TolC-Dependent Modulation of Host Cell Death by the Francisella tularensis Live Vaccine Strain

Francisella tularensis is a facultative intracellular, Gram-negative pathogen and the causative agent of tularemia. We previously identified TolC as a virulence factor of the F. tularensis live vaccine strain (LVS) and demonstrated that a ΔtolC mutant exhibits increased cytotoxicity toward host cells and elicits increased proinflammatory responses compared to those of the wild-type (WT) strain. TolC is the outer membrane channel component used by the type I secretion pathway to export toxins and other bacterial virulence factors. Here, we show that the LVS delays activation of the intrinsic apoptotic pathway in a TolC-dependent manner, both during infection of primary macrophages and during organ colonization in mice. The TolC-dependent delay in host cell death is required for F. tularensis to preserve its intracellular replicative niche. We demonstrate that TolC-mediated inhibition of apoptosis is an active process and not due to defects in the structural integrity of the ΔtolC mutant. These findings support a model wherein the immunomodulatory capacity of F. tularensis relies, at least in part, on TolC-secreted effectors. Finally, mice vaccinated with the ΔtolC LVS are protected from lethal challenge and clear challenge doses faster than WT-vaccinated mice, demonstrating that the altered host responses to primary infection with the ΔtolC mutant led to altered adaptive immune responses. Taken together, our data demonstrate that TolC is required for temporal modulation of host cell death during infection by F. tularensis and highlight how shifts in the magnitude and timing of host innate immune responses may lead to dramatic changes in the outcome of infection.     

整夜多导睡眠图记录在酒依赖患者诊断中应用

目的：观察自然夜间多导睡眠图（PSG）对酒依赖（CA）的辅助诊断价值。方法：应用日本Nihon Kohden公司的Neurofax-1518K多导睡眠生理仪,采用眼电图和下颌肌电图及脑电图技术,对25例经戒断后的酒依赖患者和23名正常对照者进行PSG整夜监测。结果：与健康男性组比较,酒依赖组睡眠潜伏期延长（NC组18．7±8．9分,CA组31．5±14．3分,P〈0．01）,Ⅰ期睡眠增加（NC组9．1±1．8％,CA组19．9±7．4％,P〈0．05）,睡眠效率降低’（NC组95．1±7．8％,CA组81．5±11．3％,P〈0．01）,快速眼动潜伏期前移（NC组89．4±13．1分,CA组74．9±21．4分,P〈0．05）。结论：长期滥用酒精会引起睡眠生理障碍,而睡眠障碍又会加重酒依赖躯体功能的变化。     

不同树脂黏结剂对纤维桩冠向微渗漏及黏结强度的影响

背景：目前国内外对全酸蚀、自酸蚀及自黏结树脂黏结剂对纤维桩的冠向微渗漏及黏结强度影响的研究仍存在差异。 目的：评价全酸蚀、自酸蚀及自黏结3种树脂黏结剂对纤维桩黏固后冠向微渗漏及黏结强度影响。 方法：将32颗人离体上前牙随机分成5组,其中3组为实验组,2组为对照组。实验组离体牙经根管预备后,选用全酸蚀、自酸蚀及自黏结3种树脂黏结剂分别黏结直径为1.4 mm的玻璃纤维桩。体视显微镜下观察试件各剖面的微渗漏情况,再将实验组试件沿垂直牙长轴方向切成厚度为2 mm的薄片,万能材料测试机进行微推出实验,并观察试件断裂方式。阳性对照组不进行根管预备,根部涂布指甲油,冠部直接暴露于染色剂中;阴性对照组不进行根管预备,树脂覆盖根管口,将牙体整体涂布指甲油后黏蜡包埋至截面下1 mm。 结果与结论：各种树脂黏结剂均存在微渗漏现象,其中全酸蚀树脂黏结剂的微渗漏程度最轻,自酸蚀树脂黏结剂的微渗漏程度最重。3种树脂黏结剂间的微渗漏程度差异有显著性意义(P < 0.05)。黏结剂间的黏结强度由高到低分别为全酸蚀树脂黏结剂、自酸蚀树脂黏结剂、自黏结树脂黏结剂,3种黏结剂的黏结强度差异有显著性意义(P < 0.05)。试件的主要断裂方式为黏结剂/纤维桩间断裂及混合破坏。说明全酸蚀树脂黏结剂与牙本质结合紧密,与自酸蚀树脂黏结剂、自黏结树脂黏结剂比较在微渗漏程度及黏结性能方面显示出优越性。     

