抗原致敏树突状细胞抗小鼠白念珠菌系统感染的实验研究

目的研究不同形态白念珠菌致敏的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)对免疫抑制小鼠白念珠菌系统感染的免疫保护作用及所对应的细胞因子改变。方法孢子相和菌丝相白念珠菌在体外分别致敏小鼠骨髓来源的DC(BM-DC),测定混合培养上清IL-12水平;尾静脉回输免疫抑制小鼠体内后,ELISA法测定各组小鼠脾IFN-γ及IL-4水平,并检测肾携菌量。结果DC孢子致敏组上清IL-12水平(380.2±104.13)pg/mL明显高于DC菌丝致敏组和对照组(P<0.05);而DC菌丝致敏组(74.79±23.47)pg/mL与单纯DC培养组上清IL-12水平(19.71±9.21)pg/mL差异无统计学意义(P>0.05)。孢子致敏DC、菌丝致敏DC分别过继免疫小鼠后,前者脾脏IFN-γ水平(269.43±17.34)pg/g明显高于其他组(P<0.05),IL-4水平(6.23±0.37)pg/g则明显低于其他对照组(P<0.05);荷菌一周后孢子致敏DC回输组小鼠肾携菌量(3.58±2.32)×102CFUs与健康小鼠荷菌组比较无统计学意义(P>0.05);其他各组间肾携菌量比较则有统计学意义(P<0.05)。结论尾静脉回输白念珠菌孢子体外致敏的小鼠骨髓来源DC可有效诱导免疫抑制小鼠抗白念珠菌保护性免疫。     

内皮素对黑素瘤A375细胞转化生长因子-β1及磷酸化Smad 3蛋白表达的调节

Objective To investigate the effects ofendothelin-1 (ET-1) and endothelin-3 (ET-3) on the expression of transformation growth factor-beta 1 (TGF-β1) and phosphorylation of Smad 3 in malignant melanoma cell line, A375. Methods Cultured A375 cells were classified into 5 groups, i.e. control group (no stimulation), ET-1 group (stimulated with ET-1), ET-1+BQ123 group (treated with ET-1 and BQ123),ET-1 + BQ788 group (treated with ET-1 and BQ788), ET-3 group (stimulated with ET-3), to receive different stimulation. The working concentrations were 0, 0.1, 1, 10, 100 nmol/L for ET-1 and ET-3, 10 μmol/L for BQ123 and BQ788. After another 12- and 24-hour culture, ELISA, RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of TGF-β1 protein and mRNA as well as phosphorylated Smad 3 (P-Smad 3). Results The expression of TGF-β1 in A375 cells was up-regulated by ET-1, but down-regulated by ET-3, and both of the effects were in a concentration-dependent manner. Under the stimulation with ET-1 and ET-3 of 100 nmol/L, the level of TGF-β1 reached 1289.38 ± 89.42 ng/L per 105 cells and 85.09 ± 9.37 ng/L per 105 cells, respectively, significantly different from that in unstimulated cells (both P < 0.05). BQ123 signifi-cantly blocked the up-regnlatory effect of ET-1 on the expression TGF-β1 protein(P < 0.05), but BQ788 had no significant influence on the effect, so was the case with TGF-β1 mRNA. Western blot revealed that ET-1significantly elevated the expression of P-Smad 3 in A375 cells (P <0.05), and the elevation was significantly inhibited by BQ123, but not by BQ788. The expression of P-Smad 3 was statistically decreased by ET-3 in A375 cells (P <0.05). Conclusions The expression of TGF-β1 could be enhanced by ET-1, but suppressed by ET-3. It is likely that endothelin receptor A mediates the phosphorylation of Smad 3 induced by ET-1.     

