小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的表达、纯化与鉴定

目的构建小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)工程菌,通过摸索其变、复性和纯化条件,得到高纯度高比活的重组mGM-CSF蛋白。方法以本实验室构建的hIL-2/mGM-CSF融合蛋白表达载体为模板,PCR扩增mGM-CSF基因,克隆入pET-11c表达载体,转化BL21,构建BL21/pET-11c/mGM-CSF工程菌,用本所专利方法提取包涵体,在含低浓度盐酸胍的复性液中复性,采用镍离子亲和层析纯化。结果工程菌采用TH肉汤培养,32℃、0.1mmol/LIPTG双重诱导,表达量达菌体蛋白总量的60.6%。提取包涵体在含1.5mol/L盐酸胍的谷胱甘肽复性液中复性效果最好,比活达4.2×106U/mg。经过亲和层析一步纯化,目的蛋白纯度达95%,比活与标准品相当。结论构建了高效表达mGM-CSF的工程菌,建立了其复性和纯化工艺,为进一步研究DC、GM-CSF体内抗肿瘤功能奠定了基础,并可为IL-2/GM-CSF双功能分子的生物学功能研究提供对照。     

糖尿病足坏疽不愈的危险因素分析及对策

糖尿病患者长期高血糖未控制者，容易发生糖尿病足坏疽(DFG)，轻者导致患肢功能障碍，重者导致病患残废甚至危及生命。国内外文献报道，欧美国家DFG发生率达10％以上，日本为2．37％。我院门诊报告DFG发生率为2．65％，与日本的发生率近似。自1993年以来我院内科病房收治了许多DFG患者，因各自情况的不同，DFG愈合所需时间差异较大。现报告我院同期收治38例DFG患者临床资料，并对影响DFG愈合的危险因素采用多因素回归分析，以反应各因素之间的交互作用，用来探讨糖尿病患者长期血糖控制未达标者发生糖尿病足坏疽后难以愈合的高危因素，旨在为糖尿病足坏疽的早期治愈提供依据。     

护理干预对消化道恶性肿瘤合并糖尿病患者生存质量的影响

目的探讨护理干预对消化内科消化道恶性肿瘤合并糖尿病患者生存质量的影响。方法选取2011年8月—2013年12月该院收治的消化道恶性肿瘤合并糖尿病住院病人66例,随机将其分为对照组和观察组各33例,对照组给予常规护理,观察组在对照组基础上给予恰当的护理干预。干预后采用症状自评表（SCL-90）、焦虑自评量表（SAS）和抑郁自评量表（SDS）对两组病人的生命质量和心理状态进行评估。结果护理干预后,观察组在生命质量和心理状态上较对照组有显著改善,两者分值比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论在常规护理基础上,对消化道恶性肿瘤合并糖尿病患者实施恰当的护理干预对于改善病人心理状态、稳定血糖、提高病人生命质量具有积极作用。     

8h之外医护工作质控方法探讨

目的寻求8h之外医护工作合理的质控方法,提高医疗质量。方法将自行设计的8h之外医护工作记录单应用于医护工作中进行试验,试验期4个月。结果应用8h之外医护工作记录实验组质控方法优于对照组。结论 8h之外医护工作记录单的应用是控制8h之外医护医疗质量的好方法。     

微阵列数据处理平台设计与实现

摘要：目的研制一个基于高性能计算机和Linux下运行的采用B/S模式的微阵列数据处理平台。方法构建以Apache服
务器为平台的WEB服务器,采用Perl语言编程,整合R语言与Bioconductor中的微阵列数据分析软件包,满足寡核苷酸微
阵列和双色点样微阵列实验数据的处理和分析,用户可在网页上提交数据和设置参数,结果通过网页以图形化的方式返
回。结果该平台可处理寡核苷酸微阵列和双色点样微阵列的数据,实现了数据质量评估、预处理、注释、统计分析等功
能,操作简单,分析速度快。运用本平台处理了结核杆菌不同临床分型的人类巨噬细胞寡核苷酸微阵列数据,即潜伏期、
结核病、结核性脑膜炎,为识别结核杆菌的敏感基因提供了线索。利用本平台还分析不同条件下用异烟肼处理结核分支
杆菌的效果,例如低氧条件和敲除katG基因的条件所获得的相关cDNA微阵列数据,发现用异烟肼处理的对数生长期调
节的基因将不会在休眠期模型中被差异调节;并且在休眠期,被差异调节的基因总数将减少。结论该平台功能资源整合
较全面,克服了当前微阵列数据分析软件或工具包在操作使用方面的不足,应用界面友好,结果显示直观,为生物学家开
展微阵列数据分析提供了方便。针对结核分支杆菌的案例研究验证了平台的有效性。
     

