肝内肌成纤维细胞的来源及其在肝纤维化中作用的研究

肝脏慢性损伤,包括病毒性肝炎、酗酒、药物作用、代谢性疾病等各种致病因子导致肝内结缔组织异常增生,肝内细胞外基质过度沉淀形成肝纤维化,在此过程中分泌胶原能力更强且具有收缩能力的肌成纤维细胞的大量生成被认为是肝纤维化发生与发展的关键环节。目前对于肝纤维化时肌成纤维细胞来源的认识尚没有完全明了,在肝纤维化发生时肝星状细胞活化为肌成纤维细胞的主要来源;而骨髓间充质干细胞、上皮细胞经上皮间质转化及一些仍具有分化能力的外周血细胞在一定条件下也可转变为肌成纤维细胞并发挥作用。该文就近年来此方面的研究作一综述。     

基于网络药理学的不同方法炮制的何首乌肝毒性机制探讨及实验验证

目的 基于网络药理学及实验验证探讨制首乌肝毒性的机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、中医药整合药理学研究平台（TCMIP v2.0）收集制首乌的活性成分和作用靶点。通过GeneCards和OMIM数据库获取肝损伤相关的靶点。用Venny图筛选获得两者的共同靶标后,利用STRING数据库进行蛋白质相互作用（PPI）网络分析,用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点网络,并且利用R语言进行基因本体论（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集。利用体内实验进一步验证何首乌不同炮制品的肝毒性。结果 分别获取制首乌活性成分30个,肝毒性相关靶点527个,制首乌活性成分与肝损伤的共同靶点48个,包括JUN、MAPK1、CYP3A4等。KEGG通路分析筛选了135条相关信号通路,显示非酒精性脂肪肝通路和TNF信号通路等可能在制首乌肝毒性中起关键作用。体内实验表明,炮制后的何首乌肝毒性有效减轻,以九蒸九晒法效果最好。结论 制首乌肝毒性具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,九蒸九晒法制首乌引起肝毒性的程度最轻。     

应用加巴喷丁与羟考酮治疗带状疱疹后神经痛的临床观察

目的评价加巴喷丁、羟考酮治疗带状疱疹后神经痛的临床疗效及药物不良反应。方法带状疱疹后遗神经痛（PHN）患者98例，根据随机数字表分为3组：加巴喷丁组34例单纯口服加巴喷丁胶囊；羟考酮组31例单纯口服盐酸羟考酮治疗；联合治疗组33例同时服用加巴喷丁胶囊、羟考酮治疗。治疗1d、3d、7d、14d和28d后由专人采用视觉模拟评分（VAS）和睡眠质量评分（QS）分别评估患者的疼痛程度和睡眠质量，记录相关不良反应的发生率。结果与治疗前相比，治疗后各组患者VAS评分明显下降，QS评分显著升高，尤其是联合治疗组患者，其减轻疼痛、改善睡眠的程度和速度均显著优于加巴喷丁组和羟考酮组，其显效率、有效率分别达88．3％和100％。结论加巴喷丁、羟考酮均能显著改善PHN患者的临床症状，而二者联合使用则能更迅速、更有效地控制PHN患者的疼痛，显著改善睡眠，降低药物不良反应，增加患者的治疗信心和依从性，是目前临床治疗该病较为理想的方法，尤其适用于严重的PHN患者。     

HLA-E siRNA沉默肝癌细胞HLA-E基因的表达

目的针对HLA-EmRNA靶序列不同位点,设计合成多个siRNA链,定量分析其对HLA-E(+)肝癌BEL-7402细胞的基因沉默效率,筛选最佳抑制效果的siRNA。方法用IFN-γ(5×105IU·L-1)诱导BEL-7402细胞表达HLA-E基因,经流式细胞技术纯化后作为靶细胞。设计并合成3条HLA-E siRNA链(A、B、C),将各siRNA(0.1mmol·L-1)经脂质体Lipofectamin 2000转染至靶细胞。采用细胞免疫荧光、流式细胞技术、Western杂交、实时PCR等定量方法,比较48h后各siRNA的基因沉默效果,并观察HLA-E基因沉默对NK肿瘤细胞杀伤的影响。结果与空白对照、非特异组相比,3组(A、B、C组)HLA-E siRNA均明显抑制细胞HLA-E抗原、蛋白产物、mRNA、细胞表面HLA-E分子的表达(P<0.01),B、C组抑制效果接近90%,高于A组(P<0.01)。A、B、C组NK肿瘤杀伤率升高(P<0.01),而B、C组肿瘤杀伤效果高于A组(P<0.01)。结论经筛选的HLA-EsiRNA能特异、高效沉默肝癌细胞HLA-E基因表达,可能抑制其非经典HLA-Ⅰ途径免疫逃避,为肝癌"基因-免疫"治疗提供新的治疗策略。     

