FasL基因表达对缺氧状态下直肠癌细胞增殖凋亡的影响

Objective To elucidate the effect of FasL gene expression on the proliferation and apoptosis of hypoxic rectal carcinoma cells. Methods The normoxic expression level of FasL in HR-8348 subtype cells (HR-8348B, HR-8348L, HR-8348F and HR-8348As) with different invasive power were verified by Western blot. Hypoxia models for HR-8348B, HR-8348L, HR-8348F and HR-8348As were constructed with chemical modeling, then the FasL levels in all groups at 12 h after hypoxia were quantitated by Western blot. Distribution of different cell life cycles was determined with flow cytometry. Cell reproductive activities were detected with MTT method, and cell apoptesis was assessed with TUNEL. Results FasL protein was pigmentized at the position of 40 000 by Western blot, and the expression level of FasL was significantly higher in HR-8348F cells than those in HR-8348B, HR-8348L and HR-8348As cells(F=361.149, P<0.01) in normoxia. At 12 h after hypoxia, the FasL level was also significantly higher in HR-8348F cells than those in other groups (F=278.766, P<0.01), but was not markedly different as compared to themselves in normoxia (t=1.762, P>0.05). The proliferation index was significantly higher in HR-8348F (60.43±3.72) than those in HR-8348B (40.01±3.30), HR-8348L (41.30±4.06) and HR-8348As cells (35.87±4.39), respectively (F=39.477, P<0.01). However, both inhibition rate of proliferation and apoptotic index were remarkably lower in HR-8348F (17.30±1.98 and 13.10±1.04) than those in HR-834B (33.70±4.33 and 21.60±1.31), HR-8348L (34.20±3.92 and 20.10±1.15), and HR-8348As (38.00±4.55 and 23.90±1.23), respectively (F=28.811 and 76.462, respectively, P<0.01). Conclusion The expression enhancement of intracellular FasL in rectal carcinoma in hypoxia can lead to accelerated proliferation and reduced apeptosis of cells, which will promote tumor cells to adapt microenvironmental hypoxia.     

吸烟对大鼠生精细胞发育影响的研究

目的:探讨吸烟对大鼠生精细胞发育的影响。方法:自制吸烟机将大鼠制成被动吸烟模型,大鼠随机分成被动吸烟组(A、B组各10只)及相应对照组(C、D组各10只),A、B组被动吸烟8周,随后处死A组及相应对照组C组大鼠;B组停止被动吸烟后与其相应对照组D组继续观察48 d后处死。流式细胞术(FCM)检测各组大鼠生精细胞周期,放免法测定血睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平,HE染色观察睾丸组织结构变化,透射电镜观察睾丸超微结构改变。结果:与C组比较,A组大鼠精子、精子细胞[(18.76±3.58)%]和初级精母细胞[(5.71±1.18)%]明显减少(P均<0.01),而精原细胞[(55.98±5.35)%]增加(P<0.01),增殖指数降低(P<0.01)。A组大鼠生精小管壁变薄,层次减少,生精小管内精原细胞减少,精母细胞固缩。间质细胞内质网扩张脱颗粒,高尔基复合体减少,支持细胞脂滴和溶酶体增多。A组大鼠T、LH水平低于C组(P均<0.01)。B组大鼠停止被动吸烟后,精子、精子细胞、初级精母细胞比例和增殖指数上升,T、LH水平升高,但仍低于D组。结论:吸烟导致大鼠睾丸生精上皮损伤及间质细胞和支持细胞受损,同时伴有T和LH水平的下降,延缓生精细胞增殖,停止吸烟后生精功能有逐渐恢复的趋势。     

天宁颗粒的质量标准研究

目的建立天宁颗粒的质量标准。方法采用TLC法对天宁颗粒中的天麻和川芎进行鉴别;采用RP-HPLC法测定天麻素的含量。应用Ecosil ODS C18色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（3∶97）,检测波长为221 nm。结果天麻素的线性范围为2.0～160μg.ml-1;平均回收率为100.29%,RSD为1.69%,精密度,稳定性等均符合测定要求。结论本方法操作简便,灵敏准确,重复性好,可有效的控制该制剂的质量。     

