PCR-SSCP检测胃癌中p53基因突变

目的　研究p5 3基因表达及突变在胃癌发生中的地位。方法　采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (S -P)法与聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)分析技术分别检测胃癌p5 3基因表达及突变。结果　p5 3蛋白表达在正常胃粘膜均为阴性 (0 / 2 0 ) ,在不典型增生为 18% (11/ 6 0 ) ,其中轻度全为阴性(0 / 2 0 ) ,中度 2 5 % (5 / 2 0 ) ,重度 30 % (6 / 2 0 ) ,明显低于胃癌的 5 8% (70 / 12 0 ) (P <0 .0 5 ) ,而中度、重度不典型增生高于正常胃粘膜及轻度不典型增生 (P <0 .0 5 )。胃癌中p5 3基因第 5外显子突变率高达 2 5 % (5 / 2 0 ) ,显著高于无突变的正常胃粘膜 0 % (0 / 2 0 ) (P <0 .0 5 )。结论　p5 3基因突变可出现于中度、重度不典型增生 ,是胃癌发生的一个早期事件。在胃癌发生中p5 3基因第 5外显子突变频繁     

MNNG诱发大鼠腺胃粘膜不典型增生与 高分化腺癌形态定量分析

目的探寻大鼠腺胃粘膜不典型增生与高分化腺癌的形态定量参数指标,探讨大鼠实验性胃癌与人类胃癌形态定量指标的异同性。方法利用HPIAS-1000型图象分析系统对以MNNG诱发的大鼠腺胃粘膜不典型增生及高分化腺癌进行形态定量研究。结果大鼠腺胃粘膜不典型增生与高分化腺癌8项形态定量参数指标经统计学处理比较,其中核面积、核周长、核等效直径、核体积、核长径,核形状因子8项形态定量指标（P<0.01）有高度显著性差异,而核短径和核长短径比值（P>0.05）无显著性差异。结论这些形态定量参数指标对区别大鼠腺胃粘膜不典型增生与高分化腺癌有一定价值,形态定量参数指标也是随着癌前病变、癌的顺序逐渐递增;大鼠腺胃粘膜上皮癌变与人类胃粘膜上皮癌变有着相似的形态学变化过程。     

人胎脑和SD大鼠脑中β-NGF的提取

目的研究拟获得快速高效的β-NFG(β-神经生长因子)纯化方法,并为其生物特性研究和临床应用奠定基础.方法通过低温高速离子、离子交换层析、透析等过程,从人胎脑和SD大鼠脑中分离纯化β-NGF,用SD S-PAGE分析其分子量和纯度,并经PC12细胞突起生长试验鉴定其生物学活性.结果从人胎脑和SD大鼠脑中分离纯化得到的β-NGF提取物在SDS-PAGE图上均呈单一条带,它们都能很好地促进PC12细胞长出突起,且人胎脑β-NGF提取物促进PC12细胞长出突起的能力和人重组β-NGF差别无显著性.结论实验获得了纯度高且生物活性良好的β-NGF.在分离纯化的其他参数不变时,分离纯化过程的总时间和温度对β-NGF的得率和生物学活性有明显影响.     

三金排石汤辅助输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石临床研究

目的：观察三金排石汤辅助输尿管镜钬激光碎石术治疗输尿管结石的排石效果。方法：将115例输尿管结石患者,按随机数字表法分为治疗组58例与对照组57例。对照组给予输尿管镜钬激光碎石术治疗,治疗组在输尿管镜钬激光碎石术后加用三金排石汤治疗。观察2组治疗后排石效果、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白（CRP）]水平、应激反应指标[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）]水平及并发症。结果：治疗组结石残余率为5.17%,低于对照组19.30%,2组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗组结石排尽率为94.83%,高于对照组80.70%,2组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组结石排尽时间明显短于对照组、VAS评分明显低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗前,2组TNF-α、CRP水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后,2组TNF-α、CRP水平较治疗前降低（P<0.05）;且治疗组TNF-α、CRP水平低于对照组（P<0.05）。治疗前,2组SOD、CAT水平比较,差异无统计学意义（P>...     

