氚-胆固醇标记血浆脂蛋白方法的研究

本研究用~3H-胆固醇标记血浆脂蛋白,血浆经3.75％PAGE,可将脂蛋白分成HDL、LDL和VLDL。分别测定各脂蛋白的每分钟计数(cpm),并计算放射化学纯度。HDL、LDL和VLDL的放射化学纯度分别为99％、96％和94％。本法标记的脂蛋白具有一定的化学稳定性,不改变生物活性和其他理化性质等优点。可通过制备性PAGE纯化~3H-胆固醇标记的脂蛋白。该方法操作简单,~3H-胆固醇半衰期长,可广泛应用于血浆脂蛋白代谢的研究。     

Establishment of rat experiment model of chronic allograft nephropathy

<正>Objective To summarize experience of establishing stable rat model ot chronic allograft nephropathy. Methods We used Fisher rats as donors and Lewis rats as recipients. After left kidney of donor perfused in situ under hypothermic condition,left renal vein,abdominal aorta and bladder flap of donor was anastomosed with left     

uCTX-Ⅱ在早期骨关节炎诊断及治疗评估中的应用价值研究

目的:观察尿液CTX-Ⅱ(uCTX-Ⅱ)在诊断早期骨关节炎(影像学确诊前期)及评价早期骨关节炎治疗效果中的价值?方法:采用多中心随机双盲对照试验,将参加研究的早期和进展期骨关节炎患者各分为3组,单用氨基葡萄糖?双醋瑞因或联用2种药物的治疗组?在研究进行的开始和第3?6?9?12个月随访,并应用WOMAC评分对患者进行疼痛?僵硬症状和生理功能评分?在研究开始和第6?12个月末留取患者随机尿液,测定uCTX-Ⅱ浓度,并采集正常人群相关数据?结果:在研究的第3个月,各组患者的WOMAC评分总分较初始降低(P < 0.05),其中联用治疗组?单用双醋瑞因治疗组低于单用氨基葡萄糖治疗组(P < 0.05)?对比早期骨关节炎患者和正常人群uCTX-Ⅱ浓度后,在影像学阴性的早期骨关节炎患者中,uCTX-Ⅱ浓度较正常人高(P < 0.05)?将治疗后WOMAC评分下降≥20%视作治疗有效,比较早期骨关节炎组和进展期骨关节炎组中符合这一条件的患者治疗前后uCTX-Ⅱ浓度和WOMAC评分,结果提示两者具有相关性?结论:检测uCTX-Ⅱ浓度简便?易行,可以作为骨关节炎早期诊断的参考指标和评估早期骨关节炎治疗效果的参考指标?早期骨关节炎治疗效果优于进展期患者,早期患者给予软骨营养+保护治疗的方法疗效优于单纯给予一种治疗方法,单用双醋瑞因治疗早期骨关节炎效果优于单用氨基葡萄糖的治疗效果?     

Effects of propyl gallate on carotid artery thrombosis and coagulation/fibrinolysis system in rats

Objective： To investigate the effects of propyl gallate （PrG） on the thrombus formation time and the coagulation/fibrinolysis system in an experimental carotid artery thrombosis model in rats. Methods： Fifty SD rats were randomly divided into 5 groups （10 animals/group）： the normal group （normal saline 2 mL/kg）, the model group （normal saline, 2 mL/kg）, the heparin control group （1 250 IU/kg）, the low dose PrG group （30 mg/kg）, and the high dose PrG group （60 mg/kg）. Thirty minutes after intravenous injection of saline or the corresponding drugs, a carotid artery thrombus was induced by continuous electric stimulation in all rats except for those in the normal group. The duration from the initiation of the electric stimulation to the sudden drop in carotid temperature was recorded as the thrornbus formation time. Levels of plasma tissue-type plasminogen activator （t-PA） and plasminogen activator inhibitor-1 （PAl-1） were determined by ELISA. Results： PrG （30 and 60 mg/kg） can prolong the thrombus formation time, but the effect was obviously weaker than that of heparin （P〈0.05, P〈0.01）. Compared with the model group, PrG （30 and 60 mg/kg） elevated the plasma activity of t-PA （both P〈0.05） and showed an increasing tendency in elevating the ratio of t-PA/PAI-1 （P〉0.05）, while it had no significant effect on the level of PAI-1. Conclusion： PrG has a certain antithrombotic effect and can slightly regulate the imbalance of the t-PA/PAl-1 ratio.     

人IL-12对结肠癌干细胞生物学特性的影响及其机制

目的研究人IL-12对结肠癌干细胞(cancer stem cells,CSCs)生物学特性的影响及其机制。方法 IL-12/慢病毒重组质粒转染结肠CSCs构建IL-12过表达细胞模型,将IL-12过表达CSCs接种NOD/SCID小鼠,观察成瘤情况,Transwell检测结肠CSCs侵袭性,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化检测CK20表达,Western blot检测STAT6、p-STAT6、survivin、IL-12和IL-4蛋白表达。结果体外实验证明,IL-12使CSCs侵袭性降低40%,细胞成球能力降低,凋亡增加[(45.2±5.6)%vs(4.1±1.2)%]。转染IL-12的CSCs在小鼠体内肿瘤生长能力降低,抑瘤率63.53%;慢病毒/IL-12转染CSCs形成的肿瘤体积(189±21)mm3,质量(1 958.2±41.2)mg;而空载体转染CSCs形成的肿瘤体积(1 785±32)mm3,质量(5 369.8±41.3)mg。Western blot检测表明,IL-12过表达显著降低结肠CSCs上清IL-4和p-STAT6表达。结论 IL-12降低结肠CSCs自我更新能力及侵袭性,促进其分化和凋亡,可能和IL-4/STAT6通路有关。     