小鼠获得性无助抑郁模型的优化与评价

目的 利用ICR小鼠改进获得性无助抑郁动物模型并对其进行评价.方法 采用电脑程序控制的穿梭箱条件反射系统,每天360次、连续4d给予ICR小鼠不可逃避性足底电击(IS)诱导训练,每次电击持续2 s,平均间歇8 s,电流强度0.3mA.经过穿梭箱回避程序筛选,将电击诱导组小鼠分为模型组(IS组,灌胃给予溶剂,连续5d,1次/d)和氟西汀治疗组(FLU组,灌胃剂量10 mg/kg,连续5d,1次/d).诱导训练后,连续4d采用延迟的逃避行为测试程序测定小鼠的逃避失败次数和逃避潜伏期.结果 诱导训练后第2、4、8天,与非电击(NIS)组比较,IS组逃避失败次数均显著增加.在诱导训练后第2～5天,与IS组比较,FLU组逃避失败次数显著减少,逃避潜伏期显著缩短.结论 通过改进措施,利用ICR小鼠可建立稳定的获得性无助抑郁动物模型,为抗抑郁药物药效学研究提供可靠的行为学方法.     

高原重症急性胰腺炎早期相关因素的对比分析

 目的 探讨高原地区重症急性胰腺炎(SAP)患者的早期相关的危险因素及用以制定相应的治疗策略.方法 回顾性对比分析地处高原和平原的两组患者,分别将其设为高原组(63例)和平原组(64例).通过对两组患者的一般情况、APACHE Ⅱ评分、是否伴有血液浓缩、休克、低氧血症等合并症,以及早期不同的处理方式等因素对SAP病死率的影响进行Logisic 分析.结果 高原组SAP患者早期在血液浓缩(HCT＞50%)、低氧血症、休克,以及并发多脏器功能障碍综合征(MODS)方面明显高于平原组的患者,差异有显著性(P＜0.01).平原组患者由于后期治疗策略的转变,采用了早期液体足量复苏,早期机械通气,伴腹腔高压者早期行腹腔引流等,其病死率下降,与高原组比较,差异有显著性(P＜0.01).结论 高原地区sAP患者早期并发MODS及死亡的危险因素与血液浓缩、休克、低氧血症,以及与临床处理的方式有关.积极纠正低氧血症,液体足量复苏纠正休克和改善血液浓缩,控制炎症反应是阻止SAP早期发生MODS的关键.     

盆腔恶性肿瘤致肾后性肾衰竭的双介入治疗

目的探讨经皮穿刺顺行输尿管支架置放术结合区域性动脉化疗对盆腔原发或转移性肿瘤合并急性肾衰竭的临床价值及安全性。方法对18例盆腔恶性肿瘤伴双侧输尿管梗阻致肾后性肾功能不全的患者,行一侧经皮穿刺顺行放置输尿管支架,肾功能恢复后3～5d行区域性动脉插管化疗。结果17例输尿管支架置放术一次手术获成功,1例患者左侧肾造瘘失败且发生肾周血肿,后经导管节段性动脉栓塞止血,5d后经右肾造瘘成功。无其他严重并发症。术前血肌酐175.40～1040.70μmol/L,6例存在出血倾向,所有患者肾造瘘2～7d后肾功能恢复正常,随后进行3～8次动脉常规剂量化疗。随访时间3～15个月,平均7个月。结论经皮穿刺顺行输尿管支架置放术结合区域性动脉化疗,治疗盆腔原发或转移性肿瘤合并急性肾衰竭安全、可行、并发症少,可延长患者生存期。     

