两种人乳头状瘤病毒检测方法的比较

目的 评价导流杂交和实时荧光定量（real-time）PCR对宫颈癌患者HPV感染检测的临床意义.方法 采用导流杂交和real-time PCR分别对190例患者进行HPV感染检测,并对检测结果进行分析.结果 在190例检测标本中,导流杂交法检测出113例HPV阳性,阳性检出率为59.5％,筛查宫颈癌的敏感度为58.1％,特异度为39.2％,阳性预测值为47.8％,阴性预测值为49.4％.real-time PCR检测出106例阳性,阳性检出率为55.8％,筛查宫颈癌的敏感度为54.8％,特异度为43.3％,阳性预测值为48.1％,阴性预测值为50.0％.导流杂交和real-time PCR检出的HPV阳性率差异无统计学意义,而且一致性检验显示两种方法具有较高的一致性（符合率为87.9％）.结论 本研究结果表明,导流杂交和real-time PCR方法检测HPV未表现出较大的差异,在宫颈癌筛查中可以将两种方法结合使用,以提高检测的准确性,降低漏诊率.     

2011～2013年北京市部分二级以上医院收治患者的乙肝病毒感染情况分析

目的 了解北京市部分二级及以上医院住院及门诊收治病人的乙肝病毒感染情况,为制订乙肝防治策略提供科学数据.方法 以2011年1月至2013年12月期间在北京市部分二级及以上医院收治的用于检测HBV-DNA定量的3351例患者为研究对象,利用荧光定量PCR方法对研究对象的血清（血浆）标本进行HBV-DNA定量检测,并以结果大于5×10^2 IU/mL作为阳性判断标准,利用Excel的CHITEST函数分析资料完整样本的感染数据.结果 2011年至2013年,在北京部分二级及以上医院收治患者中,乙肝病毒的感染率为33.42％左右.男性感染者数量明显多于女性（P＜0.01）.感染者主要来自21 ～40岁年龄组（55.35％）;规范儿童疫苗接种后感染者有所减少,0～20岁年龄组阳性率为5.77％等.结论 从本文的检测结果看,HBV阳性率较高,对阳性人群应加强管理并用药控制病毒载量,对易感人群应加强保护预防感染.     

新生期大鼠接种卡介苗对空间学习能力和海马突触可塑性的影响

目的检测免疫接种卡介苗（BCG）后大鼠行为学,电生理,海马神经元树突棘的变化。为进一步研究疫苗接种对突触传递和学习记忆的影响提供依据。方法实验分为卡介组和对照组。新生Sprague-Dawley（SD）大鼠于出生24h内背部皮下接种卡介苗,对照组皮下注射等量的PBS。4周时水迷宫检测其行为学的变化,在体LTP测其电生理的变化,并使用基因枪散射DiI染料法检测海马神经元树突棘的变化。结果与其对照组相比,卡介组空间学习记忆能力明显增强：LTP结果显著优于对照组;海马神经元树突棘的密度以及蘑菇样（mushroom）增多。结论新生期成功接种疫苗可以提高大鼠突触传递的可塑性并促进其学习记忆能力。     

整合素α5β1蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)中整合素α5β1蛋白和mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法、RT-PCR技术检测60例CSCC及40例子宫颈正常组织中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达.结果 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA表达均高于子宫颈正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);整合素α5β1蛋白及mRNA的表达均与CSCC分化程度、pTNM分期、淋巴结转移、浸润深度有相关性(P＜0.05),与患者年龄无相关性(P＞0.05).结论 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达与其生长、侵袭与转移密切相关.采用免疫组化SP法与RT-PCR技术联合检测CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA,有望成为评估CSCC恶性程度、侵袭、转移和临床预后的指标.     

外周血内皮祖细胞与极低出生体重早产儿并发症发生相关性

目的分析内皮祖细胞（EPCs）与极低出生体重早产儿发生支气管肺发育不良（BPD）、早产儿视网膜病（ROP）和脑室内出血（IVH）并发症的相关性。方法选取于复旦大学附属儿科医院NICU住院的胎龄〈32周、出生体重〈1500g的早产儿,分别于出生时、生后7、14、21和28d及纠正胎龄36周时收集外周血,流式细胞仪检测EPCs水平,酶联免疫法检测血管内皮生长因子（VEGF）、基质细胞衍生因子等水平。结果68例极低出生体重早产儿纳入分析,其中对照组30例,BPD组20例,ROP组10例,IVH组8例。BPD组与对照组出生时EPCs水平差异无统计学意义,生后7d时点EPCs水平较对照组明显降低,CD34＋KDR＋：（0．019±0．009）％伽（0．026±0．012）％,P〈0．05;KDR＋CDl33＋：（0．004±D．002）％傩（0．008±0．004）％,P〈0．01;CD34＋KDR＋CDl33＋：（0．005±0．002）％船（0．008±0．004）％,P〈0．05。从出生时至生后21d,BPD组血浆VEGF水平均明显低于对照组。ROP组出生时至生后28d的EPCs水平与对照组差异无统计学意义,纠正胎龄36周时KDR＋CDl33＋和CD34＋KDR＋CDl33＋EPCs与对照组相比略有升高趋势。与对照组相比,IVH组生后不同时点的EPCs水平差异均无统计学意义。结论生后早期的EPCs和VEGF水平降低可能参与了早产儿BPD的发生,但其具体机制仍需进一步研究。     