108例儿童阵发性室上性心动过速射频消融治疗

<正>阵发性室上性心动过速(paroxysmal supravent-ricular tachycardia,PSVT)是儿童时期较常见的心律失常,发作时可引起心悸、胸闷等症状,持续时间长者,可造成心力衰竭和阿斯综合征发作。药物治疗     

医务人员与住院患者鼻前庭携带金黄色葡萄球菌的研究

目的探讨医务人员和住院患者鼻前庭携带金黄色葡萄球菌(SAU)的相互关系和对发生与控制医院感染的影响。方法对医院发生SAU感染较多科室的医务人员和住院>1周患者的鼻前庭进行采样,常规方法对SAU鉴定和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)确认;K-B纸片扩散法进行药敏试验并分型;对SAU进行随机引物扩增多态DNA检测并做同源性分析;比较SAU的耐药谱分型和随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型之间的差异,判断医务人员和住院患者鼻前庭携带SAU的相关性。结果从290份医务人员和患者鼻前庭标本中分离出45株SAU,根据药敏试验结果,按耐药模式45株细菌分为5型;RAPD聚类分析可以将本组细菌分为8个类型。结论部分医务人员和患者之间以及患者与患者之间鼻前庭携带的SAU有较高的同源性。     

日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶的生物信息学鉴定与分析

目的 鉴定日本血吸虫中存在的腺嘌呤磷酸核糖转移酶,分析其蛋白结构特征.方法 采用双向同源比对、结构域搜索和系统发育分析等生物信息学手段,在已有转录组和蛋白质组数据基础上鉴定日本血吸虫的腺嘌呤磷酸核糖转移酶,并采用同源建模方法获得日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶的结构特征.结果 获得了2条腺嘌呤磷酸核糖转移酶的同源蛋白序列;分析了这2条序列的EST丰度、理化性质及蛋白三维结构等信息.结论 日本血吸虫至少存在2个腺嘌呤磷酸核糖转移酶的异构体.     

外周造血干细胞移植后及出现GVHD时T细胞β链CDR3谱型分析

目的 初步探讨外周造血干细胞(PBSC)移植后以及出现移植物抗宿主疾病(GVHD)时,外周血T细胞a链的CDR3谱型变化和特征.方法 采用免疫扫描谱型分析技术,监测1例重型β-地中海贫血移植前、移植后23 d、GVHD时(移植后28 d)患者外周血单核细胞(PBMC)及供者PBSC标本T细胞a链的CDR3谱型变化,基因扫描(GeneScan)和测序分析克隆性增生T细胞TCR分子特征.结果 患者移植前PBMC的24个TCR BV家族CDR3谱型均呈高斯分布,部分家族在移植后23 d、和GVHD时呈现为寡峰和单峰,同时部分家族消失,单克隆增生T细胞TCR beta链的测序结果 显示不同的CDR3区组成,设计特异的CDR3引物进一步分析提示其可能来源于干细胞移植后的分化.结论 PBSC移植后23 d,PBMC中的多数24TCRBV家族CDR3谱型表现为多克隆,GVHD时,部分家族出现明显的单、寡克隆增生,这些特异T细胞可能在GVHD中发挥重要作用.对移植前后TCRCDR3谱型和特异TCR分子特征的分析将有助于PBSC移植后免疫重建的评估和出现排斥反应时的特异性治疗.