葛酮通络胶囊联合针刺治疗急性缺血性脑卒中临床研究

目的：观察葛酮通络胶囊联合针刺治疗对急性缺血性脑卒中（AIS） 患者神经功能及氧化应激水平 的影响。方法：将100 例AIS 患者按随机数字表法分为对照组、葛酮组、针刺组、联合组,每组25 例。对照 组给予一般治疗和专科治疗,葛酮组在对照组基础上给予葛酮通络胶囊治疗,针刺组在对照组基础上给予针刺 治疗,联合组在对照组基础上给予葛酮通络胶囊联合针刺治疗,4 组均连续治疗14 d。比较4 组治疗前后美国 国立卫生研究院卒中量表（NIHSS） 评分、神经功能缺损指标［S-100B 蛋白、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、 神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP） ］及氧化应激指标［谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化 酶（SOD）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHDG）、丙二醛（MDA）］水平。结果：治疗后,4 组NIHSS 评分均较治疗 前降低（P＜0.05）,葛酮组、针刺组及联合组NIHSS 评分均低于对照组（P＜0.05）,联合组NIHSS 评分均低 于葛酮组及针刺组（P＜0.05）。治疗后,4 组血清S-100B 蛋白、NSE、GFAP 水平均较治疗前降低（P＜ 0.05）,葛酮组、针刺组及联合组血清S-100B 蛋白、NSE、GFAP 水平均低于对照组（P＜0.05）,联合组血清 S-100B 蛋白、NSE、GFAP 水平均低于葛酮组及针刺组（P＜0.05）。治疗后,4 组血清SOD、GSH-Px 水平均 较治疗前升高（P＜0.05）,血清MDA、8-OHDG 水平均较治疗前降低（P＜0.05）;葛酮组、针刺组及联合组 血清SOD、GSH-Px 水平均高于对照组（P＜0.05）,血清MDA、8-OHDG 水平均低于对照组（P＜0.05）;联合 组血清SOD、GSH-Px 水平均高于葛酮组及针刺组（P＜0.05）,血清MDA、8-OHDG 水平均低于葛酮组及针刺 组（P＜0.05）。结论：葛酮通络胶囊联合针刺治疗可有效改善AIS 患者的神经功能缺损程度及氧化应激指标。     

四川省艾滋病抗病毒治疗6~12个月病毒学失败患者耐药性分析

目的 分析四川省接受艾滋病抗病毒治疗6~12个月病毒学失败患者的耐药影响因素和耐药特征。方法 对2016—2019年接受治疗6~12个月且病毒学失败患者进行HIV-1基因型耐药检测,采用统计学logistic回归和卡方检验分析病毒学失败患者耐药发生的影响因素,以及不同地区和亚型毒株间耐药突变特征。结果 3626例患者符合调查标准,成功获得序列2915例（80.39%）,其中1246（42.74%）例耐药,多因素logistic回归分析发现,注射吸毒者的耐药突变是异性性传播患者的1.90倍;艾滋病的耐药突变是HIV感染者的1.75倍;基线CD4+T淋巴细胞计数≥350个/μl和200~349个/μl的耐药突变是CD4+T淋巴细胞计数＜200个μl的0.76和0.64倍;初始治疗方案含洛匹那韦/利托那韦（LPV/r）的二线治疗方案的耐药突变是是含齐多夫定的0.37倍;感染CRF01_AE亚型毒株的耐药突变是感染CRF07_BC亚型毒株的1.34倍。成都平原、川东北、川西北、川南和攀西地区耐药率分别为45.41%、37.47%、54.84%、43.38和34.34%,卡方检验有统计学意义（P＜0.05）;主要流行亚型CRF07_BC、CRF01_E、CRF08_BC和CRF85_BC耐药率分别为39.60%、48.55%、34.17%和44.27%,卡方检验有统计学意义（P＜0.05）。结论 四川治疗6~12个月艾滋病患者病毒学失败的耐药率较高,耐药突变状况复杂多样,感染途径、基线CD4+T淋巴细胞计数、病程、感染毒株亚型、初始治疗方案是治疗6~12个月病毒学失败患者发生耐药的影响因素,且各地区耐药发生和各亚型耐药突变特征不同。     

