大鼠脑出血血肿周边组织细胞凋亡的动态变化规律研究

目的:探讨脑出血后血肿周边组织细胞凋亡的变化规律。方法:①99只Wistar大鼠随机分为对照组、脑出血组(6、12 h,1、3、7、14、21及28 d);②TdT介导的dUTP缺口末端标记法检测TUNEL阳性细胞表达;免疫组化二步法测caspase-3及bax IR细胞表达;流式细胞术测细胞凋亡率。结果:脑出血后caspase-3及bax IR细胞表达1 d达高峰,持续14 d;TUNEL阳性细胞表达3 d达高峰,持续4周;FCM检测到的细胞凋亡率与TUNEL阳性细胞变化规律类似。结论:脑出血后产生凋亡性损伤,持续达4周;脑出血后可能存在较长的抗凋亡“时间窗”。     

多梗塞性痴呆患者脑脊液神经元特异性烯醇化酶含量的测定

目的研究多梗塞性痴呆(MID)患者脑脊液(CSF)中神经元特异性烯醇化酶(NSE)的变化及其临床意义.方法采用双抗体夹心ELISA法对55例MID患者CSF中NSE浓度进行测定,另选72例脑梗塞(CI)患者及32例正常人作为对照.患者的智能水平采用简易智能量表(MMSE)测定,并参考DSM-Ⅳ诊断标准及Hachinski缺血评分.结果 MID急性发作组及CI急性期组CSF中NSE浓度明显高于对照组(P＜0.01);MID稳定期组CSF中NSE浓度低于对照组(P＜0.05);CI恢复期组CSF中NSE的浓度与对照组无显著差异.CSF中NSE的浓度与MMSE评分无显著相关(r=-0.02257,P＞0.05).结论并非所有MID患者CSF中NSE呈一致性变化.CSF中NSE的含量变化可反映MID患者的脑组织功能状态.但是NSE并不是一种智能因子,并不能直接反映MID患者的智能状态.     

麦角新碱对电针红藻氨酸所致大鼠海马痫样放电的作用

本实验通过侧脑室注射红藻氨酸(KA)致癫,观察电针大椎、腰俞,微电泳麦角新碱(Ms)对海马痫样放电和海马脑电的影响,初步分析5—HT与电针抑制癫痫的关系。结果表明:1.电针穴位能抑制海马痫样放电和脑电,而电针穴位同时微电泳Ms时,Ms能80％翻转电针中的作用,表明内源性5—HT和5—HT能神经元能被电针穴位     

大鼠脑出血血肿周围半暗带及其时间窗的探讨

缺血半暗带的概念最早由Astrup于1977年提出。其主要特征为缺血性、可逆性、存在的时限性即时间窗。本文旨在探讨脑出血血肿周边脑组织随着出血时间的不同是否存在着类似脑梗死病理变化的半暗带,并进一步探讨其时间窗。     

HD02对前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化蛋白的作用

目的 观察神经干细胞(neural stem cell，NSC)增殖分化相关蛋白Notehl、hes5、MashI、NeuroD在HD02促进慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化中的作用。方法 雄性SD大鼠30只，分为正常对照组(6只)、模型对照组(12只)、HD02组(12只)，后两组又分成缺血后15，30d小组，每组各6只，制作SD大鼠前脑缺血模型，利用Western blot方法检测NSC增殖分化相关蛋白变化。结果 与正常对照组比较，造模后15，30d、慢性前脑缺血大鼠Nsc增殖分化相关蛋白表达水平显著升高(t=7．42—38．16，P&;lt;0．01)；与模型对照组比较，HD02可明显表达明显增加Notchl，hes5，Mashl，NeuroD表达水平(t=3．17—36．55,P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)。结论 HD02能增加慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化相关蛋白表达，这可能与HD02促进NSC增殖分化有关。     

