基于高通量测序技术研究药食两用薏苡仁中污染真菌多样性

目的:调查药食两用薏苡仁中污染真菌多样性,为其安全使用提供参考依据。方法:收集薏苡仁样品18批,提取真菌DNA并扩增ITS2序列,基于Illumina MiSeq PE250平台进行高通量测序。结果:共检测到4门18纲44目99科149属的真菌,子囊菌门Ascomycota是最优势菌门,镰刀菌属Fusarium(3.05%~60.32%)是属水平最优势属,其次是曲霉属Aspergillus(2.20%~45.44%)、白僵菌属Beauveria(0.07%~63.21%)、链格孢属Alternaria(0.80%~11.92%)、Arachnomyces(0.03%~39.36%)和青霉属Penicillium(0.24%~8.03%)。此外,共检测到5种潜在产毒真菌,分别是烟曲霉A.fumigatus、土曲霉A.terreus、梨孢镰刀菌F.poae、囊状青霉P.capsulatum和展青霉P.paxilli。结论:高通量测序技术可以快速有效地检测薏苡仁中污染真菌种类,为薏苡仁污染真菌毒素提供风险预警。     

RRLC法同时测定橘红痰咳颗粒中苦杏仁苷和柚皮苷

目的 建立用快速高分离度液相色谱( RRLC)同时测定橘红痰咳颗粒(化橘红、苦杏仁、百部、水半夏、茯苓、白前、五味子、甘草)中苦杏仁苷和柚皮苷的方法.方法 采用BDS HYPERSIL C18(4.6 mm× 100 mm,2.4 μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1％磷酸,梯度洗脱;体积流量为2.0 mL/min;检测波长为207 nm;柱温为30℃;进样体积为2.5 μL.结果 样品中苦杏仁苷、柚皮苷在6min内完全分离并对其进行了定量测定,苦杏仁苷、柚皮苷进样量分别在0.041 68 ～0.4168μg、0.063 06～0.630 6 μg范围内有良好的线性关系(r=0.9999).平均回收率(n=6)分别为99.8％,101.0％:RSD分别为0.5％,1.0％.结论 RRLC法可大幅提高苦杏仁苷和柚皮苷的分析速度,同时减少了溶剂消耗,在多组分复杂体系的快速分析中仍然可以保持出色的分离重现性,可作为传统HPLC方法的一种更新、替代方法.     

基于淫羊藿黄酮类化合物的体内代谢阐述其抗骨质疏松药效物质基础

全面系统阐述了淫羊藿饮片中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷I、淫羊藿苷5种主要黄酮类化合物的体内代谢过程,整理了5种黄酮类化合物的体内代谢产物与代谢途径;基于5种黄酮类化合物主要体内代谢产物,总结其共性代谢规律和共有代谢产物,并结合淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷、宝藿苷I、淫羊藿素的抗骨质疏松药理作用及其作用机制,初步推断淫羊藿黄酮类化合物中的次糖苷和苷元是淫羊藿黄酮类化合物的主要体内代谢产物,次糖苷和苷元也可能是淫羊藿总黄酮抗骨质疏松重要药效物质基础。为淫羊藿饮片及淫羊藿黄酮类化合物抗骨质疏松药效物质基础及机制研究和抗骨质疏松有效药物研发提供了重要依据和指导。     

地黄饮子的GC-MS指纹图谱研究

目的 对地黄饮子(熟地黄、山茱萸、五味子、巴戟天、麦冬等)中挥发性成分进行分析,建立其挥发性成分的气相色谱-质谱联用(GC-MS)指纹图谱.方法 采用GC-MS联用技术对自制10批地黄饮子的挥发性成分进行分析,建立其指纹图谱,确定共有色谱峰并对其进行归属认定.结果 10批自制地黄饮子指纹图谱中共标定18个共有色谱峰,分别由五味子、石菖蒲、远志和肉桂四味药材贡献产生.结论 地黄饮子的GC-MS指纹图谱特征性及专属性强,该指纹图谱可作为地黄饮子挥发性成分质量控制的稳定方法.     

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术( UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取( SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析.方法 用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据.初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况.结果 厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物.结论 厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础.     

中药提取物逆转K562/ADM细胞的耐药作用及其分子机制的探讨

Objective To investigate the reversal effect of the monomer of traditional Chinese medicine on muhidrug resistance(MDR) and its possible mechanism in K562/ADM cell line in vitro. Methods With different concentrations of baicalin, geniposide administered to K562/ADM cells, the proliferation of K562/ ADM cells was detected by the MTY assay. Expression of mdr-1 mRNA, Topo Ⅱ mRNA was measured by semi-quantitive RT-PCR. Results Thatbaicalin and geniposide could increase the sensitivity of K562/ADM cells to adriamycin, multiples of reversion were 1.95 times and 1.46 times. The proliferation of K562/ADM cells was in-hibited obviously by baicalin and geniposide, the level of mdr-1 mRNA expression was down-regulated and the Topo Ⅱ mRNA was up-regulated(P<0.01 ). Conclusion Baicalin and geniposide may reverse the multi-drag-resistance of K562/ADM cells, which was related to the down-regulation of mdr-1 expression and up-reg-ulation of Topo Ⅱ beta expression.     