2型登革病毒通过线粒体途径诱导EA.hy926细胞凋亡

 目的：探讨登革病毒诱导EA.hy926细胞(人脐静脉内皮细胞融合细胞株)相对活力的变化与线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,Δψm)改变及线粒体凋亡途径的关系。方法：用2型登革病毒(dengue virus type 2, DENV-2)感染EA.hy926细胞,MTT法检测感染前后EA.hy926细胞的相对活力,荧光显微镜和流式细胞术分别观察感染前后JC-1在EA.hy926细胞线粒体内的聚集情况以检测Δψm的改变,通过比色法检测caspase-9的活性变化。结果：DENV-2感染EA.hy926细胞24 h、36 h及48 h后,细胞活性受到显著抑制,550 nm处的A值均低于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);JC-1染色显示,感染后各时点,代表正常线粒体的红色荧光均较未感染组减弱,而代表Δψm下降的绿色荧光较未感染组逐渐增强。流式细胞术检测Δψm平均荧光密度比未感染组减低,差异有统计学意义。DENV-2 感染后早期即可出现caspase-9活性的上升,与未感染组相比,各时点的活性差异均有统计学意义(P<0.01)。结论：DENV-2感染EA.hy926细胞后可诱发Δψm下降,增强caspase-9活性,进而启动线粒体的凋亡途径。     

以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉内皮细胞构建实验性角膜后板层

 目的： 探讨以异种后弹力膜/基质为载体诱导人脐静脉内皮细胞向角膜内皮细胞分化的可行性及移植术后在活体的生理功能。方法：体外分离培养脐静脉内皮细胞作为诱导移植的种子细胞;取当地质检合格的猪眼球以直径6.2 mm、厚100 μm、冷冻脱水进行角膜深板层载体的制备;接种经CM-DiI荧光标记的第2~3代人脐静脉内皮细胞于载体的后弹力层面,体外培养7~10 d行细胞形态、密度、组织学和扫描电镜观察,待细胞与后弹力层面融合形成单层后,用于兔角膜移植。受眼：正常健康新西兰大白兔24只（24眼）,实验组（人脐静脉内皮细胞移植组）12眼,对照组（单纯猪角膜深板层移植组）12眼,全角膜范围去除术眼内皮细胞,实施移植手术。结果：人脐静脉内皮细胞在猪后弹力膜/基质载体上贴附生长,形成紧密连接的单层,形态近似六角形,呈铺路石状分布,具有正常兔角膜内皮细胞的超微结构。术后8周实验组角膜基本透明,周边角膜略有水肿。对照组单纯猪角膜深板层移植后,移植角膜明显水肿、混浊。结论：以异种角膜后弹力膜/基质为载体培养的人脐静脉内皮细胞,行异种异体移植后,能够在活体上成活,并能维持角膜透明,具有正常角膜内皮细胞的生物学功能。深板层角膜内皮移植术是体外培养血管内皮细胞移植的一种有效术式。     

五种药用石斛内生真菌抑制HIV-1整合酶活性研究

目的 评价5种药用石斛内生真菌发酵产物抑制HIV-1整合酶的活性.方法 将分离自石斛的202株内生真菌提取物共404个采用高通量ELISA法评价其抑制HIV-l整合酶活性;对抑制活性大于100％的样品进行量效关系考察并进行体外抑制肿瘤细胞活性筛选.结果 筛选得到19个对HIV-l整合酶抑制活性大于80％的样品,其中样品5119F、5297F、5097F、5140J和5211F的抑制率分别达到117.96％、113.53％、108.62％、103.74％和109.02％,其对应的IC50值分别为0.02024、0.003125、0.00862、0.01007 和 0.01192 mg/ml.结论石斛属药用植物内生真菌是一个潜在的、丰富的用于筛选HIV-1整合酶抑制剂的资源库,值得进一步研究和开发.     

肺癌早期诊断标志物研究进展

肺癌已成为绝大多数国家主要癌症死亡原因,早期诊断和早期治疗尤为重要.肺癌的发生是多因素致病、多基因参与和多阶段发展的复杂过程,近年来国内外学者对有关肺癌早期诊断的分子标志物做了大量有益的探索.本文将近年来肺癌早期实验室诊断的方法及进展做一综述.     

基于单水平集函数的细胞分割算法

目的：由于细胞图像十分复杂,传统的基于像素或者边界的图像分割方法难以精确的实现细胞分割。因此,需要设计一种可以实现细胞图像精确分割的方法。方法：结合大津分割算法和主动轮廓模型的优点,设计出一种基于单水平集函数的细胞分割算法,首先对细胞图像大津分割,其结果作为水平集函数的初始值,然后使用迭代法对水平集函数演化。采用MATLAB对显微镜下获取的细胞图像进行试验,将本文改进后的算法与常规的算法进行了对比。结果：与传统的水平集分割算法相比,本文方法对细胞图像分割结果更加准确,迭代次数减少一半左右,因此分割时间也减少了一半左右。结论：结合细胞图像的结构特点,利用大津分割结果作为主动轮廓模型的初始值,可有效解决主动轮廓模型因为初始值设置不当导致的分割缺陷问题,水平集函数能够跟踪拓扑结构变化,具有计算精度高、算法稳定、优化边界清晰光滑等优点,在本文中得到了充分的应用。因此本文所提出的算法能够高效地实现细胞图像的分割。