美罗培南鞘内注射与静脉滴注联用对颅脑外伤术后颅内感染的临床疗效评价

目的研究美罗培南鞘内注射与静脉滴注联用治疗颅脑外伤术后颅内感染的临床疗效评价。方法选择2016年9月至2018年10月我院神经外科就诊的颅脑外伤术后颅内感染66例患者作为受试者,运用随机数字表法分为对照组、试验A组以及试验B组,各22例。对照组静脉滴注头孢曲松和腰大池置管脑脊液外引流术治疗;试验A组在对照组基础之上,给予美罗培南鞘内注射;试验B组在试验A组基础之上,给予美罗培南静脉滴注;观察记录治疗前、治疗后第7天CSF蛋白质含量及白细胞计数、血生化相关降钙素原水平及白细胞计数。统计两组痊愈患者的住院时间、期间住院费用及不良反应发生情况。结果试验A组及B组治愈率明显高于对照组(P0.05)。试验B组治愈率明显高于试验A组(χ2=4.956,P0.05)。试验A组及B组住院时间明显短于对照组且住院费用要低于对照组(P0.05)。试验B组相较于试验A组来说住院费用无统计学差异(t=1.045,P0.05),但是住院时间更短(t=4.945,P0.05)。试验A组及B组不良反应发生率明显低于对照组(P0.05)。试验B组相较于试验A组来说不良反应发生率更低(χ2=5.194,P0.05)。治疗前,三组CSF检查的蛋白质含量及白细胞计数均无统计学差异(P0.05)。接受治疗后,试验A组及B组CSF检查的蛋白质含量及白细胞计数明显低于对照组(P0.05)。试验B组相较于试验A组来说CSF检查白细胞计数无统计学差异(t=0.109,P0.05),但是蛋白质含量下降明显(t=5.848,P0.05)。治疗前,三组血生化检查的降钙素原水平及白细胞计数均无统计学差异(P0.05)。接受治疗后,试验A组及B组血生化检查的降钙素原水平及白细胞计数明显低于对照组(P0.05)。试验B组相较于试验A组来说血生化检查的降钙素原水平及白细胞计数下降明显(t=28.861,t=3.108 P0.05)。结论美罗培南鞘内注射与静脉滴注联用疗效显著,无严重的毒副作用,值得在临床推广使用。     

CT引导下经皮肺穿刺切割活检64例分析

<正>经皮肤行肺穿刺切割活检是肺部非血管介入技术中的重要内容,一些影像学、纤维支气管镜检、痰细胞学检查等难以明确性质的病变,通过活检取得组织学资料可作出定性诊断,阳性率高,对于治疗方案的选择、制订以及治疗后随访、判断预后等方面均有重要作用。CT引导下肺穿刺切割活检术方法简单、微创安全。现将我院2011年7月~2013年5月行经皮肺穿刺切割活检的情况报告如下。临床资料一、一般资料本组共有64例患者,男50例、女14例,年龄47~79岁,平均65岁。所有病例术前均行纤维支气管镜检查、刷检及痰脱落细胞学检查未能明确诊断。临床症状多为咳嗽、咳痰、咯血、胸痛等,病程半个月~2年。病变位于肺实质周围型52例,位于肺实质中央型10例,肺内弥漫性病变2例。病灶     

ADAM10真核表达载体的构建及其对MCF-7增殖迁移的影响

目的构建ADAM10真核表达载体,观察稳定转染乳腺癌细胞MCF-7后对其增殖和迁移的影响。方法利用PCR技术扩增人ADAM10的基因片段,克隆入pcDNA3.1真核表达载体,阳性克隆通过PCR、酶切和测序鉴定。脂质体法将重组质粒转染MCF-7细胞,通过G418筛选出稳定转染ADAM10的细胞株,通过Western blot检测细胞ADAM10的表达,通过MTT法和Transwell法分别检测细胞的增殖和迁移变化。结果经PCR、酶切和测序鉴定证明ADAM10真核表达载体构建成功,Western blot结果显示稳定转染细胞的ADAM10蛋白高表达,MTT实验显示转染细胞增殖速度稍快于对照(P<0.05),Transwell结果显示转染细胞迁移能力比对照强(P<0.01)。结论成功构建ADAM10真核表达载体,稳定转染MCF-7细胞后可增强细胞的增殖和迁移,为进一步研究ADAM10生物学作用奠定基础。     