基孔肯雅病毒中和表位的筛选及表达

目的:寻找基孔肯雅病毒中和表位,并将其表达为重组融合蛋白.方法:对噬菌体展示12肽库进行了生物淘洗,随机挑取噬菌体克隆,使用 ELISA方法筛选并鉴定阳性克隆,分析阳性克隆的DNA序列,将其翻译成氨基酸序列进行同源性比较.将其中一个表位连同M13噬菌体PⅢ蛋白结构域Ⅰ～Ⅱ的编码序列用PCR技术扩增后插入原核表达载体pQE30,用IPTG诱导融合蛋白表达.结果与结论:从经过3轮淘洗的噬菌体中随机挑选123个克隆,从中筛选到20个阳性克隆,其中包含7种不同的氨基酸序列,这些序列缺乏同源性,表明该单抗表位应为构象型表位.在室温培养条件下成功地在大肠杆菌周质腔表达了一种可溶性的表位融合蛋白,经亲和层析得到了纯化的表位融合蛋白.     

颅内微血管减压的手术配合体会

微血管减压手术（microvascular decompression，MVD）治疗三叉神经痛、面肌痉挛等脑神经疾病是一项有效但具有挑战性的工作。作者所在的两院神经外科自2000年10月-2008年2月共完成613例微血管减压手术，围手术期的手术体位摆放及术中配合都对护理提出了很高的要求。通过对613例微血管减压术的配合，积累了一定的经验，现总结如下。     

河南新乡2008年手足口病病原分离鉴定及病毒基因组特征

目的:对2008年分离自河南新乡手足口病患者粪便标本的病原进行分离鉴定及全基因组序列测定,并同相关毒株序列进行同源性比对和进化分析,以了解新分离病毒基因组序列特征及可能的传播来源.方法:将手足口病患者粪便标本接种敏感细胞进行分离传代培养,制备抗原片进行间接免疫荧光检测,采用特异性引物进行PCR鉴定,将病毒基因组分为8个片段进行RT-PCR扩增,扩增产物纯化后进行PCR测序.通过末端重叠序列拼接成全长病毒基因组序列,利用生物信息学软件对序列进行比对分析,绘制进化树.结果:测序获得的3株EV71病毒基因组全长均为7 405 nt,VPI氨基酸序列同源性达100%.Blast分析表明F3(F8)-Henan-08毒株均与安徽阜阳2008年分离的EV71毒株同源性最高,而F4-Henan-08毒株与我国台湾省2004年分离的EV71毒株同源性最高.序列进化分析表明,新分离毒株属于C4基因亚型.结论:新分离的河南EV71毒株与安徽阜阳分离的毒株可能具有相同来源.     

体重、身高对峰值骨量及腰椎形态的影响

目的　通过体重 (W)、身高 (H)对成都地区青壮年峰值骨量及腰椎形态的影响研究 ,为骨质疏松症的诊治中合理应用骨量参数提供科学依据。方法　随机抽取成都地区 2 0～ 39岁 2 37名(男 1 0 8名 ,女 1 2 9名 )排除心、肝、肺、肾、内分泌等疾病 ,骨代谢疾病及脊椎畸形者。应用双能X射线骨密度仪 (DXA)测定全部受试者腰椎 (L1 L4 )正位骨密度 (BMD)、面积 (Area)、骨矿含量 (BMC)及腰椎形态 (横径及高径 )。结果　男性L2 4 BMC、L2 4 Area及L2 4 Area/H均明显高于女性 (P <0 0 5) ,L2 4BMD、L2 4 BMC/W、L2 4 Area/W、L2 4 BMC/H男女无显著性差异 (P >0 0 5)。L2 4 BMD/W、L2 4 BMD/H女性明显高于男性 (P <0 0 5)。由L1 至L4 腰椎的横断面积逐渐增大 ,横径 >高径 ,男性腰椎横径及高径均明显高于女性 (P <0 0 5) ,横径更明显。横径 /W、高径 /H男、女差异无显著性 (P >0 .0 5) ,高径/W女性明显高于男性 ,横径 /H则男性明显高于女性 (P <0 0 5)。结论　L2 4 BMC较L2 4 BMD更好反映体重、身高及骨几何尺寸的变化 ,体重主要影响腰椎横径 ,身高主要影响腰椎高径