姜黄素含药血清对大鼠肝星状细胞HSC—T6增殖的影响

目的观察姜黄素药物血清对瘦素刺激肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的机制。方法用姜黄素煎荆给大鼠灌胃（连续7d）,制备含药血清,并用培养基将药物血清配制成四个稀释倍数,分别是5％、10％、20％、加％四个稀释倍数浓度;培养肝星状细胞,取对数生长期细胞,运用噻唑蓝（MTr）比色法检测药物血清对HSC—T6增殖的影响。结景姜黄素药物血清对增殖的肝星状细胞有抑制作用（P〈0．05或P〈0．01）,在5％～40％的血清稀释倍数范围内,随剂量增大而抑制作用增强;在20％～40％的血清稀释倍数范围内姜黄素组对HSC—T6抑制率增高（P〈0．05）。结论姜黄素具有抑制HSC—T6增殖的作用。     

LY294002抑制小细胞肺癌干细胞样细胞自我更新

目的:研究Akt活性抑制剂LY294002抑制源自人小细胞肺癌NCI-H446细胞系肺癌球形成细胞即肺癌干细胞样细胞(LCSLCs)自我更新作用。方法:体外培养NCI-H446细胞系细胞。以干细胞条件培养基用超低粘附6孔细胞培养板悬浮培养富集和扩增LCSLCs。裸鼠皮下成瘤实验鉴别LCSLCs高致瘤特性。Western blot分析LCSLCs中Akt蛋白磷酸化水平。肿瘤球形成试验检测LY294002对LCSLCs自我更新的影响。结果:干细胞条件培养基悬浮培养6d,NCI-H446细胞系细胞呈三维非粘附性球体生长。LCSLCs具有高致瘤特性。与NCI-H446细胞系细胞比较,LCSLCs信号分子Akt组成性活化。LY294002有效降低LCSLCs中Akt磷酸化水平,并以剂量依赖方式抑制LCSLCs肺癌球形成(P<0.05)。结论:靶向干预小细胞肺癌LCSLCs信号分子Akt组成性活化可能成为抑制肺癌干细胞特性治疗小细胞肺癌的新策略。     

新疆维吾尔族急性缺血性脑卒中短期预后与5-脂氧合酶激活蛋白SG13S32位点及危险因素的相关性研究

目的 探讨新疆维吾尔族人群急性缺血性脑卒中短期预后与5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase-activating,ALOX5AP)基因SG13S32位点、年龄、性别、就诊时间等危险因素的相关性。 方法 选取194例新疆地区急性缺血性脑卒中经相同药物治疗后的维吾尔族患者,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测ALOX5AP基因SG13S32位点多态性,采用队列研究的统计分析方法比较不同基因型人群的短期预后改善情况,并经Logistic逐步回归分析,得出预后相关独立因素。 结果 5-脂氧合酶激活蛋白基因SG13S32位点不同基因型间维吾尔族急性缺血性脑卒中短期预后改善差异无统计学意义(χ²=0.336,P=0.562)。经Logistic逐步回归分析,年龄、就诊时间及纤维蛋白原为影响维吾尔族急性缺血性脑卒中患者短期预后的独立因素。 结论 5-脂氧合酶激活蛋白基因SG13S32位点不同基因型之间急性缺血性脑卒中短期预后改善没有明显差异,且不是影响维吾尔族急性缺血性脑卒中短期预后的独立危险因素。年龄、就诊时间及纤维蛋白原可影响急性缺血性脑卒中短期预后改善。     

经导管肝动脉化疗栓塞术治疗肝癌

1986年12月～1989年2月采用经导管肝动脉化疗栓塞术治疗肝癌60例。全部病例均经股动脉穿刺插管,行腹腔动脉、肠系膜上动脉造影后将导管送入肝癌之供血动脉,注入阿霉素及氟脲嘧啶、碘油乳浊液。术后1个月内死于并发症8例,其余存活1个月以上,最长存活26个月仍健在。以寿命表法统计半年、1年、2年的累计受治存活率分别为63.0％、36.0％、24.0％。本文根据60例治疗体会及治疗效果,讨论了本疗法术前诊断及术后观察、治疗肝癌的估计、栓塞药物的选择、栓塞后的并发症等。     

国产和进口格列吡嗪片在健康人体内的药动学比较

目的:比较国产和进口格列吡嗪片在健康志愿者体内的吸收、分布、代谢和排泄. 方法:健康男性志愿受试者12例,单剂量口服国产和进口格列吡嗪片10 mg,用标准二阶段交叉设计自身对照实验方法,以高效液相色谱法测定血浆中格列吡嗪的经时浓度,计算药动学参数. 结果:国产和进口格列吡嗪片在健康志愿者体内的药-时曲线均符合一级吸收的单室模型,两种格列吡嗪片的主要药动学参数Tmax, Cmax和 AUC(0-17)分别为(2.6±0.5) h和(2.6±0.5) h; (609.7±112.9) ng/mL和(568.8±101.9) ng/mL;(4499.8±969.0)ng/mL和(4108.3±724.9) ng/mL. 结论:国产和进口格列吡嗪片的药代动力学参数无差异.