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Synaptosomes prelabeled at 37 degrees C with radioactive amino acids (GABA, glutamate, glycine, taurine, alpha-aminoisobutyric acid, phenylalanine, leucine) and then washed at 0 degrees C on Millipore filters (DAWP 02500) lost 60-70% of the accumulated radioactivity. The loss was similar with exogenous tritiated GABA and glutamate, and with [14C]GABA and [14C]glutamate metabolically derived from [14C]glucose. In contrast, radioactive norepinephrine, dopamine and 5-hydroxytryptamine were almost totally retained by cold shocked synaptosomes. After pretreatment with reserpine and nialamide the loss of norepinephrine became significantly greater (about 25%). The uptake of radioactive GABA, glutamate and clycine after cold shock was about 50% reduced, whereas that of radioactive biogenic amines was less affected (reduction of 22% for norepinephrine, 29% for 5-hydroxytryptamine and 35% for dopamine). The loss of amino acids and the reduction of uptake could be minimized by performing the cold shock in hypertonic conditions. In synaptosomes prelabeled with [3H]GABA, a good correlation was observed among magnitude of amino acid pool depletion induced by cold shock or by 56 mM KCl, decrease of subsequent accumulation of [14C]GABA, and decrease of [14C]-GABA-stimulated [3H]GABA release (homoexchange). 相似文献
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Enhancement by GABA of glutamate depolarization-induced release from cerebellar nerve endings 总被引:2,自引:0,他引:2
Cerebellar synaptosomes were superfused in the presence of D-[3H]aspartate (to label the glutamate 'reuptake pool') and [14C]glutamine (to label the 'new synthesis pool'). The depolarization-induced release of D-[3H]aspartate and of newly synthesized [14C]glutamate were potentiated by low concentrations of GABA (2--20 microM) or muscimol. The effect was probably mediated by the interaction of GABA with presynaptic GABA receptors localized in 'glutamergic' nerve endings, since it was antagonized by the GABA antagonists picrotoxin and bicuculline. 相似文献