亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞p38MAPK和COX-2表达的调控

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)和环氧化酶-2(cvclooxygenase-2,COX-2)的关系,从而研究p38MAPK和COX-2在糖尿病肾病中的作用及硒在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终末产物孵育大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1;先给予p38MAPK特异性抑制剂SB203580和亚硒酸钠分别预处理细胞系HBZY-1后,再给予上述4种因素孵育细胞系HBZY-1,观察细胞系HBZY-1 p38MAPK和COX-2的蛋白表达。结果高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终末产物均可独立激活p38MAPK,使其磷酸化表达量增加,COX-2蛋白表达也明显增加;SB203580预处理后,COX-2蛋白表达被显著抑制;亚硒酸钠预处理后,p38MAPK磷酸化被明显抑制,同时COX-2蛋白表达明显降低。结论p38MAPK调控COX-2的表达,表明p38MAPK是COX-2的上游激酶之一,p38MAPK和COX-2在糖尿病肾病的发生发展过程中起重要作用;亚硒酸钠可通过抑制p38MAPK而抑制COX-2表达,从而表明硒能有效地防治糖尿病肾病。     

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达环氧化酶2的影响

分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物孵育大鼠肾小球系膜细胞（RGMC），均可使RGMC环氧化酶（COX）-2mRNA和蛋白表达增加（均P〈0．01）；亚硒酸钠预处理后可抑制上述4种因素诱导的COX-2 mRNA和蛋白表达。亚硒酸钠可能通过抑制COX-2在RGMC的表达，从而在防治糖尿病肾病发生发展过程中发挥重要作用。     

活性氧簇与糖尿病肾病

糖尿病肾病以细胞外基质在肾脏的过度聚积为特征。在肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞,高糖能诱导细胞内活性氧簇的产生,而此作用可被蛋白激酶C、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶和线粒体电子转移链复合物Ⅰ抑制剂所抑制,表明蛋白激酶C、NADPH氧化酶及线粒体代谢在高糖诱导活性氧簇的产生中均发挥了重要作用。高糖和活性氧簇能激活信号转导级联和转录因子,上调转化生长因子-β1及细胞外基质基因和蛋白的表达。表明在糖尿病肾病的发生发展中,活性氧簇起着非常重要的作用。     

阿司匹林对糖尿病脑病大鼠认知功能及海马IGF-1R/p-IGF-1R表达的影响

目的 观察阿司匹林对糖尿病脑病大鼠认知功能、海马组织胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)及磷酸化胰岛素样生长因子1受体(p-IGF-1R)表达的影响,探讨阿司匹林可能的大脑保护作用机制.方法 大鼠随机分为正常对照组(Con)、阿司匹林对照组(Con+Asp)、糖尿病脑病组(DM)和阿司匹林治疗组(DM+ Asp),每组10只,后2组大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)建立糖尿病脑病大鼠模型,建模成功1周后,Con+ Asp组和DM+ Asp组给予阿司匹林[10mg/(kg· d)]灌胃,Con组给以同等剂量生理盐水灌胃,持续14周.第14周时Morris水迷宫观察大鼠认知功能变化,蛋白质印迹法观察大鼠海马组织IGF-1R及p-IGF-1R表达的变化.结果 经阿司匹林治疗后,糖尿病大鼠认知功能得到改善:Morris水迷宫实验DM+Asp组逃避潜伏期短于DM组(P＜0.01);DM+ Asp组平台穿越次数、目的象限时间均多于DM组(P＜0.01或P＜0.05).H-E染色结果显示:DM+ Asp组海马神经元数量较DM组增多.与Con组相比,DM组海马区p-IGF-1R表达减少(P＜0.01),经阿司匹林治疗后糖尿病大鼠海马区p-IGF-1R表达增多(P＜0.01),但各组大鼠海马总IGF-1R蛋白水平差异无统计学意义.结论 阿司匹林可能通过调控IGF-1R信号通路对糖尿病脑病大鼠发挥脑保护作用.     

Pin1在神经退行性疾病中的分子机制

Pin1（peptidylprolyl cis/trans isomerase NIMA-interacting 1）为脯氨酸肽酶异构酶的亚类，是一种催化蛋白质中磷酸化丝氨酸（苏氨酸）―脯氨酸基序之间的肽键异构化酶，具有调节蛋白质折叠、细胞内信号转导、转录、细胞凋亡等功能。Pin1在中枢和周围神经系统中广泛表达，可调节各种神经元发育、凋亡和突触活动。尽管有研究报道，Pin1与神经元底物相互作用影响特定的信号通路，但在神经元水平的生物学功能仍缺乏更全面的了解。此外，越来越多的证据表明，Pin1在衰老及与年龄相关的神经退行性疾病（包括阿尔茨海默病、帕金森病、额颞痴呆、亨廷顿病和肌萎缩侧索硬化）中发挥着至关重要的作用，在这些疾病中，其介导了从神经保护到神经毒性的截然不同的作用。因此，进一步研究Pin1在神经元中的生物学功能，明确Pin1在年龄相关和神经退行性疾病中的分子机制，可为临床治疗相关疾病提供分子靶点。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2023, 50(2): 67-70]     

