急性深部组织感染的观察及护理

目的 分析脊柱术后急性深部组织感染的特点及危险因素,探讨脊柱术后护理方式.方法 回顾该院2010年1月-2014年1月21例脊柱术后急性深部组织感染的发现与治疗过程.结果 21例患者急性深部组织感染发现及时,其中7例患者通过调整抗生素及换药,14例患者通过积极外科治疗,预后良好.结论 脊柱术后深部组织感染护理观察的重点在于患者体温的变化,患者敷料渗出物的变化,及注意患者主诉的变化.     

肠内营养与激素治疗对儿童克罗恩病的疗效对比研究

目的比较肠内营养（EN）与激素对儿童活动期克罗恩病（CD）的临床指标和肠黏膜愈合方面的治疗效果,探讨EN治疗儿童CD的应用价值。方法将本院2012年7月-2014年1月确诊为活动期CD的患儿,依据治疗方式的不同将患儿随机分为肠内营养治疗组（EN组）和激素治疗组（激素组）,观察对比CD患儿在0、2、4、6、8、10、12周的各项临床检测指标变化,并通过内镜及组织学检查观察对比CD患儿在0、12周时的肠黏膜炎症改变。结果（1）共48例CD患儿入组,EN组25例,激素组23例,两组患儿的一般资料比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,具有可比性;（2）治疗结束（12周）时,EN组的临床缓解率为80％（20／25）,激素组为82．6％（19／23）,两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;（3）治疗后EN组的内镜下缓解率为72％（18／25）,显著高于激素组的34．8％（8／23）（P〈0．05）;EN组的组织学缓解率为60％（15／25）,也显著高于激索组的26．1％（6／23）（P〈0．01）。结论EN是治疗儿童活动期CD的一种有效方法,在诱导黏膜愈合方面较激素治疗更为有效。     

鲁迅与解剖学研究述略

鲁迅在《我怎么做起小说来》一文中写道,"但我的来做小说,也并非自以为有做小说的才能……大约所仰仗的全在先前看过的百来篇外国作品和一点医学上的知识,此外的准备,一点也没有"[1].可见,鲁迅青年时期接受的医学教育,与之精神与艺术有着深刻的渊源.而鲁迅所说的"医学上的知识"中,对其影响最大的莫过于 "解剖学的知识".在鲁迅...     

自身免疫多腺体综合征Ⅲ型CTLA-4外显子1多态性研究

目的了解毒淋巴T细胞相关抗原-4(CTLA-4)基因外显子1多态性与自身免疫性多腺体综合征Ⅲ型(APSⅢ)的关系。方法采用PCR-RFLP法检测52例正常对照者,39例经典1型糖尿病(T1DMA)患者和16例APSⅢ临床及亚临床患者CTLA-4基因外显子1的多态性。结果正常对照组CTLA-4外显子A等位基因出现频率0.212,低于G等位基因出现频率0.788。正常对照组不同基因型及等位基因均显示女性的GG基因型或G等位基因均较男性高,但差异均无统计学意义(χ2分别为2.856和0.003,P为0.24和0.352)。3组的A、G等位基因频率比较:χ2值和P值分别为1.476和0.478。结论G是本组人群中的主体基因。A基因频率在正常对照组、T1DMA组和APSⅢ组之间呈依次上升的趋势,推测A基因与疾病易感可能有相关性。同时表明CTLA-4仅仅是自身免疫疾病发生的次要因素。