骨化三醇对腹透患者钙磷代谢及T淋巴细胞亚群的影响

目的 :了解骨化三醇 (1 ,2 5 (OH) 2 D3 ,罗钙全 )对腹膜透析患者钙磷代谢及免疫功能的影晌。方法 :观察 3 7例腹膜透析 (PD)患者服用骨化三醇前后血清T细胞亚群、IL 8以及血免疫反应甲状旁腺激素 (iPTH)、钙、磷水平变化。结果 :用药前PD组血清T淋巴亚群的CD4/CD8低于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ,服用骨化三醇 4wk后 ,CD4/CD8从 0 .5 6±0 .1 0升至 0 .79± 0 .1 2 ;而iPTH显著降低 ,血钙显著升高 ,血磷明显下降。结论 :骨化三醇能改善PD患者钙磷代谢 ,进而改善其免疫功能     

细胞周期素E、D1与增殖细胞核抗原在肝癌中的表达及临床意义

目的研究肝癌组织中细胞周期素E（cyclinE）、细胞周期素D1（cyclinD1）与增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况,探讨其在肝癌发生发展中的作用及临床意义。方法用免疫组化链霉菌素一生物素（SP）法,对术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的60例肝癌组织及35例癌旁肝组织进行检测。结果cyclinE、cyclinD1与PCNA的表达在肝癌组织中高于癌旁肝组织（P〈0．01）,在分化差的和有转移的肝癌中表达高于分化好的和元转移的,而且cyclinE与cyclinD1的表达密切相关（P〈O．01）。结论cyclinE、cyclinD1与PCNA表达与肝癌的增殖、分化、转移有关,其表达状况可以作为判断恶性程度及预后的指标。     

冻干重组葡激酶对正常人凝血、纤溶系统影响的研究

目的　探讨冻干重组葡激酶 (r Sak)对正常人出、凝血及纤溶系统的影响 ,为进一步临床应用提供翔实的依据。方法　健康志愿者 2 0例静脉注射不同剂量r Sak(1、2 5、5、10、15mg) ,观察临床出血情况以及动态监测用药前后BT、BPC、APTT、PT、TT、Fg、D D、PL∶A、α2 PI∶A。结果　 2 0例中 4例有轻微出血 ,以皮肤粘膜为主 ,可自行止血 ,无 1例伴内脏出血。其中 3例牙龈渗血 ,2例穿刺部位出血。 4例有D D轻微异常 ,其余以上指标皆无变化。实验显示本药为高度选择性溶栓药 ,对正常人出凝血相无改变。结论　在本试验剂量范围内 ,该药是相对安全的 ,可很好耐受 ,但用于临床的最佳剂量有待进一步临床验证     

基于数学模型的非洛地平缓释片检验指标综合评价的探讨

目的为客观评价合格药品的生产质量状况,有效区分其存在的差异程度,通过建立一定的数学模型,对特定药品每一项可定量的检验指标进行综合评价。方法本数学模型将药品的检验指标参数以理论最佳点做理想值,以药品合格标准做下限值,转化成各指标的评价指数,并使各评价指数同量齐次;各检验指标的评价指数经过带权重的理想点法计算,得到综合评价结果;其中,运用专家经验评定法确定各检验指标的权重。结果数学模型确立后,尝试以非洛地平缓释片各项检验数据为例进行试评价,获得了较为符合客观实际的结果,说明了用数学模型评价药品检验的各项指标的可行性和可操作性,该方法也可以推广至其他药品检验指标的综合结果判断。结论利用数学模型对药品检验结果进行评价的方法,可以成为药品质量监督管理的新思路,也可以为药品按质定价提供参考性依据。     

A systemic route for drug loading to lymphatic phagocytes

Lymph nodes are primary germination and proliferation sites for many types of pathogens. Maintaining therapeutic levels of appropriate chemotherapeutic agents in the lymph node tissue is critical for the treatment of both infection and cancer. This study was intended to develop a systemic route for loading lymph node phagocytes with drugs, using a lymph node specific nanocarrier. The latter is assembled as a 10-15 nm particle with a drug-carrying core and a phagocyte-homing poly(1-->6)-alpha-d-glucose based interface. Biokinetics and microdistribution of the model carrier were investigated in vivo. Nanocarrier accumulation in lymph nodes reached 30-35% dose/g in central lymph nodes, with deposition in various phagocytic cell populations. The latter included cells harboring inhaled microparticles translocated to lymph nodes from the lungs. In view of the nanocarrier ability to transport and release significant amounts of various drug substances, the data suggests feasibility of systemic drug loading to lymphatic phagocytes and, through drug release, to the neighboring cells.     

RNA干扰survivin表达对喉癌细胞系Hep-2对紫杉醇敏感性的影响

目的 探讨运用RNA干扰技术阻断喉癌细胞系Hep-2中survivin基因的表达,并研究survivin基因沉默后Hep-2对紫杉醇敏感性的影响.方法 化学合成21bp目的基因siRNA片段,并将不同浓度的siRNA用脂质体法转染喉癌细胞系Hep-2.用空脂质体和GFP-siRNA作平行对照.通过蛋白印迹法检测survivin表达量的变化,MTT法检测转染后Hep-2细胞对紫杉醇敏感性的变化.结果 2 5nM和5 0nM的siRNA可以有效地阻断了Hep-2细胞survivin蛋白的表达;转染后Hep-2细胞在体外对紫杉醇的敏感性增加.结论 初步阐明survivin在喉癌细胞对紫杉醇敏感性中的作用,为进一步探讨survivin基因与喉癌的关系以及联合治疗研究奠定了基础.