合并尺骨干经尺骨鹰嘴骨折并肘关节前脱位的手术治疗

目的探讨双钢板联合克氏针张力带钢丝内固定术治疗合并尺骨干经尺骨鹰嘴骨折并肘关节前脱位的临床疗效。方法回顾性研究。纳入2014年9月—2017年9月唐山市第二医院创伤骨科收治的合并尺骨干经尺骨鹰嘴骨折并肘关节前脱位患者21例,其中男13例、女8例,年龄36~64岁(平均50.5岁)。患者均采用尺骨鹰嘴锁定钢板及重建钢板联合克氏针张力带钢丝内固定术治疗,术后给予抗感染和消肿治疗。术后定期拍摄肘关节正侧位X线片,观察骨折愈合及内固定情况;观察患者肘关节屈伸活动度及前臂旋前旋后角度;术后12个月,采用Broberg-Morrey评分评价患肢功能。结果21例患者手术均顺利完成。术后均获得随访,随访时间为12~24个月,平均16.5个月。患者均获得骨性愈合,骨折愈合时间为2~4个月(平均3.1个月)。随访期间患者无感染、医源性神经损伤、骨折不愈合、内固定断裂失效、肘关节脱位等并发症发生。术后12个月Broberg-Morrey评分为78~100(90.0±5.5)分,患肢功能优12例、良7例、可2例,优良率为90.5%。结论双钢板联合克氏针张力带钢丝内固定治疗合并尺骨干经尺骨鹰嘴骨折并肘关节前脱位,骨折愈合率高,肘关节功能恢复良好。     

143例晚期喉癌患者的临床特征及生存分析

目的 总结143例晚期喉癌患者的临床特征,分析预后的影响因素。方法 回顾性分析2010年1月-2016年12月经中国人民解放军总医院治疗的143例晚期喉癌患者的临床资料。其中,男135例(94.4%),女8例(5.6%);年龄35~79岁,中位年龄58岁。依据患者治疗方案不同分为2组:手术联合术后放化疗组106例和非手术综合治疗组37例。收集患者基本临床情况、治疗、随访及生存情况;生存率及单因素生存分析采用Kaplan-Meier法和log-rank检验,多因素生存分析采用Cox比例风险回归模型。结果 143例晚期喉癌患者的5年总体生存率为67.9%。单因素分析显示,影响晚期喉癌患者预后的临床因素有年龄、临床分期、T分期及肿瘤分化程度等(P值均<0.05);Cox模型多因素分析显示,患者年龄、临床分期、肿瘤分化程度及治疗方式是影响预后的独立危险因素(P值均<0.05)。T₄期、临床Ⅳ期患者采用手术联合术后放化疗5年生存率分别为62.2%和59.5%,明显好于非手术综合治疗的18.2%和41.4%,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 晚期喉癌患者预后相对较差,影响患者预后的因素包括患者年龄、临床分期、肿瘤分化程度及治疗方式等。对于临床Ⅳ期、尤其是T₄期患者,采取手术联合术后放化疗可以获得相对较好的预后。     

食管异物合并严重并发症的临床治疗分析

目的 探讨食管异物合并严重并发症的治疗方法。方法 回顾性分析解放军总医院第一医学中心耳鼻咽喉头颈外科2014年7月-2018年7月收治的23例合并食管穿孔、颈胸部感染等严重并发症的食管异物患者的临床资料,其中男11例、女12例,年龄2~87岁,病程2～11 d。术前CT扫描评估异物位置、食管损伤及周围炎症情况,其中异物位于第一狭窄16例、第二狭窄4例、第三狭窄1例及第四狭窄2例,合并食管穿孔23例、食管周围炎17例、食管周围脓肿3例、颈部脓肿2例、纵隔脓肿1例。23例中,行经硬性食管镜异物取出术17例、颈侧切开探查异物取出术5例、开胸探查异物取出术1例,围手术期配合胃肠减压、抗感染、营养支持等综合措施治疗。术后根据Stooler分级标准评价食管损伤后食管狭窄程度。结果 本组23例均顺利完成手术;经手术及围手术期综合治疗,均顺利拔除鼻饲管,行颈侧切开和开胸探查的患者均顺利拔除伤口引流管,均痊愈出院。1例患者于术后1个月并发颈段食管狭窄Ⅱ级,行食管扩张治疗后恢复正常。患者出院后随访3～5个月,23例均正常进食普通饮食,标准食管狭窄程度Stooler分级均为0级。结论 伴有严重并发症的食管异物应依据异物嵌顿部位及患者临床表现采取不同的手术方法取出异物,同时给予围手术期胃肠减压、抗感染、营养支持等综合治疗措施,多学科联合施救是挽救患者生命的重要举措。     

Control of degradation rate and hydrophilicity in electrospun non-woven poly(D,L-lactide) nanofiber scaffolds for biomedical applications