微量元素硒的生理及超营养作用

目前，硒被认为是构成约20种真核蛋白质活性中心，并具有强力催化作用的一种必需微量元素。其中一些真核蛋白质具有调节氧化还原状态(主要为抗氧化作用)的特点。在这些生物化学体中，硒是作为最新发现的第21种氨基酸——硒半胱氨酸通过TGA终止遗传密码子的一种特殊基因序列而起作用。由于硒缺乏可引起机体生理状态下的不良后果以及加剧疾     

姜黄素对糖尿病脑病大鼠海马IGF-1/IGF-1R表达的影响

目的观察姜黄素对糖尿病脑病大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子受体(IGF-1R)表达的影响,分析姜黄素的脑保护作用机制。方法实验动物分为4组:正常对照组(A组)、正常姜黄素组(B组)、糖尿病脑病组(C组)和姜黄素治疗组(D组)。以大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病脑病模型,姜黄素持续灌胃12周。观察大鼠的体质量、血糖、糖化血红蛋白变化,采用免疫组化、RT-PCR法检测IGF-1及IGF-1R表达的变化。结果与A组和B组大鼠相比,C组大鼠血糖、糖化血红蛋白明显增高,体质量下降,海马区IGF-1表达明显减少(P<0.05),同样海马神经元IGF-1R表达减少(P<0.05)。经姜黄素治疗后,D组大鼠糖化血红蛋白下降,体质量增加,血糖变化不大,海马神经元IGF-1表达增多(P<0.05),随之海马神经元IGF-1R表达增多(P<0.05)。结论大鼠海马IGF-1/IGF-1R表达的减少可能在糖尿病脑病发病机制中发挥着重要的作用,姜黄素有脑保护作用,其机制可能是通过调控IGF-1信号通路调节实现的。     

脂联素对TNF-α介导的血管炎症反应的影响及意义

目的:探讨脂联素对TNF-α引起的血管内皮细胞炎症反应的影响.方法:体外培养HUVEC,随机分为正常组、单纯TNF-α刺激组和脂联素与TNF-α联合刺激组;HUVEC与脂联素联合孵育一段时间后再给予TNF-α刺激与单纯TNF-α刺激做对照,观察其N0、NOS、ET-1及MCP-1的表达情况.结果:HUVEC经TNF-α(10ng/ml)刺激6～12个小时后其NO、iNOS、ET-1及MCP-l的表达明显增加(p＜0.01);HUVEC在TNF-α刺激之前与脂联素共同孵育一段时间后,血管内皮细胞NO、iNOS、ET-1及MCP-1的表达明显降低(p＜0.01).结论:在体外,脂联素可以通过抑制某些炎症因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应.     

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达p38MAPK和MCP-1的影响

目的:观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病(DN)中的作用机制. 方法:分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终末产物(AGEs)刺激HBZY-1细胞;先给予100 nmol/L亚硒酸钠预处理后,再分别以上述4种刺激因素孵育HBZY-1细胞,分别检测HBZY-1细胞p38MAPK和MCP-1的表达并比较. 结果:4种刺激因素均可作为独立因素,导致HBZY-1细胞p38MAPK和MCP-1表达量增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的p38MAPK和MCP-1的表达. 结论:亚硒酸钠通过抑制p38MAPK和MCP-1在HBZY-1细胞的表达, 从而有效防治DN的发生发展,表明硒在DN的防治过程中发挥积极作用.     

亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素和nephrin表达的影响

目的 探讨亚硒酸钠对糖尿病肾病大鼠肾脏脂联素和nephrin表达的影响及其相互间的关系,从而研究亚硒酸钠与脂联素、nephrin在糖尿病肾病中的作用机制.方法 通过链脲佐菌素法加高脂饮食诱导模拟大鼠糖尿病肾病模型,实验设完全空白对照组、糖尿病组、糖尿病药物干预组,药物干预组每日给予亚硒酸钠溶液灌胃,其它组给予等量盐水溶液灌胃.10周后处死大鼠,取血、尿标本测相关生化指标,取肾脏组织分别提取DNA和蛋白质标本,石蜡切片光镜观察病理改变及免疫组化分析蛋白表达定位,实时定量PCR法检测脂联素mRNA表达、RT-PCR法检测nephrin mRNA表达,Western印迹法检测脂联素和nephrin蛋白表达.结果 亚硒酸钠干预组大鼠生化指标较糖尿病组明显改善,光镜下观察亚硒酸钠干预组病理改变较糖尿病组明显减轻.免疫组化分析,亚硒酸钠干预组脂联素蛋白着色较糖尿病组明显增强,且肾小管、肾小球内均有着色;糖尿病组nephrin蛋白表达着色较空白对照组减少,亚硒酸钠干预组较糖尿病组着色明显增多.亚硒酸钠干预组脂联素mRNA和蛋白表达明显高于糖尿病组和正常对照组,差异有统计学意义(均P＜0.05).亚硒酸钠干预组nephrin mRNA和蛋白表达均较糖尿病组明显增加,但仍较空白对照组降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 亚硒酸钠能促进大鼠肾脏脂联素和nephrin表达,表明亚硒酸钠、脂联素和nephrin在延缓和防治糖尿病肾病的发生发展中可能起重要作用.