肺癌术中肺血管结扎顺序对肺癌微转移影响的研究

目的:探讨肺癌患者术中肺血管结扎顺序对肺癌微转移影响及临床意义.方法:60例非小细胞肺癌手术患者,术前随机分为先扎动脉组和先扎静脉组,每组30例,术前、术中和术后取患者外周静脉血,巢式RT-PCR方法检测外周血中CK19 mRNA、LUNX mRNA表达.选取10名健康成年人(健康组)外周静脉血做阴性对照.结果:术前先扎动脉组患者外周血中CK19 mRNA、LUNX mRNA表达率与健康组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),术前先扎静脉组患者外周血中CK19 mRNA、LUNX mRNA表达率与健康组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而先扎动脉组和先扎静脉组间术前比较差异均无统计学意义(χ2=0.000,P=1.000),但术中与术后比较差异均有统计学意义(P<0.05).CK19 mRNA、LUNX mRNA在术前、术中、术后间差异有统计学意义(P<0.05),而CK19 mRNA、LUNX mRNA两者之间差异无统计学意义(P>0.05).腺癌与鳞癌间差异无统计学意义(P>0.05).Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肺癌间差异有统计学意义(P<0.05).结论:肺癌术中先结扎肺静脉可减少癌细胞的微转移.CK19 mRNA、LUNX mRNA可以作为检测肺癌外周血中癌细胞微转移的2个指标,预测肺癌微转移.     

多种类生物医学组织衍射增强成像(DEI)的定量研究

探索DEI显示多种类生物医学解剖组织层次与病变细微结构的潜力。在北京同步辐射装置(BSRF)形貌站4W1A束线上,对42个源于人体6个系统、12个脏器、6种组织类型的手术标本样品及8个取自动物病理模型样品进行了包括X-ray吸收衬度成像(XACI)与硬X-ray衍射增强成像(DEI)两种机制下的多次多类对比性二维DEI(2D-DEI)成像扫描;对所获影像予以半定量与定量两种不同方法评价。首次以2D-DEI方式直观显示了人眼环、胃肠道、肾上腺、胰腺、脾脏、子宫、胎盘等解剖结构与病变组织的微观改变,最高影像空间分辨率达40μm,衬度分辨率达0.15~0.8。表明较之XACI单一衬度机制像质,基于DEI多衬度机制像的影像像质显著优越,十分适于展示多由低Z轻元素软组织构成的位相信息丰富的多种类生物医学样品的组织层次与微观结构。     

骨桥蛋白与MMP-9在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 :研究骨桥蛋白和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测胃癌组织中骨桥蛋白和MMP 9的表达。结果 :60例胃癌组织中骨桥蛋白和基质金属蛋白酶 9表达的阳性率分别为 73 3% ( 4 4/ 60 )、66 7% ( 4 0 / 60 ) ,骨桥蛋白和基质金属蛋白酶 9的表达与肿瘤浸润深度、肿瘤直径、淋巴结转移程度及有无远处转移有关。骨桥蛋白和MMP 9的表达均与肿瘤的分化程度无关。结论 :骨桥蛋白和MMP 9在胃癌组织中表达均较正常胃组织增强 ,能够作为反映肿瘤的生物学特性 ,评估预后的重要参考指标。二者表达有协同作用     

乳腺球蛋白在术前乳腺癌和腋窝淋巴结细针穿刺吸取组织中的表达及临床意义

目的 探讨乳腺球蛋白（mammaglobin,MAM）在术前乳腺癌及腋窝淋巴结细针穿刺吸取组织中的表达及临床意义.方法 对91例原发性乳腺癌行术前细针穿刺,将吸取的组织制备涂片,采用免疫组织化学方法（EnVision法）检测MAM表达,观察MAM表达与临床病理指标的关系.同时另收集15例原发性肺癌腋窝淋巴结转移患者,分析乳腺癌腋窝淋巴结转移、乳腺癌增生性淋巴结炎和肺癌腋窝淋巴结转移三者间术前腋窝淋巴结MAM表达的区别.统计分析采用χ2检验.结果 在91例原发性乳腺癌患者中MAM的阳性表达率为74.72%（68/91）.MAM的阳性表达与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、组织学分级、细胞学分级有关（P〈0.05）,与患者的年龄、肿瘤大小、淋巴结是否转移及HER-2状态无关（P〉0.05）.腋窝淋巴结观察结果显示,MAM在乳腺癌腋窝淋巴结转移患者中呈阳性表达,在乳腺癌增生性腋窝淋巴结炎和肺癌腋窝淋巴结转移患者中均为阴性表达.结论 MAM可表达于原发性和转移性乳腺癌,细针穿刺细胞学检查结合MAM的测定对乳腺癌的诊断及鉴别具有一定辅助判断价值.MAM阳性表达与ER、PR状态、细胞学分级、组织学分级有关,有利于了解肿瘤的生物学指标及判断预后.