藏西医结合治疗小儿支气管肺炎50例疗效观察

目的：观察藏西医结合治疗小儿支气管肺炎的临床疗效。方法：采集50例小儿支气管肺炎患者,予西医抗感染、纠正酸碱平衡紊乱、维持体液平衡治疗,需要时吸氧,同时服用藏药三臣散、肺热普清散,频咳者加“七味葡萄散”,均3次／d,0．5g／次口服单方或组方连服1周为1个疗程,2个疗程后观察疗效,与此同时依照藏医理论嘱患儿注意饮食起居。结果：痊愈45例,占90％显效3例,占6％;有效1例,占2％;无效1例,占2％;总有效率98％。结论：运用藏西医结合治疗小儿支气管肺炎疗效显著。     

小鼠LRP5基因负调控区分析

为研究小鼠LRP5基因-1 229 bp~-1 034 bp之间存在的负调控区,在此区域内构建了3种荧光素酶报告基因表达载体,即pGL3-1229(-1 229 bp~-914 bp),pGL3-1130(-1 130 bp~-914 bp)及pGL3-1051(-1 051 bp~-914 bp)。以PRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7,48 h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性。结果表明pGL3-1229质粒的相对荧光素酶活性是pGL3-1130的26%,有显著性差异。在-1 229 bp~-1 130 bp之间存在负调控元件,软件分析COUP可能是小鼠LRP5基因的负调控元件,有待进一步突变分析证实。     

sHLA-A*2402融合蛋白的制备与特性研究

本文用含有HLA-A*2402重链胞外段基因的质粒为模板进行PCR,利用下游引物拼接上依赖BirA的可生物化序列后,构建融合基因sHLA-A*2402-BSP,与质粒pET-21d重组后,在宿主菌E.coliBL21(DE3)中诱导表达。表达的融合蛋白与β2m及HLA-A*2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行复性折叠,形成HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,并用Westernblot和夹心ELISA法鉴定。证实成功地制备出sHLA-A*2402-生物素化序列融合蛋白并使之正确折叠复性。为研究在原核系统中表达、纯化与复性及体外构建MHCI类分子四聚体,探讨免疫识别机制奠定了基础。     

参环毛蚓体内核苷磷酸化酶的活性测定及动力学分析

目的 建立参环毛蚓体内嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）的检测方法,以肌苷为底物,评价该酶的活性。方法 采用HPLC法,色谱条件：Ecosil C18-AQ柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为10 mmol·L-1磷酸二氢铵缓冲液（pH4.5）和甲醇,梯度洗脱,流速为0.8 mL·min-1,柱温为室温,检测波长254 nm,用底物肌苷与组织粗蛋白提取液在室温孵育30 min,沸水煮5 min终止反应,12000 r·min-1离心10 min,取上清过滤后进行HPLC分析,以OriginPro 8.5软件作图,计算酶动力学参数。结果 酶反应中产物次黄嘌呤在0.5～40 μmol·L-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9996）;精密度小于3.5 %,回收率大于80 %。PNP酶动力学参数：Vmax为0.015 nmol·min-1·mg-1,Km为19.8 μmol·L-1。结论 成功构建了参环毛蚓体内次黄嘌呤代谢酶活性测定相关的实验体系,该法所得数据稳定可靠,可准确反映关键酶活性的动态变化。     

腹腔镜下消化性溃疡穿孔修补联合胆囊切除术17例临床分析

目的 总结消化性溃疡穿孔合并胆囊结石、胆囊炎的腹腔镜同期手术诊治经验.方法 对该院2005年3月～2009年5月收治的急性消化性溃疡穿孔合并胆囊结石、胆囊炎患者17例,均在气管插管、静脉麻醉下一期行腹腔镜下消化性溃疡穿孔修补术及胆囊切除术.结果 15例胃溃疡穿孔及2例十二指肠溃疡穿孔患者均手术治愈,无死亡病例,无严重并发症发生,手术效果良好,患者术后恢复满意,营养状况良好.结论 腹腔镜下消化性溃疡穿孔修补术联合胆囊切除术安全可行,在不增加患者创伤的情况下能同时去除病灶,有利于术后患者营养状况的改善,能很快地促进患者术后康复,疗效良好,值得临床推广应用.     

艾灸关元、足三里穴对更年期大鼠血脂含量、性激素水平及细胞凋亡的影响

目的 观察艾灸关元、足三里穴对更年期雌性大鼠血脂含量、性激素水平及脑组织中caspase-3表达的影响,探讨保健灸法干预衰老的作用机制.方法 SD雌性大鼠42只,其中3月龄14只,为青年组,10月龄28只,随机分为更年期对照组和更年期保健灸组.采用ELISA法观察各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)含量的变化;采用免疫组化法检测脑组织中caspase-3蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,保健灸组血清中TC、TG、LDL-C含量下降,HDL-C含量升高;E2含量升高,FSH、LH含量下降;脑组织caspase-3蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 艾灸关元、足三里穴可有效调节更年期大鼠雌性激素的分泌水平,改善脂质代谢,抑制脑组织中caspase-3的表达,延缓衰老的发生.     