肿瘤坏死因子前体转换酶前肽结构域对TACE活性调节作用

目的： 探讨肿瘤坏死因子前体转换酶（TACE）的前肽结构域在TACE成熟过程中所起的作用，为人工干预炎症过程提供依据和手段。方法: 以pIRES2-EGFP质粒为载体，利用DNA重组技术分别构造含信号肽结构域+前肽结构域、全长结构域及缺失前肽结构域的真核表达重组体，根据其碱基数目分别命名为pIRES2-EGFP/T648、pIRES2-EGFP/T2472、 pIRES2-EGFP/T57-T1824；真核转染U937细胞；LPS刺激转染细胞后，用ELISA法及流式细胞技术检测TNF-α。结果: pIRES2-EGFP/T648的真核表达能显著抑制TACE的活性，减少sTNF-α分泌，抑制率达61.09%；pIRES2-EGFP/T57-T1824的真核表达对sTNF-α的分泌无影响；pIRES2-EGFP/T2472的真核表达能显著增加sTNF-α分泌。结论: 前肽结构域在TACE的成熟过程中起了双重作用，TACE抑制剂的研制和开发为抗炎药物的设计和改造提供了新的依据和方法。     

低温可调钠透析对血液透析相关低血压的影响及护理

目的 研究低温可调钠血液透析对透析低血压的影响及护理。方法 选择经常发生透析低血压的维持性血液透析患者40例,随机分为二组,观察组采用低温联合可调钠透析,对照组采用常规标准透析,观察3个月,测量患者的超滤量、血肌酐、血尿素氮、血钠、血压等指标。结果 两组透析后超滤量、血肌酐、血尿素氮、血钠均无明显差别,而低温联合可调钠透析组低血压发生率明显下降。结论 低温联合可调钠透析可以有效减少透析低血压的发生。     

曲马多对致痛小鼠血清核因子-κB及白细胞介素-2的影响

目的 研究曲马多对致痛小鼠血清核因子-κB(NF-κB)和白细胞介素-2(IL-2)的影响.方法 112只BALB/c雄性小鼠.体重25～30 g,随机均分为网组:曲马多组(T组,50 mg/kg曲马多)、吗啡组(M组,5 mg/kg吗啡)和假给药组(S组,生理盐水)、空白对照组(C组).各组在给药后1 h(T_1)、3 h(T_2)、12 h(T_3)、24 h(T_4)时眶静脉采血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清NF-κB及IL-2的含量,热板法测痛阈.结果 与S组比较,T组和M组的各时点痛阈增高(P<0.05).NF-κB:与C组比较,T_4时T组升高(P<0.05),T_3、T_4时M组和S组降低(P<0.05);与S组比较,T_2～T_4时T组升高;与M组比较,T_2～T_4时T组升高(P<0.05).T_1～T_3时T组IL-2含量高于M组(P<0.05).结论 吗啡对福尔马林致痛小鼠血清NF-κB和IL-2有抑制作用.曲马多对其具有增强作用,提示曲马多可能对疼痛所致的免疫抑制有改善作用.     

高血压合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的动态血压分析

目的分析高血压合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome,OSAS）患者24小时动态血压（ambulatory blood pressum,ABP）的特点。方法80例高血压患者行多导睡眠仪（polysomnography）,行动态血压监测,按监测结果分为单纯高血压病组（essentialhypertention,EH）、EH合并轻度OSAS组、EH合并中重度OSAS组。3组进行日间、夜间平均收缩压;日间、夜间平均舒张压;非杓型高血压发生率的对比。结果EH合并OSAS组（轻度及中重度）夜间平均收缩压、平均舒张压较EH组患者升高,EH合并中重OSAS组日间平均收缩压较EH组患者升高,均有统计学差异。EH合并OSAS组较EH组相比非杓型高血压发生率升高,有统计学差异;EH合并中重度OSAS组升高明显。结论OSAS与高血压有很强的相关性,EH合并OSAS患者非杓型高血压发生率高于单纯EH组。     

睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析

目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法（BSP）分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列（转录起始点-127～＋110 bp）进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。