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结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 构建结核分枝杆菌Ag85B/GSF融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达。方法 以质粒pUC18/Ag85B为模板,用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因,扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点,下游含有SalⅠ酶切位点;将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中,构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E.coli B121,筛选阳性重组子,限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Westem blot鉴定结果。结果 成功构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并表达出Mr约56000大小的Ag85B/GSY融合蛋白,表达量占总菌体的30%。结论 为进一步进行纯化Ag85B蛋白和研究其在膀胱肿瘤治疗中的作用奠定了基础。 相似文献
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老年人颅脑外伤后缺血性脑卒中发作特点及治疗 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨老年人颅脑外伤后缺血性脑卒中发作特点及个性化治疗方案。方法针对7例颅脑外伤后急性期出现缺血性脑血管病症状的老年患者,通过脑血管造影检查分析其发病原因并根据不同的脑血管特点决定治疗方案。结果大多数患者(6/7)受伤前已存在不同程度的颅内外血管狭窄、血管壁溃疡以及附壁血栓形成等改变,提示脑缺血发作主要与这些病变为基础的脑血流下降、血栓脱落等因素密切相关。而外伤后脑灌注降低、脑血管痉挛是脑缺血发作的诱发因素。结论老年人外伤后的缺血性脑卒中发作主要与原有的脑血管基础疾病有关,预防和治疗老年人外伤后缺血性脑卒中发作,应基于这些病变特征并选择个体化治疗方案。 相似文献
15.
目的 比较文拉法辛与三环抗抑郁药治疗抑郁症临床痊愈率的差异。方法 应用循证医学的Me-ta分析,采用固定效应模型(fixed effects model,FEM)法对符合标准的16项对照研究文献进行评价。结果 文拉法辛与三环抗抑郁药治疗抑郁症的临床痊愈率不同,差异有显著性(χ2=4.773,df=1,P<0.05);综合的ORs=1.36,95%CI为1.04~1.78。提示文拉法辛治疗抑郁症的临床痊愈率是三环抗抑郁药的 1.36倍。结论 治疗抑郁症,文拉法辛比三环抗抑郁药有更可靠的临床痊愈率。 相似文献
16.
生长抑素受体显像近年来研究较多,depreotide已成为其研究热点之一。Depreotide在诊断与鉴别诊断临床常见的孤立性肺结节方面有其独特优势;此外,^99mTc—depreotide生长抑素受体显像在乳腺癌、甲状腺癌、淋巴瘤等肿瘤及甲状腺相关性眼病等非肿瘤性疾病也有一定应用前景。 相似文献
17.
目的研究氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PCI2细胞内Ca^2+浓度波动方式的影响。方法使用含25ng/LNGF的DMED培养基在多聚赖氨酸包被的培养皿中培养PCl2细胞;与终浓度10gmol/L的Ca^2+指示剂Fluo-3 AM ester共孵育30min洗涤后,加入终浓度50gmol/L荷包牡丹碱;在激光共聚焦显微镜选定多个细胞分别测定荧光强度的变化;随后加入氯胺酮,记录细胞荧光强度的改变。在试验结束前依次加入Triton X-100和EGTA分别记录单个细胞最大荧光强度(Fmax)和最小荧光强度(Fmin),以计算细胞内Ca^2+的相对强度。结果氯胺酮不改变荷包牡丹碱诱导PCl2细胞内Ca^2+浓度波动的基线,但抑制细胞内Ca^2+浓度升高的幅度(P〈0.05),缩短相邻波峰间的时间间隙(P〈0.05)。结论氯胺酮不仅改变荷包牡丹碱诱导PCl2细胞内Ca^2+浓度升高的幅度,而且改变Ca^2+浓度波动的周期。 相似文献
18.
目的 探讨过氧化物酶体增殖物对小鼠原代肝细胞生长周期的影响和配体过氧化物酶体增殖物激活受体(proxisome proliferators—activated receptor,PPAR)alpha在肝癌形成过程中的变化。方法 在小鼠原代肝细胞中加入PPAR配体Wy-14,643,经不同培养时间后,应用流式细胞仪、逆转录-聚合酶链反应及Western blot等方法检测细胞增殖和凋亡,细胞周期蛋白p21WAFI、cyclinD1的mRNA及蛋白的变化情况。结果 在小鼠原代肝细胞中加入Wy-14,643培养2、4、6d,S+G2/M期细胞比例分别为(42.3±1.2)%,(50.3±2.1)%,(52.1±2.3)%,细胞凋亡率分别(9.0±0.2)%,(7.9±2.O)%,(7.4±1.3)%,与未加药组相比,细胞增殖明显增高(P〈0.05),凋亡明显减少(P〈0.05);各加药组cylinD1 mRNA和蛋白的表达也比对照组明显增高(P〈0.05);各加药组p21^WAF1 mRNA与对照组相比表达无显著变化(P〉0.05),第4天开始出现p21^WAF1。蛋白的表达显著增加(P〈0.05)。结论 过氧化物酶体增殖物通过其配体PPARα引起细胞周期蛋白的改变,导致正常细胞周期信号的传导紊乱,引起细胞异常的增殖和凋亡,从而有可能诱发肿瘤。 相似文献
19.
磁共振扩散加权成像对超急性期、急性期脑缺血的应用价值 总被引:3,自引:0,他引:3
磁共振扩散加权成像(DWI)可以快速、无创地反映脑缺血区分子水平发生的微观变化,为临床提供信息,本文对其在超急性期、急性期脑缺血的应用价值和限度进行综述。 相似文献
20.
目的探讨改良神经刺激仪对神经定位的效果,以防止乳腺癌手术对运动神经的损伤,提高手术成功率及术后生活质量。方法选择ASAⅠ~Ⅱ级,乳腺癌预计手术中难以辨认神经血管走行的女性患者20例。应用Stimuplex HNS 12/BRAUN周围神经刺激仪,改良为双极刺激电极在术前、术后均对胸背神经支配的背阔肌、胸长神经支配的前锯肌以及胸前神经支配的胸肌进行肌电检测,以确定手术中神经损伤情况。结果18例患者手术前胸大肌动作电位为(1.59±0.4)mv,手术后为(1.58±0.3)mv,前后比较差异无统计学意义(P〉0.05)。手术前神经传导速度为(40.57±2.33)m/s,手术后为(40.43±2.18)m/s,前后比较差异无统计学意义(P〉0.05)。仅2例出现轻度神经损伤。结论改良神经刺激仪能准确定位神经,避免了神经的直接损伤,基本上达到了肌电图仪的神经探测功能。 相似文献