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。     

淋病奈瑟氏菌中国流行株gyrA和parC基因与喹诺酮类耐药性的相关性

目的　调查中国地区淋病奈瑟氏菌 (NG)对喹诺酮类的耐药性状况 ,探讨高水平耐药的基因突变株对喹诺酮类耐药机制的作用 .方法　对 9a来临床分离保存淋球菌流行株进行了体外环丙沙星 (CIP)药敏实验 .筛选出 76株高水平CIP耐药株 ,通过 PCR扩增了其中的 1 8株 NG的 gyr A和par C喹诺酮耐药决定区基因 ,并对扩增子直接测序 .通过N he I酶切、脉冲电场凝胶电泳 (PFEG)分析了这些菌株的遗传关系 .结果　环丙沙星的耐药检出率有逐年增高的趋势 ,MIC≥ 1 .0 mg· L- 1的菌株由 1 993年的 5 .1 %上升到 2 0 0 1年的 2 1 .4% .对照组中的 1 8株敏感菌只有两株发生了 gyr A的单一突变 ,未发现 par C变异 ;而耐药组中 89% (1 6 )菌株的gyr A发生了 Ser- 91向 Phe的单一突变株或 (和 ) par C的双突变 .88.9% (1 5 )的菌株的 gyr A发生了 Ser- 91向 Phe和 Asp-95向 Gly的突变 .在发生 par C突变中 72 %属于 Asp- 86向Asn突变 .PFEG分析发现 1 0株具有完全一致的 gyr A和par C突变模式 .同时也发现来自不同地区的菌株的 PFEG指纹图是不同的 .结论　研究表明 ,在中国 NG流行株对喹诺酮类耐药率呈增长趋势 ;NG流行株对喹诺酮产生耐药性与gyr A和 par C基因双重突变有着密切的关系     

TTV核酸模板快速制备方法

目的 寻求建立适合大批量临床标本检测TT病毒（TTV）核酸快速制备方法,直接用于PCR扩增。方法 应用蛋白酶K裂解酚氯仿抽取法与直接快速裂解法,分别制备TTV核酸做PCR模板,用于TTV的聚合酶链反应的快速检测。结果 在30例非甲－非庚型肝炎血清和50例慢性乙型肝炎患血清,应用经典的蛋白酶K裂解酚氯仿抽取法和直接快速裂解法,分别制备TTV核酸模板,在相同条件下进行PCR扩增,结果两种制备方法的符合率为89％。结论 TTV是一种新发现的肝炎病毒,目前主要以实验室检测病毒核酸的存在为诊断依据,建立了具有快速、简便、适合大批量临床标本中TTV核酸制备方法,对TTV肝炎的快速诊断,具有重要的意义。     

宫颈癌组织中端粒酶活性测定

目的 探讨端粒酶活性在子宫颈癌组织发生发展中的作用及临床应用价值。方法 采用PCR－TRAP微孔杂交法检测45例子宫颈癌组织标本和8例正常的子宫颈组织的端粒酶活性。结果 45例宫颈癌组织中端粒酶阳性表达率为86．6％,其中宫颈癌Ⅰ期27例,阳性率77．7％,宫颈癌Ⅲ期6例,阳性率100％。8例正常宫颈组织中未检测出端粒酶阳性。结论 端粒酶活性表达在子宫颈癌的发生发展中起重要的作用,端粒酶活性检测对指导宫颈癌的诊断和治疗具有重要意义。