老智灵口服液对血管性痴呆患者血小板功能的影响

目的探讨老智灵口服液对血管性痴呆(VD)患者血小板活化因子(PAF)、血小板功能及其认知功能的影响.方法认知功能评价采用简易精神状态检查量表(MMSE)、日常生活能力量表(ADL);VD患者分为老智灵组(39例)和银杏制剂组(32例);对照组为26例中枢神经系统非器质性疾病患者;测定患者血小板激活因子(PAF)、血小板粘附率(PAdT)、血小板聚集率(PAgT),血小板膜α-颗粒膜蛋白(GMP-140)的改变.结果老智灵组、银杏制剂组治疗前MMSE(10.64±1.98,12.36±1.46)、ADL(62.37±6.46,60.80±8.25)评分与对照组(MMSE28.12±1.30,ADL25.35±4.40)有显著差异,治疗后显著改善;两组治疗前PAF、PAdT、PAgT和GMP-140均显著高于对照组,治疗后显著改善.结论VD患者血小板激活因子和血小板功能亢进,与患者认知功能障碍的发生、发展有关;老智灵口服液可显著改善血小板功能,改善VD患者认知功能.     

血管性痴呆患者血小板活化机制的研究

为探讨血管性痴呆(VD)血小板活化机制 ,分别测定 32例VD患者、38例急性脑梗死(ACI)患者及 2 8名健康对照者血小板MLCK ,Ca2 + Mg2 + ATP酶活性和血小板 [Ca2 + ]i浓度。结果发现 ,与健康对照组相比 ,VD组和ACI组MLCK活性明显增加 (P <0 0 1) ,Ca2 + Mg2 + ATP酶活性明显降低 (P<0 0 5 ,P <0 0 1) ;VD组和ACI组血小板静息 [Ca2 + ]i均高于健康对照组并与MLCK活性呈显著正相关 (P <0 0 1) ,与Ca2 + Mg2 + ATP酶活性呈负相关 (P <0 0 5 )。提示 ,血小板MLCK和Ca2 + Mg2 + ATP酶活性以及血小板 [Ca2 + ]i浓度与血管性痴呆的发生有密切关系。     

凝血酶对培养大鼠皮层神经细胞的毒性作用研究

目的通过研究凝血酶对培养神经细胞的毒性作用,探讨脑出血凝血酶致神经细胞损伤的机制.方法采用新生1～2 d大鼠皮层神经元进行原代分散培养,分别在含150 U/ml凝血酶、150 U/ml凝血酶 150 U/ml重组水蛭素以及正常的培养液中孵育3 d后测定下列指标:①甲苯胺蓝染色法测定残存细胞数并计算神经细胞丧失率;②TdT介导的dUTP缺口末端标记法检测TUNEL阳性细胞的表达;③免疫组化二步法测caspase-3免疫反应性(Immune Reactivity,IR)细胞的表达;④培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果凝血酶组较水蛭素干预组及对照组神经细胞明显减少(P＜0.05);凝血酶组有较多的TUNEL阳性细胞及caspase-3 IR细胞表达,并明显多于对照组及水蛭素干预组(P＜0.05),凝血酶组TUNEL阳性细胞比率及caspase-3 IR细胞比率明显高于对照组及水蛭素干预组(P＜0.01或P＜0.05);与实验前相比,实验三组各组LDH活性均升高(P＜0.05),三组间两两比较LDH活性无统计学差异(P＞0.05).结论 150 U/ml的凝血酶可导致培养的神经细胞死亡,并可被凝血酶的特异抑制剂水蛭素阻断,细胞死亡的原因可能为细胞凋亡而非坏死,脑出血后凝血酶的释放是脑出血神经细胞凋亡性损伤的机制之一.     

皮质酮大鼠神经干细胞增殖分化的变化

目的观察皮质酮(corticosterone,CORT)大鼠神经干细胞增殖分化的变化,探讨肾阳虚证与CORT大鼠神经干细胞增殖分化的联系.方法成年雄性SD大鼠连续14 d皮下注射CORT(10mg·kg-1·d-1),采用免疫单标和双标方法检测成体大鼠神经干细胞及分化的功能细胞.给予CORT大鼠右归饮水煎剂灌胃,观察CORT大鼠神经干细胞增殖分化的变化.结果与正常对照组相比,CORT大鼠大脑皮层、海马及下丘脑区BrdU阳性细胞数明显减少,BrdU NF200,BrdU NeuroD,BrdU GFAP免疫荧光双标细胞数也显著减少(P＜0.01).给予右归饮后CORT大鼠BrdU阳性细胞以及免疫荧光双标细胞数明显增加(P＜0.01).结论CORT大鼠神经干细胞增殖分化能力显著下降,右归饮可显著增加CORT大鼠神经干细胞增殖分化能力.