Typical properties of poly(D,L-lactide) (PLA)-based scaffolds (films and foams), such as long degradation time, mechanical stiffness and hydrophobicity, are sometimes not suitable for biomedical applications. These properties can be substantially altered by electrospinning of PLA blends with miscible poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) random copolymers, poly(lactide-b-ethylene glycol-b-lactide) (PLA-b-PEG-b-PLA) triblock copolymers, and a lactide (used as a hydrolytic catalyst). Electrospun scaffolds based on the multi-component PLA blends, comprised of randomly interconnected webs of sub-micron sized fibers, have a bulk density of 0.3-0.4 g/cm3. In this study, the concentration effects of PLA-b-PEG-b-PLA triblock copolymer and lactide on the cell proliferation and the hydrophilicity of electrospun scaffolds were investigated. Based on in vitro degradation study, we found that the electrospun scaffold having PLA (40 wt%), PLGA (LA/GA=50/50, 25 wt%), PLA-b-PEG-b-PLA (20 wt%), and lactide (15 wt%) underwent a rapid weight loss of approximately 65% in 7 weeks. The hydrophobicity of this membrane, as determined by contact angle measurements in a cell buffer solution, decreased by approximately 50% from 105 degrees (of an electrospun PLA scaffold) to 50 degrees. The selection of suitable chemical compositions in conjunction with the non-invasive electrospinning process is useful in the production of a new kind of biodegradable scaffolds suitable for different biomedical applications such as cell storage and delivery as well as prevention of post-surgical adhesion because of their porosity, mechanical flexibility and tunable biodegradability.     

银川地区持续性咳嗽儿童百日咳博德特菌感染临床调查

目的了解银川地区持续性咳嗽儿童百日咳博德特菌感染现状及感染患儿的临床特点。方法随机选取银川地区≥2岁健康儿童292例为正常对照组,选择同期年龄≥6岁持续性咳嗽儿童157例作为可疑百日咳组,应用ELISA法测定两组儿童血清特异性百日咳博德特菌毒素IgG抗体(PT IgG),可疑百日咳组患儿留取鼻咽拭子进行百日咳博德特菌多重PCR检测及分离培养。结果在可疑百日咳患儿中百日咳博德特菌感染率为2.6%(4/157),其中6~8岁组为1.6%(1/63),~10岁组2.8%(1/36),~12岁组2.5%(1/34),~14岁组4.2%(1/24),各组间差异有统计学意义(χ2=363.7,P<0.05)。正常对照组儿童血清PT IgG平均几何浓度(GMC)为1.3 FDA-U/ml,其中2～4岁组为2.5 FDA-U/ml,高于其他年龄组(H=25.6,P<0.01),~14岁正常对照组儿童中PT IgG>30 FDA-U/ml者占12.5%,和其他年龄组相比差异无统计学意义(χ2=6.66,P>0.05)。结论百日咳博德特菌感染仍是银川地区持续性咳嗽儿童病因之一。由于本地区健康儿童中百日咳保护性抗体水平较低,有必要增加百日咳疫苗预防接种。     

乳腺癌细胞动力学指标与相关基因表达、突变的关系

目的 探讨乳腺癌细胞动力学及凋亡与相关基因表达、突变的关系。方法 采用流式细胞术检测54例乳腺癌DNA指数(DI)、S期细胞比例(SPF)、细胞增殖指数(PI)及细胞凋亡指数(AI)，免疫组织化学法检测原癌基因c—erbB-2、Bcl-2、抑癌基因p53，增殖细胞核抗原PCNA、Ki67及托普DNA酶Ⅱ(TopoⅡ)的表达，PCR—SSCP法检测p53点突变及突变部位、类型；结果 高DI、异倍体率、SPF、PI、AI与c—erbB-2、p53、PCNA、Ki67、TopoⅡ高表达相关。低DI、SPF、PI、AI与Bcl-2高表达相关。高DI、SPF、PI、AI与p53高突变相关，高AI与p53突变类型之一——杂合性缺失(LOH)相关。结论 乳腺癌细胞动力学及凋亡的异常与相关基因的异常表达及突变密切相关。     

一种新的鸟氨酸氨基甲酰转移酶基因突变E122G的鉴定

目的：测定1个迟发型鸟氨酸氨基甲酰转移酶（ornithine transcarbamylase,OTC)缺乏症的中国汉族家系的基因突变及患者OTC基因外显子序列。方法：用聚合酶链反应－单链构象多态性结合PCR产物直接测，鉴定其突变类型。结果：在该家系患者OTC基因中确认了1个新的错义突变E122G，位于第4外显子的保守残基（GAA→GGA）。结论：OTC基因中E122G突变引起迟发型OTC缺乏症，是1个尚未报道的突变。