特异性免疫治疗新进展

特异性免疫治疗(SIT)作为目前唯一可能根治变应性疾病的治疗方法,不仅可以减轻过敏症状,减少用药,还可阻止自然病程的进展,预防新变应原的产生.近年来舌下SIT因其良好的安全性、有效性和易操作性已在欧洲各国广泛开展.标准化的变应原制剂在国内外逐步应用,已取代非标准化制剂.然而无论是皮下注射还是舌下含服方法,其具体有效剂量、治疗方案、治疗疗程尚待规范统一.随着对其作用机制的不断深入研究,以及以重组变应原为主的新制剂的研发,SIT的应用范围将会进一步扩大,更好地用于变应性疾病的治疗.     

隐丹参酮对人胆管癌HCCC-9810细胞中Survivin基因表达的影响

目的 探讨隐丹参酮(CTS)对人胆管癌HCCC-9810细胞作用的敏感性并研究隐丹参酮对人胆管癌细胞周期及细胞凋亡率的影响,初步探讨隐丹参酮对人胆管癌细胞凋亡抑制基因Survivin表达的影响.方法 体外培养胆管癌细胞HCCC-9810,采用不同浓度隐丹参酮予以干预,通过细胞形态观察及MTT实验,初步研究隐丹参酮对人胆管癌细胞HCCC-9810的敏感性;应用流式细胞仪检测隐丹参酮诱导人胆管癌细胞周期的变化;Hochest染色法检测诱导细胞凋亡;RT-PCR检测人胆管癌HCCC-9810细胞Survivin基因mRNA表达变化.结果 隐丹参酮可明显抑制胆管癌HCCC-9810细胞株的增殖且该抑制效应随药物剂量的增加和作用时间的延长而增强;随着最适药物浓度作用时间的延长,胆管癌细胞明显被阻滞在G0/G1期,使S期细胞比例降低,细胞凋亡数目逐渐增加,Survivin基因mRNA表达逐渐降低.结论 隐丹参酮对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖抑制作用呈剂量和时间依赖效应;隐丹参酮能诱导人胆管癌HCCC-9810细胞凋亡,其机制可能是通过影响肿瘤细胞的细胞周期、抑制Survivin基因表达有关.     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变的检测及临床意义

目的 了解甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)BRAF基因T1799A点突变的情况与临床病理学特征的关系.方法 应用聚合酶链反应及DNA直接测序法对43例PTC患者,20例非PTC甲状腺病变患者及40份正常甲状腺组织对照的新鲜标本进行BRAF基因检测.分析BRAF基因突变与性别、发病年龄、原发灶大小、甲状腺包膜外浸润、颈淋巴结转移及远处转移等临床病理学特征的关系.结果 43例PTC中1 7例检出BRAF基因T1799A点突变.检出率为39.5%,而在非PTC甲状腺病变患者和40份正常甲状腺组织未发现T1799A点突变.BRAF基因突变与PTC甲状腺包膜外浸润及颈淋巴结转移密切相关(P<0.05及P<0.05),与性别、发病年龄、原发灶大小及远处转移无关.结论 BRAF基因突变与颈淋巴结转移和甲状腺包膜外浸润密切相关,突变可能增加PTC的侵袭性并影响预后.     

大鼠脊髓压迫性损伤解压后pEGFR的表达变化

目的　探讨大鼠脊髓压迫性损伤（compressed spinal cord injury,CSCI）解压后表皮生长因子受体（phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR）、pAkt1的表达变化及其与神经功能、有髓神经纤维数量变化的相关性,为CSCI解压后治疗策略的制定和药物的研发提供实验基础。 方法　采用自行设计的方法制作SD大鼠CSCI模型,造模成功后解压。运用BBB（Basso Beattie Bresnahan）评分观察动物解压后神经功能的恢复情况;通过Luxol fast blue（LFB）染色检测解压后1、7、14、21 d有髓神经纤维数量变化;运用免疫荧光双标（Double-labeling immunoflurescence）、免疫印迹（western blotting,WB）检测pEGFR、 pAkt1的表达变化。 结果　CSCI解压后,BBB评分和有髓神经纤维数量随时间延长而逐渐增加;与此同时,pEGFR、pAkt1表达亦上调且与BBB评分、有髓神经纤维数量增加趋势一致。 结论　CSCI解压后,神经功能有一定改善、有髓神经纤维数量有一定增加,这些变化与pEGFR表达上调有关,提示EGFR的活化参与了CSCI解压后的内源性修复。